刘慧平 牛 艳

乳腺癌是一种妇科常见肿瘤，近些年在我国的发病率显著上升，且发病年龄也呈现年轻化趋势[1-2]。目前的研究结果显示，乳腺癌的发病原因众多，病情发展为阶段性，临床上通常将组织学分级、病理学分级、肿瘤转移情况和肿瘤体积等作为病情和预后的判断依据[3-4]。表皮生长因子受体(EGFR)通路是影响肿瘤的重要通路，包括HER-1、HER-2、HER-3和HER-4等成员[5]。HER-2是由原癌基因HER-2/neu编码的一种分子量为185 KD的跨膜糖蛋白p185，HER-2基因表达与细胞分化、转移、迁移等密切相关[6-7]。研究表明，25%～30%的浸润性乳腺癌患者有HER-2基因扩增或蛋白过表达，检测HER-2表达能为乳腺癌患者的预后判定提供依据[8]。在乳腺癌的影像学诊断中，钼靶X线操作技术简单，但是在临床诊断中对患者有一定的损伤[9]。MRI具有无电离辐射、可进行功能成像、软组织对比性良好等特点，但是检查费用比较贵，很难进行普及[10]。超声检查具有无创伤、简便快速等优点，其中彩色多普勒超声完善了传统超声指标不足的缺点，从全新的视角为肿瘤的评价提供了更多的信息[11]。本文具体探讨了乳腺癌HER-2基因表达与彩色超声表现的关联性，先将研究结果做如下报告。

1 资料与方法

1.1 一般资料

采用回顾性、总结研究方法，选择2013年8月到2018年1月在我院就诊的140例乳腺肿块患者为研究对象，纳入标准：女性患者，首次诊治，年龄20～80岁，临床资料完整、详细。排除标准：合并严重心肝肾异常患者；处于哺乳期与怀孕期的女性。140例中经病理诊断为乳腺癌80例(恶性组)，包括浸润性导管癌48例，浸润性小叶癌32例；良性乳腺肿块60例(良性组)，包括乳腺纤维腺瘤25例，乳腺腺病20例，乳腺导管内乳头状瘤15例。本研究得到医院伦理委员会的批准。

恶性组患者年龄24～78岁，平均年龄(45.22±5.13)岁；平均体重指数为(23.45±2.19)kg/m2；平均病程为(7.29±1.28)年；绝经状态：未绝经16例，绝经64例；临床分期：Ⅰ期34例，Ⅱ期30例，Ⅲ期16例；淋巴结转移40例；组织学分化类型：高分化30例，中分化30例，低分化20例。

良性组患者年龄25～76岁，平均年龄(45.14±3.89)岁；平均体重指数为(22.65±1.83)kg/m2；平均病程为(4.11±1.82)年；绝经状态：未绝经18例，绝经42例。

1.2 超声检查

超声检查：采用GE Logiq E9超声诊断仪，配有ML6-15线阵探头。患者取仰卧位，充分暴露双侧乳腺及腋窝，于乳腺部位进行横向、纵向、扇形扫查。在彩色多普勒超声诊断中，嘱患者吸气后屏气，获得多普勒血流频谱，观察肿瘤内及其周边的血流分布情况，显示胸外侧动脉，测定记录血流峰值速度、阻力指数。

1.3 HER-2表达检测

兔抗HER-2单克隆抗体、即用型快捷免疫组化试剂盒购自福州迈新生物技术开发有限公司，其余生化试剂都购自北京中杉金桥生物技术有限公司。2组患者手术切除的病灶组织标本离体后立即用10%中性福尔马林固定，制作成4 μm切片后进行免疫组化分析。肿瘤切片免疫组化染色后，置于光学显微镜下观察，并分析和处理。本实验的阳性分析用双盲法，每张切片图片分别由两位资深病理科医师做出判断。Her-2阳性细胞染色结果显示棕黄色均匀细颗粒主要分布在胞质和细胞膜上，根据病变细胞中阳性细胞所占百分比以及着色深浅来判断和进行分级，HER-2蛋白(-)或(+)列入阴性范围；(++)及其以上列入阳性范围。将已知Her-2阳性肿瘤标本作为阳性对照，将PBS液代替探针混合液作为阴性对照。

1.4 统计方法

对所获得的计量和计数数据利用SPSS 18.00软件进行分析，以均数±标准差或构成比表示，差异性检验用t检验或卡方χ2检验，相关性分析采用直线相关分析，检验水准为α=0.05。

2 结果

2.1 HER-2表达情况对比

恶性组与良性组的HER-2表达阳性率分别为60.0%(48/80)和10.0%(6/60)，恶性组显著高于良性组(χ2=54.945，P<0.05)。

2.2 彩色超声表现

恶性组的胸外侧动脉血流峰值速度和阻力指数高于良性组，对比差异都有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 2组超声动脉血流情况对比

