黄锦波

（吉姆斯（广州）实验技术有限公司，广东 广州 510000）

姜黄片主要产自广东、四川等地。姜黄片既 可入药也可作食品添加剂[1-2]。相关研究表明，国内在2018年对姜黄片的需求量高达10万吨以上，其中四川姜黄片预估产量约1400～1600吨。种植过程中使用的杀虫剂中，有机氯为脂溶性物质，耐热耐酸，难分解，易在动植物内聚集[3]。而姜黄片的色素含量高，成分复杂，容易污染仪器检测器[4-5]，从而导致农残分离度不理想，检测结果不准确。本实验通过优化前处理方法与仪器分析等条件，能有效解决这些问题，本实验将阐述并证实本方法的真实性与可行性。

1 实验部分

1.1 仪器、试剂、标准品与样品

仪器：GC-2010Plus岛津气相色谱仪。

试剂：浓硫酸、乙酸、乙腈、正己烷（分析纯，广州试剂厂）。

标准品：六六六（BHC）滴滴涕（DDT）有机氯农残混标（上海安谱，批号 CDGG-111426-8，标示含量1000 μg/ml）；五氯硝基苯，三氯杀螨醇（上海安谱，批号CDGG-113826-2，标示含量1000 μg/ml）；氯菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯、溴氯菊酯混标（上海安谱，批号CDGG-120016-4，标示含量1000 μg/ml）；四川姜黄片（四川永祥，批号180910，规格：500 g/袋）。

1.2 实验方法

1.2.1 标准储备液的制备 准确量取14种有机氯标准品各0.1 ml，正己烷稀释并定容至100 ml，配制成1000 μg/L标准储备液，于冷冻中避光保存。

1.2.2 混合标准溶液制备 准确量取标准储备溶液1 ml于同一个10 ml量瓶中，加正己烷稀释成混合标准标准溶液100 μg/L。

1.2.3 混合标准工作液配置 准确量取一定量的混合标准溶液于一组10 ml量瓶中，以正己烷稀释并定容。此标准系列浓度范围为0.5～20 μg/L。

1.2.4 样品溶液的制备 粉碎适量样品，准确称取样品1 g于50 ml离心管中，加入约10 ml 1 %乙酸乙腈多次提取，50 ℃氮气浓缩至近干，以正己烷稀释并定容于10 ml离心管中，加入1 ml浓硫酸磺化，如此重复多次，直至浓硫酸层无色，有机层以氮气浓缩至近干，用正己烷稀释并定容至1 ml，过滤，上机待测。

1.2.5 色谱条件 采用Inert Cap 17（30 m×0.25 mm，0.25 μm）为分离柱， 电子捕获检测器，程序升温为初始温度60 ℃，30 ℃/min升至180 ℃，再以5 ℃/min 升至220 ℃ ，2 ℃/min 升至250 ℃，5 ℃/min升至270 ℃，保持35 min。

1.2.6 实验谱图 采用1.2.5项色谱条件进样测定，10 μg/L的BHC-滴滴涕、五氯硝基苯与20 μg/L的三氯杀螨醇、拟除虫菊酯的标准溶液谱图见图1。

图1 混合农残标准溶液GC谱图

由图1可见，农残色谱峰的分离度均≥1.5，理论塔板数均≥10 000。色谱条件适用于四川姜黄片中农残的测定。

2 结果与讨论

2.1 线性关系考察

按1.2.5项色谱条件，测定1.2.3项下系列浓度标准液，以峰面积（A）对浓度（C）进行回归，得回归方程，结果见表1。

表1 农残标准曲线考察结果

通过对14种农残的色谱分析，各物质均有稳定的保留时间及良好的峰型，且本方法在配制各浓度范围内线性关系良好，适于14种农残（α-BHC、五氯硝基苯、β-BHC、γ-BHC、δ-BHC、三氯杀螨醇、4, 4-DDE、4, 4-DDD、2, 4-DDT 、4, 4-DDT、氯菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯、溴氯菊酯）的含量测定。

2.2 仪器重现性试验

分别取浓度为5 μg/L的BHC，DDD，三氯杀螨醇与20.0 μg/L拟除虫菊酯类标准品溶液1 μl，连续进6针，记录峰面积，计算峰面积的RSD，结果见表2。

表2 重现性试验结果

由表2可见，14种农残峰面积RSD范围为0.3 %～4.6 %，表明本实验室的仪器的稳定性良好，适用于四川姜黄片中14种农残的测定。

2.3 灵敏度试验

2.3.1 称取样品1 g，准确加入10.0 μg/L有机氯混合标准溶液10.0 μl，按1.2.4项方法处理，按1.2.5项仪器条件进行测试，信噪比≥3，即为α-BHC，五氯硝基苯和γ-BHC的方法检出限。准确加入10.0 μg/L有机氯混合标准溶液30.0 μl，按1.2.4项方法处理后，按1.2.5项仪器条件测试，信噪比≥3，即为β-BHC，δ-BHC，4, 4-DDE，4, 4-DDD，2, 4-DDT与4, 4-DDT的方法检出限。

2.3.2 称取样品1 g，准确加入10.0 μg/L拟除虫菊酯类标准溶液0.2 ml，按1.2.4项方法处理后，按1.2.5项仪器条件测试，信噪比≥3，即为拟除虫菊酯类的方法检出限。准确加入 10.0 μg/L三氯杀螨醇标准溶液0.1 ml，按1.2.4项方法处理后，按1.2.5项仪器条件测试，信噪比≥3，即为三氯杀螨醇标准溶液的方法检出限，结果见表3。

结果表明，14种农残的方法检出限均满足现有标准对14种农残灵敏度的要求。

表3 农残灵敏度试验结果

2.4 加标回收率试验

精确称取四川姜黄片1 g，共9份，分别精密加入一定浓度的农残混合标准储备液，按1.2.4项制备样品溶液，按1.2.5项色谱条件进行测试，记录峰面积，计算14种农残的回收率，结果见表4。

结果表明，14种农残的回收率在70.3 %～118.5 %，均符合要求（回收率60 %～120 %）。

3 结论

按中华人民共和国卫生部GB 5009.146-2008《植物性食品中有机氯和拟除虫菊酯类农药多种残留量的测定》中农残的气相测定方法中并没有五氯硝基苯、三氯杀螨醇与氯氰菊酯，过程繁琐并耗时，同时灵敏度不佳，分离度并不能达到理想状态，同时凝胶渗透色谱价格与气质联用色谱仪昂贵，并不是每个常规实验室都有能力进行配备。姜黄片的脂溶性物质种类复杂，姜黄片素含量高，分离难度大，而本方法优化了样品的前处理与仪器分析条件，能很好分离农残。本操作方法简便，溶剂简单，仅用气相色谱就可快速和准确测定姜黄片中14种农残的含量，同时能达到理想的分离度与理论塔板数，能很好地优化GB 5009.146-2008 《植物性食品中有机氯和拟除虫菊酯类农药多种残留量的测定》中农残的检测方法，为广大的检测工作者提供一种检测农残的参考技术。

表4 加标回收率实验结果