宋岱松 陈焕昌 刘媛媛 李月田 张 强 金梅林*

1.环山集团养猪事业部健康管理部，山东青岛 266706；2.华中农业大学农业微生物学国家重点实验室，武汉 430070

沙门氏菌是一种重要的人畜共患病原菌，可导致多种动物发病，也可通过污染的食物感染人类，对人类的健康造成极大威胁。沙门氏菌血清型众多，导致猪发病的沙门氏菌主要为猪霍乱沙门氏菌和鼠伤寒沙门氏菌，前者的主要临床表现为败血症，后者主要表现为坏死性肠炎[1]。

1 发病情况

2018年2月5日，山东烟台某育肥猪场（存栏1 063头，92日龄）农场主反馈猪突然发生腹泻，笔者于2月7日对该农场进行了调查。临床症状:腹泻传播迅速，腹泻比例已经达到70%；采食量下降60%左右；猪只扎堆，被毛脏乱，体温39.5℃以上的猪只约占40%（图1）；粪便呈水样，颜色较复杂，为灰黑色、黄色、绿色等，个别猪只粪便中带有红色血液及肠道脱落物（图2）。濒临死亡的猪只体温较低，为36.0～37.5℃；2月6日死亡2头，2月7日死亡8头。

图1 被毛粗乱、扎堆

图2 粪便黄色或带有血液

2 剖检症状

脾脏略微肿大（图3）；肺水肿（图4）；全身淋巴结肿大、出血（图5）；小肠各部可见明显充血、肠壁增厚（图6）；结肠内容物呈水样，有纤维素性渗出物（图6），部分猪只结肠内容物呈现血色（图7），盲肠、结肠有伪膜覆盖（图8）。

图3 脾脏略微肿大

图5 淋巴结肿大、出血

图7 肠道内血色内容物

2月5日至2月20日，笔者共计剖检34头猪，其中急性死亡猪21头，慢性病例13头（自然死亡与安乐死），随后对剖检病变进行了统计与分析（表1）。

3 实验室诊断

疾病发生初期，送检肛拭子进行病原学检测，结果显示:猪流行性腹泻病毒（PEDV）和猪传染性胃肠炎病毒（TGE）均为阴性。

图4 肺水肿

图6 肠壁增厚、结肠内水样内容物

图8 结肠内伪膜覆盖

表1 剖检病变统计

2月7日，采集新鲜的结肠内容物及腹泻猪只肛拭子送至实验室进行细菌分离鉴定，2月9日出具的结果显示:SS琼脂培养基可见黑色菌落，符合沙门氏菌生长特性（图9）。随后，选取2个菌株进行药敏试验，结果显示:该菌株对恩诺沙星最为敏感（表2、图10）。

表2 菌株药敏试验结果

图9 细菌鉴定培养

图10 药敏试验

以P1:GTGAAATTATGGCCACGTTCGGGCAA、P2:TCATCGCACCGTCAAAGGAACC为引物，以细菌培养液为模板，进行PCR扩增。PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳，约在284 bp有一可见条带，可确定该菌株为沙门氏菌（图11）。

图11 PCR产物琼脂糖电泳图

4 病史回顾及综合诊断

经农场主反馈，2月2日起，猪群中零星出现腹泻猪只，2～3 d内腹泻比例已经达到了40%以上，采食量降低50%。2月5日，笔者通过农场主的信息反馈，将其诊断为某种病毒感染导致的腹泻，同时要求农场主采集腹泻猪只肛拭子，送相关实验室检测PEDV和TGEV。

2月7日，笔者对该农场进行了调查。极为重要的信息是:2月6日夜间至2月7日凌晨，有8头猪只因腹泻死亡。笔者立即否定了之前的诊断，排除了病毒感染的可能性。与此同时，实验室反馈，PEDV和TGEV阴性，诊断方向指向了细菌感染。通过临床症状和剖检诊断的信息汇总，笔者判定该案例为疑似沙门氏菌感染导致的出血性腹泻，但胞内劳森氏菌和猪痢疾密螺旋体感染的可能性没有排除。对死亡猪只结肠内容物进行细菌分离鉴定，2月9日实验室出具的结果显示沙门氏菌阳性；同时药敏试验表明，该菌株对恩诺沙星最为敏感。

5 控制方案

1）药物干预。2月7日起，10%硫酸粘杆菌素500 g/t，饮水给药，连续使用 5 d；80%泰妙菌素120 g/t，饮水给药，连续使用7 d。2月9日，10%恩诺沙星注射液 0.025 mL/kg（约 1.0～1.5 mL/头），全群注射1次。2月12日起，给予体况较差的猪只饮用电解多维、补液盐等。

