李斌 刘玉玥 田威龙

摘要：为掌握乌鲁木齐市流浪犬及宠物犬狂犬病感染及疫苗免疫情况，新疆农业大学动物医学学院采用IgG抗体ELISA检测试剂盒，检测某校园流浪犬、动物中心医院就诊宠物犬以及某流浪犬基地犬只共41份血清样品。结果表明，校园内流浪犬抗体阳性率为20%，动物中心医院就诊宠物犬抗体阳性率为78.6%，流浪犬基地抗体阳性率为37.5%。

关键词：流浪犬；狂犬病；抗体；ELISA

中图分类号：S858.292 文献标识码：A 文章编号：1007-273X（2019）02-0008-02

狂犬病（Rabies）亦称恐水症，是由狂犬病病毒（Rabies virus，RV）引起的人兽共患病，在全世界广泛流行，以印度及我国最为严重[1]，发病后死亡率100%。2012年国务院发布的《国家中长期动物疫病防治规划（2012—2020年）》将其列为国家优先防控病种[2]。犬、猫咬伤是狂犬病最主要的传播途径。

新疆地区由狼、狐狸咬伤骆驼、羊引致狂犬病已有相关报道[3]，马晓艳等[4]报道，新疆部分地区2010—2014年间犬狂犬病抗体合格率为55.53%。近年来新疆社会持续稳定，人们生活水平不断提高，宠物饲养量大幅增加。据统计，乌鲁木齐宠物犬饲养量超过4万只，市内流浪犬超过3 000只。乌鲁木齐市流浪犬及宠物犬狂犬病抗体合格情况至今没有报道，因此，在乌鲁木齐市内展开狂犬病抗体血清学调查，摸清乌鲁木齐犬狂犬病的免疫情况，对狂犬病的综合防制和预防人感染狂犬病具有十分重要的意义。

1 材料与方法

1.1 主要仪器及试剂

狂犬病病毒抗体（ELISA）定性检测试剂盒购自北京世纪元亨动物防疫技术有限公司；通用酶标仪（型号为BioTek- ELx800）、移液器等，由新疆农业大学动物医学学院提供。

1.2 血清来源

2017年12月至2018年10月，共采集某校园内流浪犬血清5份，新疆农业大学动物中心医院血清28份，乌鲁木齐某流浪犬基地血清8份，共计41份。

1.3 方法

1.3.1 血清采集 保定流浪犬，后肢隐静脉采血4 mL，置于4 ℃冰箱过夜，析出血清，2 000 r/min离心10 min，分离血清并分装，-20 ℃保存备用，应避免血清反复冻融。

1.3.2 ELISA操作 ELISA操作步骤按照试剂盒说明书进行。

1.3.3 結果判定 在试验成立（阴性对照值应小于或等于0.15，临界对照平均值应在0.20～0.80）条件下：若样品OD值≥临界对照平均值，该样品为狂犬病抗体阳性；若样品OD值<临界对照平均值，该样品为狂犬病抗体阴性。

2 结果与分析

采自某校园内流浪犬5份血清样品中，阳性样品1份，阳性率为20%；采自新疆农业大学动物中心医院28份血清样品中，阳性样品22份，阳性率为78.6%；采自乌鲁木齐某流浪犬基地8份血清样品中，阳性样品3份，阳性率为37.5%（表1）。由表1可知，校园流浪犬抗体阳性率显著低于宠物犬及流浪犬基地饲养犬只，除与流浪犬生活环境较差有关外，分析其主要原因是校园流浪犬遭犬主遗弃后长期未接种疫苗，流浪犬自由繁殖产生的“流二代”未接种疫苗。

国产百司特疫苗一次注射后15 d，抗体阳性率为25%，低于进口英特威疫苗的50%，抗体产生时间晚于后者。但注射60 d后检测可知，抗体阳性率可以达到我国农业部规定的（大于70%）的群体保护率。国产疫苗和进口疫苗注射2针后，抗体阳性率均可达100%，两种疫苗在抗体保护率上差异不显著。

