蔡林林，胡玉红，冯晓娜

（佳木斯大学附属第一医院，黑龙江 佳木斯 154003）

子宫内膜癌是目前呈上升趋势的女性生殖道恶性肿瘤，严重威胁着女性健康，绝大多数为子宫内膜样腺癌,常与糖尿病、肥胖、高血压、高雌激素水平相关。大量相关研究表示恶性肿瘤的快速发展、侵袭与肿瘤的新生血管密不可分，调节肿瘤血管新生的促进和抑制作用，可能成为肿瘤预防、筛查诊断以及靶向治疗的关键问题。PlGF是血管内皮生长因子VEGF家族中细胞因子，属于分泌型糖蛋白。PlGF对新生血管的形成起促进作用[1-2]。过氧化物酶体增殖因子活化受体(PPARs)属于转录因子，通过与配体结合发挥其作用，PPARγ属于其中一员，PPARγ拥有广泛的生物学功能，其中包括肿瘤血管生成及细胞增殖的抑制作用，另外还可诱导肿瘤细胞凋亡[3]。本实验采用免疫组化方法，观察增生期子宫内膜(对照组)和子宫内膜样腺癌(实验组)中，PlGF及PPARγ的表达情况，期待为子宫内膜腺癌的发展及治疗方向和预后干预提供新理论支持。

1 资料与方法

1.1 一般资料

样本来源于佳木斯大学附属第一医院病理科，选择2015～2019年子宫内膜癌术后病理诊断为子宫内膜样腺癌标本40例，年龄40～69岁，年龄＞50岁25例，≤50岁15例。行盆腔淋巴结清扫术19例，其中淋巴转移5例，淋巴未转移14例。年龄40-69岁，年龄＞50岁25例，≤50岁15例。浸润深度＜1/2组23例，≥1/2组17例；分组与国际妇产科联盟（FIGO）标准相符，病理分级：G1（高分化）24例，G2及G3（中低分化）16例；选取病例均经手术治疗，未行放射线或激素治疗。对照组另择20例正常增生期子宫内膜。所有病理数据由病理科主任医师确诊，并提供完整。

1.2 主要实验试剂

PlGF兔抗人多克隆抗体（Abcam）、PPARγ兔抗人多克隆抗体（Abcam），DAB显色试剂盒（北京中杉金桥）。

1.3 方法

采用免疫组化(SP)法检测。(1)标本切片后的脱蜡、水化处理；(2)高温高压抗原修复；(3)内源性过氧化物酶阻断后，再加入一抗，恒温保存；(4)加入二抗，缓冲液清洗；(5)染色、脱水、封片镜检。整个过程严格按照标准完成。PlGF及PPARγ阳性判断标准：依据以下评分标准行半定量分析。①染色强度评分标准：未着色0分；由浅到深，淡黄色1分；棕黄色2分；最深为棕褐色3分；评分时可见Pl GF主要表达细胞质，PPARγ主要表达细胞核。②细胞数评分标准：高倍镜（×400）下随机观察5个视野，阳性细胞数≤5%者0分，6%～25%者1分，26%～50%者2分，＞50%者3分。两项评分的乘积作为最后得分：0或1分表示阴性，2～3分表达弱阳性，4分及以上表示强阳性，弱阳性及强阳性记为阳性。

1.4 统计学方法

通过SPSS 19.0统计软件，行卡方(x2) 检验样本资料阳性率，采用Spearman等级相关分析PlGF、PPARγ相关性。P＜0.05则说明差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 子宫内膜样腺癌中与对照组中PlGF及PPARγ的表达

在增生期子宫内膜组、子宫内膜样腺癌组PlGF的阳性表达率是40%、72.5%，PPARγ阳性表达率是：75%、32.5%。由此得出：子宫内膜样腺癌组中，PlGF呈高表达；PPARγ呈低表达。差异均有统计表学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 PlGF、PPARγ在不同内膜组织中的表达

