马 赫 孟祥南** 庞舒予 李维虎 张 鹏 范海延，2***

（1.沈阳农业大学生物科学技术学院，辽宁 沈阳 110866；2.沈阳农业大学设施园艺省部共建教育部重点实验室，辽宁 沈阳 110866）

番茄灰霉病是由灰葡萄孢菌（Botrytis cinerea）侵染引起的一种真菌性病害，可使番茄减产20%～40%，严重时可达70%[1]。目前番茄灰霉病的防治方法以喷施化学农药为主，但存在污染环境、病原菌易产生抗药性等缺点[2]。探寻新型、环保、高效的植物病害防治技术成为当今农业生产亟待解决的问题。植物免疫诱抗剂是近年来被研发出用于防治植物病害的一类特殊化合物，具有高效、无污染等特点[3]。在番茄灰霉病防治中能发挥有效作用的诱抗剂多为寡糖类、蛋白类以及微生物类[4]。

净都煞是利用海藻中的天然氨基酸、生物碘与壳聚糖复配而成的新型植物诱抗剂，具有抗病原菌、促生长以及无公害等特点。净都煞能提高植物的免疫力，防治枯萎病、霜霉病、炭疽病和褐斑病等效果显著，但其防治番茄灰霉病的效果未见报道。为验证净都煞诱导番茄植株抗灰霉病的效果，我们开展了相关试验，以期为番茄灰霉病的绿色防控提供一项新的技术，现将试验结果总结如下。

1 材料与方法

1.1 试验材料

供试植物诱抗剂净都煞由青岛海大生物集团有限公司研发，供试番茄品种为辽园多丽，番茄灰霉病菌（Botrytis cinerea）由沈阳农业大学植物保护学院学院赵秀香提供。

1.2 试验方法

先进行番茄灰葡萄孢菌孢子悬浮液的制备。将培养基上的真菌孢子“扫入”无菌水中，溶液用纱布过滤后稀释至1×104个/mL用于接种。

1.2.1 不同浓度净都煞诱导番茄植株抗灰霉病的效果研究

将净都煞配制成浓度为0.5 mL/L、1.0 mL/L和1.5 mL/L的水溶液，在番茄幼苗期（2片真叶）喷植株叶片，喷施量以叶面湿润但溶液不下滴为准，每隔7 d喷1次，共喷3次。最后一次诱导完成后24 h接种灰霉病菌孢子悬浮液，接种量以叶片表面悬浮液不下滴为准。清水（ck）处理喷施蒸馏水后接种灰霉病菌，待对照发病均匀时统计病情指数。所有处理3次重复，每次重复均为60株。

1.2.2 净都煞不同诱导次数对番茄灰霉病抗性的影响

采用上述试验已确定的净都煞最佳诱导浓度（加0.01%Tween80表面活性剂），在番茄2片真叶期喷植株叶片，诱导间隔期为7 d，分别喷雾诱导3次、2次及1次，诱导和接种方法同上。

1.2.3 净都煞不同诱导间隔期对番茄灰霉病抗性的影响

采用上述试验已确定的净都煞最佳施用浓度（加0.01%Tween80表面活性剂）以及最适诱导次数，喷番茄叶片，设置诱导间隔期分别为2 d、5 d和7 d，诱导和接种方法同上。

1.2.4 净都煞诱导持续期对番茄灰霉病抗性的影响

采用上述试验已确定的净都煞的最佳施用浓度（加0.01%Tween80表面活性剂）、最适诱导次数以及最佳诱导间隔期，分别于最后一次诱导后的1 d、3 d和5 d接种番茄灰霉病菌，诱导和接种方法同上。

病情指数和相对防治效果按照李少波[5]的方法计算。应用SPSS 17.0软件中ANOVA方法对试验数据进行差异显著性分析。

2 结果与分析

2.1 不同浓度净都煞对番茄抗灰霉病效果的影响

不同浓度净都煞对番茄抗灰霉病效果的影响见表1。

表1 各处理番茄抗灰霉病的效果

由表1可知，随着净都煞溶液浓度的增大，番茄灰霉病的防治效果呈先上升后下降的趋势，浓度为1.0 mL/L时防治效果最好（55.51%）。

2.2 净都煞不同诱导次数对番茄植株抗灰霉病效果的影响

用1.0 mL/L净都煞溶液喷施番茄叶片，每隔7 d喷1次。净都煞不同诱导次数对番茄植株抗灰霉病效果的影响见表2。

表2 各处理番茄抗灰霉病的效果

由表2可知，用净都煞溶液喷施诱导2次，番茄抗灰霉病的效果最好，达56.14%，诱导1次和3次的灰霉病防效稍差。

2.3 不同净都煞诱导间隔期对番茄抗灰霉病效果的影响

不同净都煞诱导间隔期对番茄抗灰霉病效果的影响见表3。

表3 各处理番茄抗灰霉病的效果

由表3可知，在番茄苗期喷施2次1.0 mL/L净都煞，随着诱导间隔期的延长，番茄抗灰霉病的效果呈先上升后下降的趋势。间隔期为5 d时，番茄抗灰霉病的效果最佳（61.82%）。

2.4 不同净都煞诱导持续期对番茄抗灰霉病效果的影响

用1.0 mL/L净都煞溶液喷番茄叶片，每隔5 d喷施诱导1次，共诱导2次，分别于最后一次诱导后1 d、3 d和5 d接种灰葡萄孢菌。不同净都煞诱导持续期对番茄抗灰霉病效果的影响见表4。

表4 各处理番茄抗灰霉病的效果

由表4可知，随着诱导持续期的延长，净都煞对灰霉病的诱抗效果有减弱趋势。

3 小结

净都煞是由天然氨基酸、生物碘与壳聚糖复配而成的植物诱抗剂，其中壳聚糖在番茄灰霉病防治中起主要作用。前人研究发现，50～250 mg/L壳聚糖对番茄灰霉病的防效为10.39%～33.23%[6]，而本试验结果表明，1.0 mL/L净都煞溶液对番茄灰霉病的相对防效高达61.82%。可见，与单一成分的壳聚糖相比，天然氨基酸、生物碘与壳聚糖的复配溶液显著提高了番茄植株的抗病性。

施用不同浓度的净都煞对番茄灰霉病产生了不同的诱抗效果，浓度为1.0 mL/L的净都煞对灰霉病的防效最佳。同样，不同施用间隔期、不同施用次数以及不同施用持续期对灰霉病的防效也会产生不同的效果。建议在番茄灰霉病发病前开始诱导，施用间隔期3 d、连续施用2次，能有效防治番茄灰霉病害。

植物免疫诱抗剂具有无污染、无公害、药效稳定以及预防性强等优点，是当前生物防治植物病害的发展方向[3，7]。如何将植物免疫诱抗剂应用于生产实践，解析其诱抗机理，需今后深入研究。