陈瑾歆，莫 琳，王含彦

胰腺癌起病隐匿，发展迅速，手术切除率低，术后复发率高，预后极差，是严重危害人类健康的恶性疾病之一［1］。 神经周浸润（perineural invasion，PNI）是胰腺癌的一项病理学特征［2］，广义的PNI是指肿瘤细胞包绕神经表面或浸润神经外膜或进入神经束膜以内［3］，被认为是胰腺癌转移、局部复发的一种方式［2］。有研究报道胰腺癌PNI发生率与患者的手术切除率、术后复发率和平均生存期直接相关［4］。因此研究有神经周浸润的胰腺癌特异表达的基因对胰腺癌的早期诊断、手术选择和术后干预有重要意义。

该研究通过观察基质金属蛋白酶 （matrix metalloproteinases，MMPs）和组织金属蛋白酶抑制剂（tissue inhibitors of metalloproteinases，TIMPs）在有神经周浸润的胰腺癌组织和癌旁组织中的表达，探讨基质金属蛋白酶和金属蛋白酶的组织抑制剂在胰腺癌发生、发展和早期转移中的分子机制。

1 材料与方法

1.1 材料胰腺癌癌旁组织和肿瘤组织从川北医学 院 附 属 医 院 获 得 ；TRIZOL （Invitrigon）；Prime ScriptTMRT reagent Kit with gDNA Eraser（Takara）；SYBR Green PCR Kit（QIAGEN）；全蛋白提取试剂盒（南京凯基生物有限公司）；BCA Protein Assay Kit（Thermo，23227）；PAGE 凝胶制备试剂盒（Promoton，PG112）；一抗：抗 MMP-2、MMP-9、TIMP-2、GAPDH抗体（CST，USA）；荧光标记羊抗兔二抗（KPL，USA）。

1.2方 法

1.2.1 分组 实验分为癌旁对照组、有神经周浸润的胰腺癌组。

1.2.2 组织形态学观察 取22例胰腺癌患者癌旁组织和肿瘤组织HE染色鉴定有无神经周浸润，将检测有神经周浸润的胰腺癌组织和癌旁对照组织用预冷的PBS洗3遍，液氮保存备用。

1.2.3 RT-qPCR 将有神经周浸润的胰腺癌组织和癌旁组织碾细，加入TRIZOL裂解液，按说明书方法提取总RNA，NanoDrop 2000微量分光光度计检测RNA含量与纯度，采用1%甲醛变性琼脂糖凝胶电泳对RNA完整性进行鉴定。……