2.2 PlGF、PPARγ的表达与子宫内膜样腺癌临床参数的关系

PlGF在高分化组与中低分化组的阳性表达率分别为58.3%、93.7%，差异有统计学意义(P＜0.05)；浸润深度＜1/2组与≥1/2组阳性表达率分别为56.5%、94.1%，差异有统计学意义(P＜0.05)；有淋巴转移组与无淋巴转移组的阳性表达率分别为100%、50%，差异有统计学意义(P＜0.05)；而年龄＞50组与≤50组的阳性表达率分别为80.0%、60.0%，差异无统计学意义(P＞0.05)。

PPARγ在高分化组与中低分化组的阳性表达率分别为45.8%、12.5%，差异有统计学意义(P＜0.05)；浸润深度＜1/2组与≥1/2组阳性表达率分别为47.8%、11.8%，差异有统计学意义(P＜0.05)；有淋巴转移组与无淋巴转移组的阳性表达率分别为20%、71.4%，差异有统计学意义(P＜0.05)；而年龄＞50组与≤50组的阳性表达率分别为36.0%、26.7%，差异无统计学意义(P＞0.05)。

2.3 子宫内膜样腺癌中PlGF、PPARγ的相关性

本实验显示，在4 0 例子宫内膜样腺癌组织中，PlGF(+)且PPARγ(-)25例，PlGF(-)且PPARγ(+)9例；PlGF及PPARγ(+)表达4例，PlGF及PPARγ(-)表达2例。通过Spearman等级相关性分析（r=-0.65，P＜0.05）PlGF、PPARγ相关性，表示二者可能存在负相关。

3 讨 论

子宫内膜癌是妇科三大恶性肿瘤之一，其发病率呈上升趋势，最常见病理类型是子宫内膜样腺癌，其病因与多种因素相关。血管新生与侵袭能力是肿瘤生长转移的重要方面。胎盘生长因子（PlGF）于众多肿瘤组织中表达升高，故被报道称潜在肿瘤标志物。Parr[4]研究显示，在乳腺癌中，PlGF处于明显高表达，且与转移及预后相关。研究发现，在肾细胞癌[5]、肝癌、肺癌[6]等多种恶性肿瘤中，PlGF均显现高表达且正比于微血管密度（MVD）[7],提示PlGF主要通过影响血管新生对肿瘤生长、进展起促进作用。PPARγ可表达于肿瘤组织的血管内皮细胞中，且作用于血管生成多个途径，通过多种方面抑制血管生成，[8]且近年的研究已证实，PPARγ与脂肪细胞分化、肥胖、胰岛素抵抗、糖尿病及肿瘤等多种疾病密切相关，为肿瘤研究提供了新的靶点。[9]已有报道多种肿瘤的发展过程，与PPARγ密切相关。提示PPARγ与子宫内膜癌的发生、进展存在相关性,并可能在以后预防、治疗中发挥一定作用。本研究结果显示，PlGF于子宫内膜样腺癌呈高表达，且随着病情进展阳性表达越高；PPARγ则呈低表达，且随着病情进展阳性表达越低。两者于子宫内膜样腺癌都与年龄无明显关联。(P＞0.05)。

综上，本研究的结果表明，PlGF及PPARγ的异常表达对肿瘤的生长、转移具有促进作用，但通过不同机制发生各自作用。子宫内膜样腺癌的生长过程中，PlGF主要促进血管新生，PPARγ则通过多种途径抑制血管新生及肿瘤细胞生长。PlGF、PPARγ在子宫内膜样腺癌进展及转移中作用相反。根据PlGF、PPARγ与众多肿瘤的血管新成以及发生、进展密切相关，PlGF、PPARγ在子宫内膜样腺癌中表达及相关性研究，有助于为子宫内膜样腺癌的诊断、治疗提供新的理论支持，但二者参与子宫内膜样腺癌发展的具体作用机制仍需进一步探索。