陈方如，蒙 坚，刘群英，黄 熙

(桂林医学院附属医院皮肤性病科，广西桂林 541001)

系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus，SLE)是可以造成多系统、多器官功能损害的经典自身免疫性疾病，其发病机制仍有许多问题有待阐明[1]。近年来固有免疫在SLE发生发展中的作用越来越受到重视，树突状细胞(dendritic cells，DCs)的相关研究便是其中之一。在各种炎症信号的刺激下，DCs会产生各种细胞因子，从而诱导T细胞、B细胞的增殖与活化，病理情况下则会导致严重的自身免疫反应，产生大量自身抗体[2-3]。因此，本研究选择与DCs关系密切的细胞因子IL-6、IL-10和IL-23，检测它们在SLE患者中的表达水平，及其与临床表型的联系，以探讨SLE炎症形成的机制，为临床开展个体化靶向治疗提供参考依据。

1 资料与方法

1.1一般资料 选择2016年7月至2017年12月在本院皮肤科就诊的SLE患者共30例作为SLE组，其中男1例，女29例，年龄10～63岁，平均32.5岁，病程2个月至15年。SLE诊断符合美国风湿病协会1997年修正的分类标准[4]。对照组15例为本院健康体检者，其中男1例，女14例，年龄22～50岁，平均28.1岁。各组年龄、性别构成差异无统计学意义(P>0.05)。本研究获得本院伦理委员会批准，并得到患者知情同意。

1.2标本及临床资料采集 清晨采集SLE组患者和对照组体检者空腹静脉血5 mL， 置于乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝试管中，静置30 min后，3 000 r/min离心5 min，留取上层血清分装于1 mL EP管，置于-80 ℃冰箱冻存待测。所有患者均采集临床资料，包括SLE疾病活动指数(SLE disease activity index，SLEDAI)[5]、24 h尿蛋白、抗核抗体(ANA)、抗双链DNA(ds-DNA)抗体、补体等。所有研究对象相关实验室检查均由本院检验科完成。

1.3细胞因子的测定 人血清IL-6、IL-10和IL-23细胞因子水平测定采用酶联免疫吸附试验(ELISA)，试剂盒由北京达科为公司提供，严格按说明书操作。

2 结 果

2.1SLE组与对照组IL-6、IL-10和IL-23表达差异的比较 SLE组血清IL-6、IL-10及IL-23水平均明显高于对照组，两组比较差异均有统计学意义(P<0.01)，见表1。

表1 SLE患者血清中IL-6、IL-10及IL-23表达水平

2.2IL-6、IL-10和IL-23表达与SLE患者病情活动的关联性 SLE病情活动按SLEDAI评分来判断，30例患者中7例大于或等于15分，9例10～14分，10例5～9分，4例小于5分。将每例SLE患者相应的IL-6、IL-10和IL-23水平与SLEDAI评分进行直线相关分析，结果显示，SLEDAI评分与IL-6(R2=0.89，P<0.01)、IL-10(R2=0.85，P<0.01)均呈显著正相关，见图1。

2.3IL-6、IL-10和IL-23表达与实验室指标的关联性 SLE患者中，24 h尿蛋白量≥500 mg组的血清IL-6(P<0.01)及IL-10(P=0.02)水平显著高于24 h尿蛋白量<500 mg组。ANA滴度≥1∶320组的血清IL-6(P<0.01)水平显著高于ANA滴度<320组。抗dsDNA抗体阳性组血清IL-6及IL-10(P<0.01)水平显著高于阴性组。补体水平低下组的血清IL-6(P<0.01)及IL-10(P=0.03)水平显著高于正常组。IL-23的表达水平与24 h尿蛋白、ANA、抗dsDNA抗体及补体指标均无相关性(P>0.05)。见表2。

