李珏丹 崔敏

[摘要]目的：观察氟化物对小鼠成釉细胞样细胞（LS8细胞）增殖、氧化应激以及凋亡的影响。方法：取对数生长期的LS8细胞，在培养液中分别加入终浓度为0、0.5、1、2、4和8mM的氟化钠（NaF）溶液，培養24h和48h后，CCK-8检测细胞增殖;倒置显微镜观察细胞形态;生化方法检测细胞丙二醛（MDA）含量及超氧化物歧化酶（SOD）活性;qRT-PCR检测过氧化氢酶（Cat）、谷胱甘肽过氧化物酶1（Gpx-1）和谷胱甘肽S转移酶（Gst）mRNA水平;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blotting检测caspase-9和caspase-3蛋白表达改变。结果：过量氟抑制LS8细胞增殖，且随着NaF浓度增加，细胞增殖呈下降趋势;过量氟显著增加LS8细胞内MDA含量，降低SOD活性及Gpx-1、Gst mRNA表达水平;过量氟引起LS8细胞形态改变和细胞凋亡，且伴随着caspase-9，caspase-3表达的显著增加。结论：过量氟抑制LS8细胞增殖，扰乱细胞的氧化与抗氧化平衡并诱发氧化应激，持续的氧化应激最终导致细胞凋亡。

[关键词]氟化物;LS8细胞;增殖;氧化应激;凋亡

[中图分类号]R329.2+8    [文献标志码]A    [文章编号]1008-6455（2019）09-0089-04

牙釉质发育期，机体长期摄入过量氟可导致氟牙症发生，引起牙釉质白垩色条纹或斑块，重者伴釉质缺损，严重影响患者的咀嚼功能和颜面美观[1-2]。然而氟牙症缺乏有效治疗手段，因而探究氟牙症发病机制，对于有效控制氟牙症发生具有重要现实意义。釉原蛋白在釉质形成后期未得到充分降解而滞留于釉基质中，影响釉质矿化，导致氟牙症发生[3-4]。釉原蛋白滞留的机制主要包括过量氟对釉基质蛋白、釉基质蛋白酶及成釉细胞的影响等，多数学者认为过量氟可下调成熟成釉细胞中釉基质蛋白酶KLK4表达[3，5-6]，对釉基质蛋白酶MMP20及釉基质蛋白的表达无明显影响[3，5，7-8]。……