陈立娇 王锐 姚东校

摘要    建立了水果中甲基异柳磷农药残留的气相色谱-质谱仪检测方法。水果样品用乙腈匀浆提取，盐析离心后，取上清液，经固相萃取柱净化，用乙腈-甲苯溶液（3+1）洗脱农药及相关化学品，溶剂交换后用安捷伦7890B-7000D气质联用仪检测。结果表明，空白样品加标回收率范围为88.6%～112.8%，相对标准偏差小于10%，甲基异柳磷的检出限为0.001 mg/kg。该方法操作简便、准确、灵敏、重现性强、回收率高、基质干扰少，适用于农药残留量的测定。

关键词    水果;气质联用仪;甲基异柳磷;农药残留;测定

中图分类号    TS207.5+3        文献标识码    A        文章编号   1007-5739（2019）09-0092-02

Abstract    A method for the determination of methyl isosalphos pesticide residues in fruits by gas chromatography-mass spectrometer was established.Fruit samples were extracted with acetonitrile homogenate，salted out and centrifuged，the supernatant was removed，purified by solid phase extraction column，and pesticides and related chemicals were eluted with acetonitrile-toluene solution（3+1）. After solvent exchange，Agilent 7890B-7000D GC-MS was used for detection. The results showed that the recoveries of blank sample ranged from 88.6% to 112.8%，the relative standard deviation was less than 10%，and the detection limit of methyl isoprophos was 0.001 mg/kg.The method is suitable for the determination of pesticide residues for its simple operation，accuratcy，sensitivity，reproducibility，high recovery rate and little matrix interference.

Key words    fruit;GC-MS;methyl isosalphos;pesticide residue;determination

甲基异柳磷是一种土壤杀虫剂，对害虫具有较强的触杀和胃毒作用。甲基异柳磷杀虫广谱、残效期长，是防治地下害虫的优良药剂。目前，检测甲基异柳磷的方法只有《植物性食品中甲基异柳磷残留量的测定》（GB/T 5 009.144—2003），该方法繁琐和试验时间长，不适应大批量多参数的农药残留检测。现参照《水果和蔬菜中500种农药及相关化学品残留量的测定气相色谱-质谱法》（GB 23200.8—2016）[1]对水果中的甲基异柳磷进行检测，已有研究表明，该方法完全能满足甲基异柳磷残留检测要求，简便、快速、高效，适用于多参数、大批量的农药残留检测，具有重要的实用价值和推广价值。

1    材料与方法

1.1    试验材料及设备

供试材料为市售新鲜苹果、梨。

仪器设备有安捷伦7890B-7000D 气质联用仪，配有電子轰击源（EI）、分析天平、均质器、离心机、漩涡混合器 、鸡心瓶、氮气吹干仪、活性炭氨基固相萃取复合柱。

主要试剂有甲苯、氯化钠，均为分析纯;乙腈、正己烷，均为色谱纯;无水硫酸钠，为分析纯，用前在650 ℃灼烧4 h，贮于干燥器中，冷却后备用[2-3]。

标准物质有甲基异柳磷标准品，浓度为100 μg/mL，批号201809，来源于农业部环境保护科研检测所;环氧七氯内标，纯度为98.50%，批号122771，来源于 Dr. Ehrenstorfer Gmbh。

1.2   标准溶液的配制

1.2.1    标准储备液。吸取甲基异柳磷标准溶液1 mL于10 mL容量瓶中，用丙酮稀释定容至刻度，配制成10 μg/mL甲基异柳磷标准储备液。

1.2.2    内标溶液。称取环氧七氯0.044 70 g于50 mL容量瓶中，用丙酮定容至刻度，配成880.59 μg/mL的标准储备液。取标准储备液1.136 mL于10 mL容量瓶中，用丙酮定容至刻度，配成100 μg/mL的环氧七氯内标溶液。

1.2.3    基质标曲。称取6个阴性样品，经过提取、净化后获得样品空白提取液，分别吸取甲基异柳磷标准储备液和环氧七氯内标，用样品空白提取液定容[2，4-5]，配成10、50、100、400、600、1 000 ng/mL系列标准曲线，供气质联用仪测定。

1.3    样品处理

1.3.1    提取。称取20 g试样（精确至0.01 g）于80 mL离心管中，加入乙腈40 mL[3，6]，用均质器在15 000 r/min条件下匀浆提取60 s，加入氯化钠5 g，再匀浆提取60 s，将离心管放入离心机，在9 000 r/min条件下离心3 min，取上清液20 mL，待净化。