2）饲养管理。要求农场主及时清理猪舍内的排泄物，保证猪舍内环境干燥；略微提高猪舍内温度，并保证温度尽可能恒定。

3）2月11日起，猪群急性死亡数量明显降低，采食量明显升高（图12），之后死亡的猪只多数为慢性病例（图13）。

图12 猪群日采食量变化曲线

图13 猪群日死亡数量曲线

6 讨论

6.1 预防措施

沙门氏菌感染在猪群中相当普遍，但未必造成严重的临床症状，毒力较强的菌株大剂量感染是导致急性沙门氏菌肠炎的主要原因。猪群饲养密度过大、猪舍卫生差、猪舍内湿度过大均可导致环境中沙门氏菌载量增加，日粮更换、猪只混群会导致猪群抵抗力下降，增加发病的风险。此案例中，猪舍漏粪地板面积较小，大部分为水泥地面，猪只排泄物清理不及时，这2个方面的因素是导致发病的最主要原因。干燥的环境、良好的卫生条件是预防该病的有效手段。

6.2 综合诊断

本案例诊断初期，鉴于腹泻症状发展十分迅速，笔者将该案例判定为病毒感染导致。随后2～3 d猪群出现大量急性死亡猪只，这与病毒性腹泻的临床表现相悖，与此同时，病原学诊断显示，PEDV和TGEV都为阴性，因此，诊断指向细菌性腹泻。本案例诊断后期，发现血性下痢、结肠坏死灶等症状，同时细菌分离鉴定显示沙门氏菌呈阳性，给予了确诊。以往经验，猪流行性腹泻（PED）和猪传染性胃肠炎（TGE）在抗体阴性的猪群中发病极为迅速，发病率可高达80%以上，而细菌性腹泻往往起病略缓，发病率略低。本案例的发生启示，某些情况下，沙门氏菌导致的腹泻发病速度亦较快，发病率与病毒性腹泻相差不大。PED和TGE仅可以造成哺乳仔猪的大量死亡，保育猪群发生时死亡率极低，在育肥猪群中，死亡率几乎为零[2]。本案例诊断后期通过死亡率的分析和病原学诊断，否定了病毒性腹泻的诊断。

本案例的后期诊断依然存在疑点，通常情况下育肥猪出血性下痢由沙门氏菌、胞内劳森氏菌、猪痢疾密螺旋体感染导致。本案例中通过临床症状、剖检诊断以及细菌分离鉴定，综合诊断为沙门氏菌感染。由于实验室条件的限制，并没有从病原学层面排除胞内劳森氏菌和猪痢疾密螺旋体感染的可能性。胞内劳森氏菌感染可引起猪的急性回肠炎，导致猪小肠急性出血（偶见结肠出血），粪便呈亮黑色，最急性案例可呈现鲜血便；剖检可见小肠充满出血，结肠内容物呈亮黑色，最急性案例可见小肠内充满大量血液，结肠内容物正常[3]；猪痢疾密螺旋体感染可导致结肠出血，粪便往往呈鲜红色，剖检可见盲肠、结肠内大量充满血液，回肠以上部位正常[4]。

本案例中，可见的剖检病变包括:脾脏肿大、淋巴结肿大、肠道充血、肠壁增厚、肠道出血与溃疡。脾脏肿大在急性病例和慢性病例中都较为常见，淋巴结肿大、出血也较为常见，但主要表现在肠系膜淋巴结；肠道充血、肠壁增厚在急性病例中较为常见；回肠、盲肠、结肠出血在急性病例中零星可见，在慢性病例中罕见；盲肠、结肠溃疡在急性病例中发生机率很小，但是慢性病例中极为常见，且病变非常典型。

6.3 控制方案

在本案例中，发病十分迅速，快速干预十分重要。以往经验，粘杆菌素、恩诺沙星、氟苯尼考、新霉素、头孢噻呋、链霉素等对沙门氏菌均有效，快速筛选最为敏感药物相当重要。注射给药相对于口服给药，药效迅速，急性案例可保证快速干预。因此，在急性沙门氏菌案例中，需要格外注意干预速度、药物选择、给药方式。

6.4 疫情损失与疫情处理机制

本案例共计有54头育肥猪死亡（35～45 kg），直接经济损失为4.0～4.5万元；由于疫病的发生，该育肥猪群上市时间至少延迟10 d，多余的饲料成本为6.5～7.0万元。因此，此次疫情损失约为11万元。

该案例中，农场主与兽医的沟通方面尚存在可提高改善的空间，农场主对信息反馈的准确性有待提高，兽医对于疫病诊断的及时性还有提升的空间，这可为疾病的控制争取时间。因此，良好的疫情预警、汇报、诊疗机制是猪场降低疾病损失的重要措施。