仇薪鑫，李 龙，田格如

(杨凌职业技术学院，陕西 杨凌 712100)

禽流感(Avian Influenza, AI)是一种高度接触性禽类传染病，近几年，高致病性禽流感病毒感染人的情况愈发严重，对人类健康和公共卫生安全构成了严重威胁。据不完全统计，仅在2017年，中国人感染H7N9禽流感发病人数达589人，死亡人数约250人。我国养殖业目前预防禽流感的主要措施依然是强制进行疫苗免疫，农业农村部要求规模化养殖企业，应常年保持90%以上的群体免疫密度，并且抗体合格率达70%以上。

抗体水平的检测能够有效反映畜禽群体的总体抗体水平，有助于我们评价其免疫效果，为合理指导畜禽群体的免疫过程提供基础。疫病抗体水平的定期、连续监测可以帮助我们有效地掌握其变化规律，为不断改进和优化免疫程序提供支撑，为评估该病的发生风险、摸清该病的流行现状和评价其疫苗免疫质量提供依据，更重要的是可以帮助养殖企业合理控制免疫成本，保证生产过程，提高效益。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试验对象 陕西省某规模化种鸡场A5、B5两栋舍的鸡群，品种是德国萨索肉鸡。

1.1.2 试剂材料 禽流感病毒H9亚型和H5亚型血凝抑制试验标准抗原(青岛易邦生物技术有限公司)，H9抗原生产批号：201502，H5抗原生产批号：201507；阳性血清(中国哈尔滨维科生物技术开发公司)。

PBS缓冲液(pH7.2，0.01 mol·L-1)，3.8%柠檬酸钠抗凝剂，均为自制。

1.2 方法

1.2.1 抽样 A5舍2 000只鸡、B5舍1 980只鸡，在保证正常生产的情况下，计划从6周龄开始，每两周分别从两栋鸡舍随机采集血清样品50份。

1.2.2 微量法血凝试验(HA)与血凝抑制试验(HI) 依据《GB/T 16550-2008 新城疫诊断技术》中所规定的血清学试验诊断方法。

1.2.3 免疫程序 免疫程序见表3。

2 结果

开产日龄150 d左右，将开产前的免疫阶段定为基础免疫阶段。

2.1 基础免疫阶段抗体水平检测结果

表2、3结果显示，经过基础免疫，在开产时两组鸡群AI H5平均抗体水平能够达到11 log2，AI H9能够达到12 log2～13 log2。在以HI效价≥4 log2为合格标准的情况下，鸡群AIH5、AI H9抗体水平整体合格率为100%。基础免疫过程中，两组鸡群AIH5、AI H9平均抗体水平都呈不断上升趋势，变化基本同步。说明在此免疫程序下，鸡群在开产时能够达到较高AIH5、AI H9抗体水平，免疫效果较好。

2.2 生产阶段抗体水平检测结果

注：140日龄后每两个月注射一次AI H9灭活疫苗，0.5 mL·只-1；每三个月注射一次AI H5灭活疫苗，0.5 mL·只-1。

表2 基础免疫阶段AIH5抗体水平检测结果

表3 基础免疫阶段AIH9抗体水平检测结果

表4 生产阶段AIH5抗体水平检测结果

表5 生产阶段AIH9抗体水平检测结果

表4、表5结果显示，整个生产阶段两组鸡群AI H5平均抗体水平基本保持在11 log2～12 log2，总体HI效价在8 log2～15 log2之间；AI H9平均抗体水平维持在12 log2～14 log2，整体抗体水平主要在10 log2～16 log2之间，免疫效果较好。在产蛋高峰期时，AI H5的抗体水平能够达到12 log2，生产后期平均抗体水平呈下降趋势，AI H9平均抗体水平主要维持在13 log2～14 log2，说明在建立起高抗体水平鸡群后，经过每三个月免疫一次AI H5灭活疫苗，两个月免疫一次AI H9灭活苗的强化免疫，能够使鸡群在全部生产阶段维持较高的抗体水平，有效抵御AI H5、AI H9病毒的侵袭，保证了生产效益。

3 讨论

一般在疫病防控工作中，基于我国针对重大动物疫病所提倡的“应免尽免，不留空当”的理论依据，对于规模化养殖的鸡群，主要通过科学地提高免疫频次和免疫比例，从而使鸡群获得较好的免疫水平。由于行业内对于此类重大动物疫病无广泛认可的保护性抗体水平标准，当前阶段，我们主要以鸡群群体免疫合格率和抗体水平的均匀度为评价指标。当鸡群群体免疫合格率高，抗体水平监测结果均匀时，表明鸡群群体免疫力较高，鸡群抵御疫病的能力强，免疫效果较好，特异性疫病爆发和流行的几率较小；若相反，则鸡群群体免疫力低下，鸡群抵御疫病的能力较弱，免疫效果较差，相关特异性疫病发生和流行的几率较大。同样情况下，如果特异性抗体水平维持时间越长，说明其免疫质量越好，反之则越差[8]。

由于生产过程中鸡群不断淘汰，生产后期样本数量有所下降，但基本不影响其免疫效果的评估。在不断跟踪检测其禽流感病毒抗体水平动态变化的过程中，发现通过基础免疫阶段，在鸡群开产时，AI H5的平均抗体水平基本达到11 log2，AI H9的平均抗体水平基本达到13 log2。主要生产阶段，通过不断强化免疫，能够使鸡群一直保持高AIV抗体水平，AI H5平均抗体水平维持在11 log2～12 log2，AI H9平均抗体水平维持在12 log2～14 log2。说明此免疫程序下，能够有效建立产生抗禽流感病毒的高抗体水平种鸡群，生产阶段呈均匀、整齐的群体免疫水平，免疫质量较好，能够有效抵御这两种病毒的侵袭，很好地保证生产过程。