(1.贵州大学， 贵阳 550025； 2.贵州省印江县食用菌产业办， 贵州 印江 555200；3.贵州水西谣食用菌种植专业合作社， 贵州 黔西 551500；4.贵州永兴农业科技开发有限公司， 贵州 三都 558109)

香菇属中低温型变温结实性菇类，高温出菇的香菇品种少，导致夏季鲜香菇供应不足[1]。贵州香菇生产技术相对落后，存在夏菇生产菌种混乱、栽培技术不配套，效益低等现象。随着香菇产业化发展，对生产工艺、产量及品质提出了更高的要求[2]，其产量、质量及生产效益都与菌种质量优劣有关。本课题组以前期筛选出的适宜贵州栽培的高温香菇品种庆科212[3]为材料，研究不同配方培养基对其三级菌种生长情况的影响，以期为良种制定配套夏菇菌种制作良法，实现香菇错季栽培提供参考。

1 材料与方法

1.1供试菌种及地点

庆科212由贵州永兴农业科技开发有限公司引进并提供；试验在贵州大学、印江县、黔西县和三都县农业园区进行。

1.2试验设计

1.2.1母种培养基

1) 配方。

配方1：马铃薯200 g，葡萄糖20 g，蛋白胨3 g，琼脂20 g，磷酸二氢钾2 g，硫酸镁1 g，维生素B 110 mg，水1 000 mL。

配方2：马铃薯150 g，麦粒100 g，葡萄糖20 g，磷酸二氢钾0.5 g，硫酸镁0.5 g，蛋白胨2 g，琼脂20 g，维生素B 110 mg，水1 000 mL。

配方3：棉籽壳30 g，麦麸50 g，葡萄糖25 g，蛋白胨5 g，琼脂0.5 g，磷酸二氢钾3 g，硫酸镁1.5 g，维生素B 110 mg，水1 000 mL。

配方4：木屑14 g，麦麸6 g，胡萝卜200 g，葡萄糖20 g，琼脂20 g，蛋白胨5 g，磷酸二氢钾3 g，硫酸镁1.5 g，水1 000 mL。

2) 母种培养基制作。

用18 mm×18 mm的试管分装制作好的培养基，每个配方设置3次重复，每次重复各分装5支试管，灭菌摆斜面，接入庆科212菌种，于25 ℃恒温培养箱内暗光培养。

1.2.2原种培养基

配方1：竹柳木屑45%、麦粒33%、棉籽壳15%、麦麸5%、石膏1%、硫酸镁0.1%、过磷酸钙0.5%、糖0.5%、尿素0.5%。

配方2：梨枝屑45%、麦粒33%、棉籽壳15%、麦麸5%、石膏1%、硫酸镁0.1%、过磷酸钙0.5%、糖0.5%、尿素0.5%。

配方3：茶枝屑45%、麦粒33%、棉籽壳15%、麦麸5%、石膏1%、硫酸镁0.1%、过磷酸钙0.5%、糖0.5%、尿素0.5%。

配方4：桦槁木屑45%、麦粒33%、棉籽壳15%、麦麸5%、石膏1%、硫酸镁0.1%、过磷酸钙0.5%、糖0.5%，尿素0.5%。

1.2.3栽培种培养基

配方1：棉籽壳30%、竹柳木屑50%、麦麸18%、石膏1%、糖1%、过磷酸钙0.5%、尿素0.3%、50%的多菌灵0.1%，含水量为55%～60%。

配方2：棉籽壳30%、桦槁木屑50%、麦麸18%、石膏1%、糖1%、过磷酸钙0.5%、尿素0.3%、50%的多菌灵0.1%，含水量为55%～60%。

配方3：棉籽壳30%、梨枝屑50%、麦麸18%、石膏1%、糖1%、过磷酸钙0.5%、尿素0.3%、50%的多菌灵0.1%，含水量为55%～60%。

配方4：棉籽壳30%、茶枝屑50%、麦麸18%、石膏1%、糖1%、过磷酸钙0.5%、尿素0.3%、50%的多菌灵0.1%，含水量为55%～60%。

1.2.4原种、栽培种培养基制作

按照各配方比例，准确称量主(辅)料，搅拌混匀使培养料含水量达55%～60%，装袋(聚丙烯塑料袋，规格15 cm×55 cm×0.004 cm，投干料为1.5 kg/袋)，每配方设3次重复，每个重复为20袋，共240袋。装袋好后放入高压蒸汽灭菌锅灭菌2 h，冷却接种，避光培养。

1.3观察记载项目

1) 各配方母种试管培养基中菌丝生长情况(菌丝长势、颜色、密度、菌落边缘整齐度、生长势、气生菌丝量、满管天数和生长速度)。用划线法观察记录菌丝生长速度和满管天数。

