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噬菌弧菌N1对淡水和海水养殖水体细菌群落影响PCR-DGGE分析

2019-09-25陈慧黠韩民泳于佳豪

广东海洋大学学报 2019年5期

陈慧黠,韩民泳,于佳豪,刘 琳

噬菌弧菌N1对淡水和海水养殖水体细菌群落影响PCR-DGGE分析

陈慧黠1,韩民泳1,于佳豪1,刘 琳2

(1. 大连海洋大学水产与生命学院,海洋生物资源恢复与生境修复重点实验室,辽宁 大连 116023;2 青岛农业大学生命科学学院, 山东省应用真菌重点实验室,山东 青岛 266109)

【】研究噬菌弧菌sp. N1在一个投放周期内对淡水和海水养殖环境中细菌、弧菌总数及细菌群落结构的影响。自市售微生态制剂分离蛭弧菌N1并进行分子鉴定,测定其裂解效果,制备高浓度N1菌液分别投放至淡水红鲤鱼(red carp)和海水仿刺参()养殖水体,采用细菌平板计数法及PCR-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)技术分析48 h内水体环境中细菌、弧菌总数及细菌群落结构变化。经鉴定蛭弧菌N1为噬菌弧菌,其对大肠杆菌()、溶藻弧菌()、黄海希瓦氏菌()、灿烂弧菌()、哈氏弧菌()和金黄色葡萄球菌()均有裂解效果。将噬菌弧菌N1投放进淡水和海水养殖环境的12~24 h,其能显著降低两种环境中弧菌含量(< 0.05)。DGGE分析显示添加噬菌弧菌N1后淡水组优势菌群弧菌属(,a1)和不可培养杆菌属(Uncultured bacterium, a5)在 12 h 以后含量有明显的减少,假单胞菌属(, a3)和红杆菌科属(, a6)菌含量增加。海水组优势菌群不可培养杆菌属(c2)菌在 12 h 时变成非优势菌群,而白杆菌属(,c1)增加成为优势菌群。噬菌弧菌N1在水中含量在24 h时降至最低。噬菌弧菌N1对海水和淡水环境中的弧菌属和不可培养杆菌属菌群有明显的裂解作用导致其含量下降,但也使假单胞菌属(),红杆菌科属和白杆菌属()菌群含量增加,但生物效应不明。为维持噬菌弧菌N1对弧菌的控制,需要24 h左右重新补充投放。

噬菌弧菌N1;养殖水体;PCR-DGGE分析;细菌群落;弧菌;不可培养杆菌属

蛭弧菌及其类似物(-and-like organisms,BALOs),简称蛭弧菌,是一个革兰阴性(G-)细菌类群,菌体呈弧状或短杆状,具有寄生性,能够裂解一些革兰阴性(G-)细菌,如大肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、幽门螺旋杆菌等[1]。蛭弧菌包括蛭弧菌科(Bdellovibrionaceae)和噬菌弧菌科(Bacteriovoracaceae),噬菌弧菌科分噬菌弧菌属(,Ba)和吞菌弧菌属(,Per)。蛭弧菌普遍存在于环境中[2-4],对环境微生物群落结构产生影响。

在水产养殖领域,随着我国高密度规模化养殖方式的普及,水产细菌性病害问题日益凸显,抗生素等药物的滥用导致药物残留加重,对食品安全问题造成威胁,直接对水产养殖业造成严重经济损失[5-6]。……

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