对比宠物犬与流浪犬基地，使用国产疫苗免疫后，15 d以及120 d抗体阳性率后者远远低于前者，分析其原因可能与流浪犬基地饲养管理条件落后、犬只营养差等原因有关。此外，夏天流浪犬基地接种疫苗时，疫苗保存欠规范，也是造成免疫效果差的原因之一。国产疫苗成本为13元/头份，进口疫苗成本为20元/头份，2种疫苗在免疫效果相当的基础上，推荐使用国产疫苗，可以降低狂犬病的防制成本。

通过对上述41条犬只样品抗体检测可知，流浪犬抗体阳性率明显低于宠物犬，国产疫苗虽在抗体产生时间是稍晚于进口疫苗，但是注射60 d后，二者均可达到较为可靠的保护率，综合经济条件，社会面防控推荐使用国产疫苗。不考虑经济成本的犬主，可选用进口疫苗，以期尽快达到较高水平的免疫效果。

流浪犬基地、流浪犬救助站以及社会面防控工作中，务必要注意疫苗的正确保存、运输以及使用，避免因人为及环境因素导致免疫失败。

3 防控建议

3.1 密切关注野生动物狂犬病流行情况

新疆是我国畜牧业大省，野生动物资源丰富，由狼、狐狸等传播狂犬病至家畜的情况时有发生，尤其是北疆地区的兽医部门应该联合林业部门，协调做好野生动物疫病监测工作，野外死亡的野生动物应在实验室检测后无害化处理[5]。

3.2 认真落实《乌鲁木齐养犬管理规定》相关要求

严格执法，宠物犬饲养必须办理“养犬证”，认真落实宠物犬免疫证登记制度以及“养犬证”年审制度；加大对非法饲养犬只以及问题疫苗的打击力度；号召市民科学养犬、文明养犬、依法养犬；限制非工作犬活动区域，防止犬只咬伤人事件的发生。建议防疫、兽医、公安等多部门，齐抓共管，形成合力，有效防制狂犬病的流行[6]。

3.3 妥善处置流浪犬

近年来乌鲁木齐流浪犬数量大大增加，流浪犬伤人事件时有发生，给市民的生命财产带来了严重的危害。商场、公园、校园等人员密集场所，全面清理流浪犬势在必行。政府应该建立流浪犬收容所集中饲养流浪犬，及时捕杀病犬，防止狂犬病的传播[7，8]。同时应该加大对口服狂犬病疫苗研发的投入，以期通过诱饵免疫流浪犬及野生动物[9]。

3.4 加大狂犬病防制知识宣传

通过编写狂犬病防制知识宣传手册等方式，增强农牧民、市民的防范意识。能够做到被狗咬伤后科学处理伤口，并紧急接种疫苗，最大限度地降低狂犬病的危害[10]。

参考文献：

[1] 陆承平.兽医微生物学[M].第五版.北京：中国农业出版社，2001.

[2] 杨 涛，陈 琼，赵 冉，等.厦门市宠物犬狂犬病的血清学调查[J].福建畜牧兽医，2014，36（6）：15-16.

[3] 薛振庆.新疆阿勒泰地区狂犬病流行情况调查[J].新疆畜牧业，1991（2）：42-43.

[4] 马晓艳，王文娟，续文渊，等.新疆部分地区散养犬狂犬病免疫抗体监测与效果评估[J].中国动物检疫，2015，32（8）：1-3.

[5] 李文婧，王 文，盛卓君，等.新疆富蕴县骆驼狂犬病疫情分析[A].中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十六次学术研讨会论文集[C].北京：中国畜牧兽医学会，2015.

[6] 范玉娟，陈发喜，李爱巧，等.浅议乌鲁木齐市犬狂犬病感染的风险因素与防控措施[J].新疆畜牧业，2014（9）：47-48.

[7] 杨文科.新疆克州狂犬病防治现状及对策分析[J].新疆畜牧业，2006（5）：12-13.

[8] 孙爱红，陈发喜，孙 燕.乌鲁木齐市犬狂犬病防治的几点体会[J].新疆畜牧业，2007（6）：51-52.

[9] 翟少华，程 瑶，文兆海，等.狂犬病减毒脂质体口服冻干活疫苗免疫效果检测[J].中国兽医学报，2018，38（6）：1136-1140，1150.

[10] 李 斌，李莹莹，王 瑞，等.呼和浩特市流浪犬狂犬病病毒血清学调查[J].黑龙江畜牧兽医，2016（22）：208-210.