许天龙，王 瑗，江 平，王晓彬，孙玉华，赵亚丽，李孝东，王雷雷*

（江苏省连云港市妇幼保健院，江苏 连云港 222000）

随着时代的发展，物质生活水平不断提高，人们越来越关注身体健康，宫颈癌在全球妇科恶性肿瘤中排在第二，发病率仅此于乳腺癌。目前研究已经证实宫颈癌的发生与高危型人乳头瘤病毒（HumanPapillomavirus ，HPV）的持续感染有密切关系，但是从癌前病变发展成宫颈癌是一个长期的慢性的过程[1]。有相关研究表明，宫颈癌的主要危险因素是HPV感染，并且，其中的大部分均是由高危型HPV感染引起。在宫颈癌患者中，伴有高危型HPV感染的患者可以达到90%以上[2]。而至今发现的HPV的种类在200种以上，与生殖道黏膜感染相关的HPV至少存在30种。人乳头瘤病毒是一种微小共价双链环状DNA病毒，其主要存在于人体的皮肤和黏膜以及女性宫颈上皮细胞异性区中[3]。HPV检测已经成为宫颈癌筛查的重要手段。本文通过统计学方法对一年中本院进行宫颈分泌物HPV检测的结果进行分析，旨在探究本地区女性HPV感染及其亚型分布情况，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

在连云港市妇幼保健院妇科中随机选择2018年1月～2018年12月间就诊的女性共3192例为研究对象。排除标准：3 d内存在性生活史或阴道操作者。按患者的年龄不同分为7组：其中≤20岁组26例，21～30岁组738例，31～40岁组1196例，41～50岁组748例，51～60岁组239例，＞60岁组68例，未知年龄组177例。

1.2 仪器与试剂

LUXSCAN生物芯片扫描仪（博奥木华生物科技公司）；HPV核酸分型检测试剂（博奥木华生物科技公司），可以定性检测女性宫颈脱落细胞样本中22种HPV亚型，包括16、18、26、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、82等18种高危亚型，和6、11、70、81等4种低危亚型。

1.3 方法

1.3.1 采集标本

患者宫颈口多余的分泌物会污染标本的纯净度，因此在采集前需要使用棉拭子将其擦拭干净，擦拭后在宫颈口鳞状上皮交界处将宫颈采样刷伸入。而在采集宫颈脱落细胞时，需要将宫颈采样刷顺时针或逆时针旋转3～5圈。在标有患者条形码的取样管中收集对应患者的标本，密闭后送至检验科。标本采集后需要在3天内完成检测，保存温度为-20℃。

1.3.2 标本检测

试剂准备和样本处理、PCR扩增、芯片检测以及结果分析等步骤的处理过程需要严格按照标本检测步骤的说明书进行。

1.4 统计学处理

采用SPSS 18.0的统计软件进行数据分析。计数资料以%表示，组间比较采用x2检验。P＜0.05表示差异比较存在统计学意义。

2 结 果

2.1 HPV感染情况

3192例标本中，808例为检出的HPV阳性标本，HPV感染率为25.31%。其中共有559例20岁以下年龄组女性，HPV感染率为69.23%，与其他组相比较，差异有统计学意义。未知年龄组的样本多由体检中心提供。

2.2 多重感染和HPV单一感染分布

在808例HPV感染的病例中，共有575例为HPV单一感染，占比为71.16%，排在前5位的单一感染亚型分别为HPV-16、HPV-52、HPV-58、HPV-51、HPV-53型，其比例分别为20.67%（167/808）、19.8%（160/808）、12.38%（100/808）、8.29%（67/808）、7.67%（62/808）。其中共有233例为HPV多重感染，占比为28.84%，167例为两种亚型HPV感染，多重感染中最多有5种亚型同时感染，共检出5例。

表1 不同年龄组女性HPV感染情况

3 讨 论

宫颈癌一种常见的恶性肿瘤，与乳腺癌的发病率相比，宫颈癌略低。同时，宫颈癌也是目前唯一发现了明确病因的恶性肿瘤，给女性的身心健康带来严重威胁[3]。全球每年的宫颈癌新发病例约有53万，由宫颈癌致死约27万[4]；我国2015年的宫颈新增癌病例约为9.9万，由宫颈癌致死约3.1万[5]。HPV检测在判断子宫颈癌发病的风险中有重要作用，HPV的感染率在不同地区之间存在一定差异性。其可能与检测方法和研究对象以及地区之间存在差异而造成[6]。本地区HPV的感染率为25.31%。HPV感染一般可以分为高危型和低危型，高危型是导致患者出现宫颈癌的重要原因。而低危型主要引起肛周尖锐湿疣或生殖道等疾病，其普遍均表现为一过性。高危型和低危型的HPV感染均给患者带来严重影响，因此需要通过研究HPV感染者的情况来分析出相应的预防措施，才能尽量避免患者受到HPV的侵扰。

许多医学研究表明，性生活初期是出现HPV感染的第1个高峰期，而围绝经期基本上是第2个高峰年龄段。出现这一结果的原因可能与免疫系统反应和女性的性行为活跃程度等因素存在联系。并且，随着女性自身的免疫功能逐渐衰退，也可能会导致自身所潜伏病毒的再活化。而有报道也表明，女性在绝经后激素水平的变化也有一定可能会增加HPV的易感性[7]。本地区数据显示20岁以下患者的HPV感染率最高，达到69.23%，远远高于其他年龄段。60岁以上患者的HPV感染率为19.11%，反而低于其他年龄段。相关研究表明，HPV亚型的在地区分布上存在一定的差异性。如，高危HPV亚型为HPV-52、16、58、39和51型等为东莞地区最常见的HPV亚型[8]，而HPV-58、16 和52型是丽水地区高危型HPV感染中最常见的基因型[9]，南京六合地区HPV 感染的高危亚型主要为HPV-52、16、53和58型[10]。连云港地区排在前5位的单一感染亚型分别为HPV-16、HPV-52、HPV-58、，HPV-51、HPV-53型，其比例分别为20.67%（167/808）、19.8%（160/808）、12.38% （100/808）、8.29%（67/808）、7.67%（62/808），这5种亚型合起来占总感染数的68.81%。

表2 HPV各种亚型的发生率

表3 HPV单一感染和多重感染构成分布

表4 HPV 5种亚型同时感染情况分析

连云港市妇幼保健院作为本地区首批HPV九价疫苗预约及接种单位，美国默克公司提供九价疫苗，用重组酿酒酵母CANADE 3C-5（菌株1895）分别表达重组人乳头瘤病毒6，11，16，18，31，33，45，52，58型L1蛋白的病毒样颗粒（VLP），经纯化，添加佐剂等制成9价疫苗，本地区在这9项亚型共649例阳性，排除复合阳性，大约能保护60%人群，没有完全涵盖本地区感染最多的亚型，这就需要研制人员制造出更加优化的疫苗，包括更多的亚型，保护更多的人群。

综上所述，本地区3192例受检妇女HPV分型检测结果显示：高危型及亚型的HPV感染率与国内其他地区存在一定的差异，并且感染者的年龄分布也存在地区差异。本次研究数据也为连云港及苏北地区开展宫颈癌筛查、诊治及研制适合该地区的预防性HPV疫苗提供了重要依据和参考资料。