冯金秋 陈惠琴 张宏莲 孙辑凯

齐齐哈尔医学院药学院 黑龙江 齐齐哈尔 161006

苍术是一种应用十分广泛的传统中药,2015年版《中国药典》规定其来源于茅苍术(Atractylodeslancea(Thunb.)DC)和北苍术(Atractylodeschinensis(DC.)Koidz.)[1],具有多项药理作用[2～6]。前者主要生产于江苏省、湖北省、河南省,其中,江苏茅山所产的苍术为道地药材,被称为茅苍术；北苍术主要产自内蒙古、山西省以及东北等地区。苍术的来源主要为野生采集,但由于近年来的挖掘现象毫无秩序,导致产量有所下降,资源十分匮乏,且不同产区的药材质量良莠不齐,以致消费者在使用过程中难以辨别,且苍术实际药效参差不齐。

本实验依据2015版《中国药典》一部正文苍术“含量测定”项下规定,以化学指标成分为评价标准,对不同来源的北苍术中苍术素进行含量测定,以初步掌握不同来源的北苍术品质的优劣,为合理开发中草药资源,合理控制中草药市场提供实验依据。

1 实验材料

1.1 苍术饮片**堂(批号：70100294,产自内蒙古)、广东**济(批号：70100294,产自内蒙古)、内蒙古莫力达瓦旗、内蒙古扎兰屯。分别标记为“1～4号”。

1.2 试剂苍术素标准品(中国食品药品检定研究所,批号：???)、甲醇(天津市凯通化学试剂有限公司)、90%乙醇(天津福晨化学试剂厂)、石油醚(60～90℃)(天津福晨化学试剂厂)、丙酮(天津福晨化学试剂厂)、纯化水(实验室自制)。以上试剂均为分析纯。

1.3 仪器高速多功能粉碎机(永康市敏业工贸有限公司)、CPX3800H－C超声波清洗机(BRANSONIC公司)、调节式手动式中药切片机(温岭市林大机械有限公司)、GR－240热空气消毒箱(上海博迅实业有限公司医疗设备厂)、LC－1000型液相色谱仪(山东鲁南瑞虹化工仪器有限公司)、PALL水纯化系统(Pall Corporation公司)、AE－240型电子天平(梅特勒－－托利多上海有限公司)。

2 方法与结果

2.1 色谱条件Diamonsil C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μl)；流动相甲醇：水＝(79：21)等度洗脱；流量1.0 ml/min；检测波长340nm；进样量20μl。

2.2 溶液制备

2.2.1 对照品溶液精密称取苍术素对照品适量,甲醇溶解,超声处理10 min,制得20μg/ml的溶液,经0.45μm的微孔滤膜滤过,取续滤液,备用。

2.2.2 供试品溶液分别取“1.1”中饮片,用粉碎机粉碎,分别过三号筛,精密称取0.2g,置具塞锥形瓶中,精密量取甲醇50ml加入锥形瓶,用封口膜密封后,称定重量,超声处理(功率250W,频率40KHz)1 h,取出锥形瓶冷却至室温后,称定重量,用甲醇补足缺失的重量,摇匀后,用0.45μm过滤膜过滤,取续滤液,备用。

2.3 方法学考察

2.3.1 线性关系考察精密称取苍术素对照品6mg,甲醇定容至10ml,标记为1号,按照稀释倍数为2计,制备浓度范围为300～18.75μg/ml的系列标准溶液。依照“2.1”项下色谱条件,以峰面积为纵坐标(Y),对照品质量浓度为横坐标(X),得到苍术素回归方程为Y＝2715.1X－9.6694(r＝0.9998),线性关系良好。

2.3.2 精密度试验精密吸取“2.2.1”项下对照品溶液20μl,依照“2.1”项下色谱条件,连续进样6次,测定峰面积,计算RSD值为0.49%,表明仪器精密度良好。

2.3.3 重复性试验按“2.2.2”项下方法平行制备6份供试品溶液,在“2.1”项下色谱条件下进样20μl测定,测得苍术素峰面积RSD为1.79%,表明该方法重复性良好。

2.3.4 稳定性试验精密吸取“2.3.3”项下供试品溶液20μl,在“2.1”项下色谱条件下,分别在0h、2h、4h、6h、8h、10h进样。测定苍术素峰面积RSD为1.7%,表明溶液在10h内稳定性良好。

2.3.5 加样回收率试验精密称取4号粉末0.1000g,共6份。每份样品中加入苍术素标准品0.5mg,置于50ml锥形瓶中,用甲醇定容。超声处理1h后过0.45μm微孔滤膜,取续滤液。按照“2.1”项下色谱条件采集图谱,计算回收率1.5%。

2.4 样品含有量测定分别1～4号苍术样品,分别制备三份平行样,依“2.2.2”项下制备供试品溶液,按照“2.1”项下色谱条件采集图谱,计算含量,结果见表1。

表1 不同来源苍术中苍术素含量测定结果(n＝3)

3 讨论

北苍术中所含有的化学物质种类杂多,其中苍术素是苍术药材中的活性成分之一,由于苍术素的化学结构较为稳定,2015版《中国药典》中含量测定项把苍术素的含量作为苍术药材的质量指标。

通过HPLC法测定苍术素含量可发现,购于**堂的北苍术中苍术素含量最高,为1.167%,购于内蒙古莫力达瓦旗的北苍术中苍术素含量次之,为0.837%,品质良好；购于内蒙古扎兰屯对的北苍术质量较好,其中苍术素含量为0.7611%；购于广东**济的北苍术在四个样品中苍术素含量最低,为0.7326%。本实验结果表明,不同来源的北苍术中苍术素的含量不尽相同,存在明显的地域差别。

长久以来,人们通过观察北苍术的外观、断面颜色、油室的数量、药材的气味等方式来判定北苍术的品质优劣,在本实验中,我们采用了HPLC法,相对客观地对北苍术中有效成分的含量进行检测,以直观的了解所测样品的品质优劣,在以后的研究中,我们将继续致力于苍术质量评价的工作,为建立更加完善的质量评价体系贡献一份力量。