2) 各配方原种、栽培种培养基中菌丝生长情况(菌丝长势、颜色、满袋天数和生长速度)。用划线法观察记录菌丝生长速度和记录满袋天数。

2 结果与分析

2.1不同配方试管培养基母种菌丝生长情况分析

表1可见，庆科212在配方2和配方4母种培养基上菌丝长势表现好，均为：菌丝洁白，浓密，整齐，粗壮，气生菌丝量多；配方3菌丝稀疏，气生菌丝量少，表现最差。

表1 各母种培养基配方中庆科212菌丝生长情况

配方菌丝长势满管时间/d生长速度/(mm·d-1)2菌丝洁白,浓密,整齐,粗壮,气生菌丝量多194.26±0.083a A4菌丝洁白,浓密,整齐,粗壮,气生菌丝量多213.62±0.101b B1菌丝洁白,较密,整齐,较粗壮,气生菌丝量多223.51±0.085b B3菌丝白,稀疏,较乱,较粗壮,气生菌丝量少233.48±0.040b B

菌丝满管时间，配方3(23 d)>配方1(22 d)>配方4(21 d)>配方2(19 d)，配方2菌丝满管时间最少。

菌丝生长速度由快到慢的顺序为：配方2(4.26 mm·d-1)>配方4(3.62 mm·d-1)>配方1(3.51 mm·d-1)>配方3(3.48 mm·d-1)；经多重比较，配方2菌丝生长速度极显著快于其它3个配方，配方1、配方4、配方3之间菌丝生长速度无显著差异。

庆科212母种培养基以配方2(马铃薯150 g，麦粒100 g，葡萄糖20 g，磷酸二氢钾0.5 g，硫酸镁0.5 g，蛋白胨2 g，琼脂20 g，维生素B 110 mg，水1 000 mL)为好。

2.2不同配方原种培养料菌丝生长情况分析

表2可见，庆科212菌丝长势在配方1和配方4上表现好，菌丝洁白，浓密，粗壮；配方2次之，配方3上表现稍差。

表2 各原种培养基配方中庆科212菌丝生长情况

配方菌丝长势满袋时间/d生长速度/(mm·d-1)4菌丝洁白,浓密,整齐,粗壮821.56±0.017a A1菌丝洁白,浓密,整齐,粗壮831.50±0.007b A2菌丝洁白,较浓密,整齐,较粗壮831.48±0.012b A3菌丝洁白,较浓密,较乱,较粗壮851.27±0.022c B

菌丝生长速度由快到慢的顺序为：配方4(1.56 mm·d-1)>配方1(1.50 mm·d-1)>配方2(1.48 mm·d-1)>配方3(1.27 mm·d-1)。经F测验和多重比较，配方4菌丝生长速度最快，与配方3达极显著差异，与配方1、配方2达显著差异；配方1、配方2显著快于配方3，配方1与配方2无显著差异。菌丝满袋时间以配方4最短，配方3最长。各处理菌丝满袋所需时间：配方3(85 d)>配方2(83 d)=配方1>配方4(82 d)。

庆科212原种培养料适宜配方以配方4(桦槁木屑15%、麦粒63%、棉籽壳15%、麦麸5%、石膏1%、硫酸镁0.1%、过磷酸钙0.5%、糖0.5%，尿素0.5%)为好。

2.3不同配方栽培种培养料菌丝生长情况分析

表3可见，庆科212菌丝长势在配方2和配方3上表现好，菌丝洁白，浓密，粗壮；配方1、配方4表现较差。从菌丝生长速度来看，由快到慢的顺序为：配方2(1.63 mm·d-1)>配方3(1.59 mm·d-1)>配方1(1.23 mm·d-1)>配方4(1.18 mm·d-1)。配方2和配方3差异不显著，二者与配方1、配方4达极显著差异；配方1和配方4差异不显著。

表3 各配方栽培种培养料庆科212菌丝生长情况

配方菌丝长势满袋时间/d生长速度/(mm·d-1)2菌丝洁白,浓密,整齐,粗壮891.63±0.013a A3菌丝洁白,浓密,整齐,粗壮901.59±0.023a A1菌丝洁白,较浓密,较粗壮931.23±0.002b B4菌丝洁白,较浓密,较粗壮941.18±0.018b B

庆科212栽培种培养料适宜配方以配方2(阔叶杂木屑20%、桦槁木屑60%、麦麸18%、石膏1%、糖1%、过磷酸钙0.5%、尿素0.3%、50%的多菌灵0.1%，含水量为55%～60%)和配方3(阔叶杂木屑20%、果树枝屑60%、麦麸18%、石膏1%、糖1%、过磷酸钙0.5%、尿素0.3%、50%的多菌灵0.1%，含水量为55%～60%)为好。

3 讨论与结论

3.1庆科212是适宜贵州夏季栽培的优良香菇高温菌株，具有产量高、抗性较强、商品性好，菌龄短等优点[4]。

3.2本试验中原种配方3、栽培种配方4培养基中茶枝屑含量都超过45%，其中菌丝生长势和生长速度都不理想，可能与茶枝屑混杂茶叶中茶多酚、醛类等抑菌物质增多，影响香菇菌丝的生长有关。为减少木材的消耗和生产成本，利用废弃茶枝条做香菇菌棒培养料，可增加生产效益，但茶枝屑含量的添加量不宜过多。

3.3本试验中原种配方4和栽培种配方2培养基主料为桦槁木屑，其中菌丝生长势和生长速度好，贵州省桦槁木材多，生长速度适中，可以作为庆科212原种和栽培种主料进行生产和推广应用。