苏密龙

I型NKT细胞（invariant nature killer T，iNKT）是一群由α-GalCer特异性激活的淋巴细胞，活化的iNKT细胞能够产生IL-4、IFN-γ等多种细胞因子，参与机体免疫调节，在抗HBV复制过程中起到重要的作用[1]。研究显示[2]，iNKT功能的下降是导致HBV病毒不能被完全清除的原因之一。慢性HBV感染者的外周iNKT细胞产生IFN-γ的能力降低，使HBV慢性感染。动物实验结果显示[3]，对HBV感染转基因鼠注射α-GalCer，可使iNKT细胞活化，有利于产生IFN-γ因子，从而抑制HBV复制。本次选取48例处于不同免疫时期的慢性HBV患者，了解其外周血iNKT细胞的数量情况，以及iNKT细胞分泌细胞因子的能力，为慢性HBV感染患者的治疗提供参考依据，具体报道如下。

1 资料和方法

1.1 一般资料

选取2015年1月—2018年9月我院收治的确诊为慢性HBV感染者48例，分别处于免疫耐受期（13例）和免疫清除期（35例）。免疫耐受期男性9例、女性4例，年龄16～63岁，平均年龄（37.2±11.5）岁；免疫清除期男性27例、女性8例，年龄18～60岁，平均年龄（37.4±10.8）岁。纳入标准：患者的诊断均符合2015中国慢性乙型肝炎防治指南版的标准[4]；排除标准：（1）因其他肝炎病毒感染的患者；（2）酒精性肝病患者；（3）纳入研究前半年经过抗病毒和免疫治疗的患者；（4）自身合并有其他免疫疾病。另选取同期在我院的正常体检人群39例，男性30例、女性9例，年龄28～36岁，平均年龄（30.2±6.2）岁，耐受期组患者、清除期组患者、正常体检组患者的性别、年龄一般资料进行对比，差异无统计学意义（P＞0.05）。

1.2 主要仪器和试剂

淋巴细胞分离液，CD3-PerCP-Cy5-5、IFN-γ-PE-Cy7、TNFα-APC、TCRVα24-FITC、TCRVβ11-PE（Beckman Coulter）、Navios流式细胞仪（Beckman Coulter）。

1.3 实验方法

（1）采集新鲜的促凝血3 mL，静止30 min后，使用3 000 rpm的速度，离心5 min后取上清液，以60 μL，置于-80℃环境中保存。（2）抽取……