2.3 乳腺癌不同病理特征的HER-2表达、血流峰值速度及阻力指数差异分析

在80例乳腺癌患者中，HER-2表达情况、血流峰值速度、阻力指数在不同临床分期、淋巴结转移、组织学分化中的对比，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

2.4 乳腺癌HER-2表达与彩色超声表现的关联性

在80例乳腺癌患者中，直线相关分析显示HER-2表达阳性与胸外侧动脉血流峰值速度、阻力指数都有显著正相关性(P<0.05)。见表3。

3 讨论

乳腺癌一直居妇科肿瘤的首位，利用目前的治疗方法治疗后的中晚期癌症患者的5年生存率不高，治疗效果仍旧不理想[12]。目前的肿瘤学研究结果显示，除肿瘤细胞增殖外，信号传导通路的变化也是恶性肿瘤生物发生和发展因素[13]。HER-2的表达触发信号下游的蛋白磷酸化，进而调节血管生成和细胞增殖。一些乳腺癌患者体内HER-2蛋白表达显著上调，从而促发下游信号通路，引起下游蛋白磷酸化，从而加快肿瘤的发生和发展[14]。

表2 乳腺癌不同病理特征的HER-2表达、血流峰值速度、阻力指数差异分析

表3 乳腺癌HER-2表达与彩色超声表现的关联性(n=20)

本研究显示恶性组与良性组的HER-2表达阳性率分别为60.0%和10.0%，恶性组显著高于良性组(P<0.05)。HER-2能够编码一种跨膜酪氨酸激酶受体，调节细胞的生长、分化和增殖，通过与EGFR家族成员及其配体之间相互作用在细胞间传递信号[15]。相关研究表明，HER-2的过度表达可加快肿瘤新生血管生成、抑制细胞凋亡，提高肿瘤细胞迁移和侵袭能力，延长肿瘤细胞存活周期，破坏机体组织抗侵袭屏障等[16]。

我国近年来的乳腺癌发病率正以每年2.0%的速度递增，严重威胁着女性身心健康。早期发现乳腺癌、早期治疗有助于改善患者的预后。目前早期诊断与筛查乳腺癌的方法包括MRI、钼靶、超声等。超声是诊断乳腺癌的常见影像学检查方法，相关研究认为乳腺癌的超声声像图表现可见病灶直径均大于3 cm，认为乳腺肿块的良恶性可能与病灶的直径大小有关[17]。不过常规超声的早期诊断率比较低，误诊率也比较高。彩色多普勒超声具有高灵敏度、特异性和准确率的特点，对乳腺胸外侧动脉进行检测时，不仅能对其动脉血流量的半定量测定，还可以显示动脉实质、血管及血流动力学等状况[18]。本研究显示恶性组的胸外侧动脉血流峰值速度和阻力指数高于良性组，主要原因是由于乳腺癌肿瘤的的快速增殖，使得胸外侧动脉变细、狭窄结缔组织增加，导致胸外侧动脉血流速度减慢。

只有对HER-2表达状态进行科学准确的分析，才能做到既有助于乳腺癌的有效诊治，又能为患者的预后提供依据[19]。本研究显示在80例乳腺癌患者中，HER-2表达情况在不同临床分期、淋巴结转移、组织学分化中的对比差异有统计学意义(P<0.05)。HER-2同肿瘤细胞增殖或转移直接相关，乳腺癌中HER-2的高表达可增强肿瘤的细胞的迁移能力。有研究通过分析认为过表达HER-2可触发多种转移机制，进而提高肿瘤细胞转移能力，过表达HER-2可调节上皮细胞钙黏蛋白等黏附因子的表达，进而提高肿瘤细胞转移能力[20]。

典型的乳腺癌因其向周围组织浸润，使得周边呈毛刺样生长，纵横比例大于1，部分内部可见较丰富血流。典型的良性结节则具有边界清晰，形状规则，有包膜，后方回声增强等特点。然而良恶性肿瘤内部血流会出现一定的重叠，诊断特异性不高[21]。本研究直线相关分析显示乳腺癌患者的HER-2表达阳性与胸外侧动脉血流峰值速度、阻力指数都有显著正相关性(P<0.05)。当前也有研究表明30%以上的人类恶性肿瘤的上皮源性肿瘤都普遍过量表达HER-2，可见HER-2基因的过表达可能同肿瘤的发生发展直接相关[22]。HER-2表达通过调节上皮细胞钙黏蛋白等黏附因子的表达来促进迁移，也可启动多种转移机制来加快肿瘤细胞转移[23-24]。

总之，乳腺癌HER-2基因多呈高表达状况，胸外侧动脉血流峰值速度、阻力指数也显著增高，两者存在显著关联性。