图1 IL-6、IL-10、IL-23表达水平与SLEDAI评分的关系

项目组别IL-6IL-10IL-2324h尿蛋白≥500mg33.53±7.6346.64±17.46114.03±16.86<500mg21.73±5.8733.39±8.05114.94±14.64P<0.010.020.88ANA滴度≥1∶32033.08±6.8046.83±15.43117.88±16.74<1∶32019.29±4.5129.45±5.79108.54±11.85P<0.010.150.12抗dsDNA抗体阳性33.83±6.8148.16±15.82116.51±17.18阴性20.44±4.9830.39±5.7811.77±13.44P<0.01<0.010.42补体水平低下33.38±8.1045.98±18.15117.17±15.05正常21.90±5.4834.15±7.53111.35±16.18P<0.010.030.32

3 讨 论

SLE临床表型复杂，其发病机制与遗传异质性、免疫调节异常等多种因素有关。天然免疫系统是人体保护自身的第一道防线，其中DCs连接着天然免疫与获得性免疫，其释放的各种细胞因子参与了诱导免疫耐受或启动免疫应答过程。本研究发现SLE患者血清中IL-6、IL-10和IL-23水平均较健康人群明显升高，它们与DCs有着较为密切的关系，在SLE炎性反应过程中可能发挥着重要的作用。

本研究中SLEDAI评分与IL-6、IL-10水平存在显著正相关关系，表明这两个指标对SLE的疾病活动情况具有一定的预测价值。同时24 h尿蛋白、ANA、抗dsDNA抗体及补体水平低下均与血清IL-6表达水平升高相关，而IL-10水平与SLE患者24 h尿蛋白、抗dsDNA抗体、补体水平异常也相关，这提示IL-6和IL-10可能主要从促进自身抗体的形成及肾脏损害两个方面参与了SLE 的发病过程。既往研究发现，IL-6可以促进细胞中心的活化和分化，参与系统性自身免疫及炎性反应的形成。在DCs中，IL-6水平异常升高可造成细胞的功能缺陷，打破免疫耐受平衡[6-7]。狼疮鼠模型中IL-6缺陷，可以延缓疾病的发展，减少CD4+和 CD8+T细胞的数量，减少肾小球IgG和C3的沉积。外源性IL-6可以促使B细胞产生的DNA增加，目前鼠人嵌合抗人IL-6R单抗Tocilizumab被美国食品药品管理局(FDA)批准用于类风湿关节炎(RA)治疗，但感染风险的增加限制了它的应用[8-9]。DCs分泌的IL-10是一个关键调节分子，如其表达异常则无法终止过度T细胞反应所造成的慢性炎症和组织损伤[10]。TEITZ-TENNENBAUM等[11]发现，如果阻断IL-10信号通路，则不同类型DCs比例将发生变化，进而可抑制免疫性炎性反应的程度。目前，在中国SLE人群中证实了IL-10的基因易感性，有研究提出IL-10可以作为SLE疾病活动度的预测指标[12-13]。

DCs在受到炎症信号刺激后会产生IL-23，这对效应细胞Th1和Th17的活化有十分重要的影响，而且还参与了自身免疫性滤泡Th细胞的扩增[14-15]。FISCHER等[16]报道，IL-23与狼疮肾、SLE患者肥胖及外周血管炎有关，还有研究报道IL-23的表达水平与SLE病情活动度密切相关[17]。但是本研究发现IL-23的表达水平与SLE病情活动、24 h尿蛋白、ANA、抗dsDNA抗体及补体指标无明显相关性，研究结果的差异性可能与种族人群不同有关，且本研究样本量较小，还需大样本研究进一步验证。

人体内各种免疫细胞产生了大量的细胞因子，反之细胞因子又影响着免疫细胞的分化、成熟和活化；它们之间相互作用形成了维持免疫平衡的复杂网络。DCs是天然免疫和获得免疫之间的重要桥梁，与DCs功能有关的细胞因子中，IL-6、IL-10及IL-23与之存在何种调控关系，以及在免疫网络中与其他细胞因子、免疫细胞之间的联系都还需深入探究。综上所述，IL-6、IL-10在SLE中的表达水平改变可以考虑作为新的潜在生物学标记应用于评估SLE的疾病活动，且为SLE个体化治疗的靶点提供了新的线索。