1.3.2    净化。在活性炭氨基固相萃取复合柱中加入约2 cm高无水硫酸钠，柱下接鸡心瓶放在固定架上。加样前先用4 mL乙腈-甲苯溶液（3+1）预洗柱，当液面到达硫酸钠的顶部时，迅速将上述样品浓缩液转移至复合柱上，再每次用2 mL乙腈-甲苯溶液（3+1）3次洗涤样液瓶，并将洗涤液移入柱中。在复合柱上加上50 mL贮液器，用25 mL乙腈-甲苯溶液（3+1）洗涤复合柱[7-8]，收集全部滤液于鸡心瓶中，并在40 ℃水浴中旋转浓缩至约0.5 mL。每次加入5 mL正己烷在40 ℃水浴中旋转蒸发，进行溶剂交换2次，最后使样液体积为1 mL左右[2-3]，加入内标溶液40 μL，混匀，用于气相色谱-质谱测定。

1.4    气相色谱条件

色谱柱：Agilent HP-5 ms 30 m×0.250 mm×0.25 μm。柱温：60 ℃（保持1 min）→以40 ℃/min升到170 ℃→以10 ℃/min升到310 ℃（保持8 min）。进样口温度为280 ℃，离子源为EI，离子源温度为280 ℃，GC-MS传输线温度为280 ℃，载气为氦气，压力为前压1.0 mL/min、后压1.2 mL/min，进样方式为不分流进样，扫描方式为SIM。定量离子为199 m/z，定性离子231 m/z、241 m/z。

1.5    方法验证

1.5.1    精密度。重复将浓度为1.0 μg/mL的基质标准点进样6次，验证试验结果。

1.5.2    回收率。用空白基质样品进行0.2、0.4、0.8 μg/mL 3个水平的添加回收试验，每个水平取6个平行样按1.3提取净化方法进行操作，供气质联用仪测定。

2    结果与分析

2.1    色谱检测结果

标准溶液的配制结果表明，基质试验的线性范围为10～1 000 ng/mL。峰面积与回收浓度呈现良好的线性关系，相关系数大于0.99，峰型良好，基本符合试验要求。甲基异柳磷的出峰时间、离子色谱图分别如图1、2所示，可以看出，甲基异柳磷的出峰时间为16.017 min，峰型良好。

2.2    方法验证

如表1、2所示，甲基异柳磷相对标准偏差均小于10%，精密度良好;平均回收率为88.6%～112.8%，相对标准偏差为1.73%～5.91%。这说明本方法对水果中甲基异柳磷的提取是稳定的，受到基质的干扰比较小。

3    结论与讨论

试验结果表明，通过应用《水果和蔬菜中500种农药及相关化学品残留量的测定气相色谱-质谱法》（GB 23200.8—2016）对甲基异柳磷进行前处理后，不同水平的添加回收率和精密度都较好，可对水果中甲基异柳磷定性定量测定。因此，甲基异柳磷农药适用于《水果和蔬菜中500种农药及相关化学品残留量的测定气相色谱-质谱法》（GB 23200.8—2016）进行检测。

4    参考文献

[1] 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局.水果和蔬菜中500种农药及相关化学品残留量的测定气相色谱-质谱法：GB 23200.8-2016[S].北京：中国标准出版社，2016.

[2] 丁建，周洪波，崔永亮，等.毒死蜱在猕猴桃上的残留动态研究[J].西南农业学报，2011，24（1）：373-375.

[3] 黄武平，宋洋.GC-MS法测定食用农产品中农药残留及相关化学品残留[J].现代食品，2018（2）：44-48.

[4] 王金略.气质联用仪测定蔬菜中的甲基异柳磷农药残留[J].中国农业信息，2016（19）：125.

[5] 班秋丽，江露，汪善良.气相色谱法测定蔬菜中甲基异柳磷农药残留量不确定度分析[J].现代农业科技，2017（20）：114-116.

[6] 朱卫芳，汪滨，张建辉. 蔬果中甲基异柳磷残留量检测方法研究[J].上海农业科技，2016（6）：1001-1006.

[7] 曹天亞，金鑫，冯正伟.“NY/T 761-2008”标准对参数甲基异柳磷检测适用性的探索[J].南方农业，2015，9（36）：142-143.

[8] 余霞奎，王晓娟.气相色谱法测定蔬菜水果中甲基异柳磷残留[J].安徽农学通报，2013，19（22）：96-97.

作者简介   陈立娇（1990-），女，海南乐东人，轻工助理工程师。研究方向：食品中农药残留检测。

收稿日期   2019-01-21