张科科，耿玉东

口腔鳞状细胞癌 （Oral squamous cell carcinoma，OSCC）是口腔颌面部恶性肿瘤的常见类型，易发生局部浸润性和颈部淋巴结转移，且患者预后较差， 术后 5年生存率约为 50%［1，2］。因此寻找OSCC的治疗靶点，并探讨OSCC发生发展及迁移侵袭的分子机制对于提高OSCC患者术后生存率具有重要意义。长链非编码RNA（long non-coding RNA，lncRNA）是长度大于200bp且无编码功能的RNA分子，具有复杂多样的生物学功能，与多种疾病的发生发展及预后密切相关。牛磺酸上调基因1（taurine upregulated geue 1，TUG1） 是一种重要的lncRNA，在胃癌［3］、食管癌［4］及骨肉瘤［5］等多种恶性肿瘤中异常表达，并与肿瘤细胞的增殖、转移侵袭等密切相关［6，7］。 目前关于 TUG1 在 OSCC 发生发展中的作用的研究较少，该研究检测TUG1在OSCC细胞中的表达，并沉默TUG1的表达分析其对OSCC细胞增殖、迁移侵袭的影响，初步探讨其在OSCC中的生物学功能。

1 材料与方法

1.1 材料及主要试剂人的正常口腔角质细胞株（hOK）和人口腔鳞状细胞癌SCC-25细胞株均购自北京北纳创联生物技术研究院。RPMI-1640培养基、胎牛血清及胰蛋白酶购自美国Gibco公司，脂质体lipofectamine 2000和Trizol试剂盒购自美国Invitrogen公司，反转录试剂盒和荧光定量试剂盒购自日本TaKaRa公司，CCK-8试剂盒购自美国Sigma公司，siRNA及相关引物由北京擎科生物科技有限公司合成，MMP-2、MMP-9及VEGF-C一抗均购自英国Abcam公司。

1.2 细胞培养将hOK和SCC-25细胞株接种于含有10%胎牛血清、100 U/ml青霉素和100 mg/ml链霉素的PRMI-1640培养基中，置于37℃、5%CO2的培养箱中培养，选取对数期生长良好的细胞用于实验。

1.3 RT-PCR使用Trizol试剂盒提取细胞总RNA，并使用紫外分光光度计进行RNA定量及纯度分析。使用反转录试剂盒将2 μg总RNA逆转录生成 cDNA。……