陶艳华 金福源 陆晓健 徐国东

1.江苏省苏州市吴江区动物卫生监督所，江苏苏州 215200；2.苏州上方山森林动物世界，江苏苏州 215200

黄芪多糖在现代医学的应用中具有调节免疫 功能的作用，对提高机体的特异性和非特异性免疫应答能力具有积极的意义，其作用机理主要是通过提高机体内淋巴细胞的转化率以提高机体对抗病原的应答能力。目前，黄芪多糖已经作为一种免疫促进剂或免疫调节剂在人类的临床医学中得到了应用。随着近年来我国畜牧业的快速发展，专业人士对猪只免疫功能调节的研究也逐渐深入，黄芪多糖在养殖业中的应用也有了更多的研究，本文主要研究了黄芪多糖的使用对仔猪免疫力以及生长性能的影响。

1 材料与方法

1.1 试验动物与试剂

试验选用杜×长×大三元杂交仔猪，黄芪多糖注射液。

1.2 试验方法

选择体重相近的试验仔猪共40头，随机平均分组，共分为4组，每组10头，其中1组为对照组，2、3、4组均为试验组，并对仔猪进行空腹称重。此批仔猪全部在20日龄时断奶，同时在20日龄时接种猪瘟疫苗，接种剂量为每头仔猪4头份。在仔猪20、35日龄时进行给药。其中1组仔猪每头肌肉注射2 mL生理盐水，2组仔猪每头注射2 mL黄芪多糖，3组仔猪每头注射4 mL黄芪多糖，4组仔猪每头注射6 mL黄芪多糖。分别在仔猪20、35、50日龄时采集前腔颈动脉血，检测各项免疫指标。

1.3 检测指标

1）外周血嗜中性白细胞百分数。对于仔猪外周血嗜中性白细胞百分数的测定使用硝基蓝四氮唑还原试验，取仔猪的静脉血1 mL，并添加抗凝素，取0.1 mL于试管底部，加入等量的硝基蓝四氮唑应用液，混合均匀后置于37℃的恒温箱中25 min，在培育的过程中摇晃1次，随后再置于室温下15 min，取出上液滴于玻片，干燥后用甲醇固定，使用姬姆萨染色5 min，冲洗、干燥并用油镜观察样本。若有10%以上的中性多核白细胞能还原硝基蓝四氮唑，即检测结果为阳性，反之则为阴性。

2）猪瘟抗体检测。将抗凝血离心后取血清，经过56℃水浴灭活30 min，使用间接血凝试验进行猪瘟抗体检测。

3）淋巴细胞转化率。淋巴细胞转化率采用淋巴细胞转化试验进行检测，具体使用方法为形态学检查法。

4）平均日增重。试验开始时测试每头仔猪的空腹体重，计算平均体重。试验结束后对每头仔猪进行空腹称重，计算平均日增重。

2 结果与分析

2.1 仔猪外周血嗜中性白细胞百分数的变化

从表1可知，在仔猪35日龄时，所检测的外周血嗜中性白细胞的百分数，3组试验组的结果均要高于空白对照。在使用了黄芪多糖的3组试验组中，3组仔猪的外周血嗜中性白细胞的百分数高于2组，低于4组；在仔猪50日龄时，3组试验组的外周血嗜中性白细胞百分数均高于对照组，其中4组最为显著。此外，在仔猪35日龄时试验组（2组、3组、4组）的嗜中性白细胞数量均明显高于20日龄，但是50日龄时又呈下降的趋势。

表1 黄芪多糖对仔猪外周血嗜中性白细胞百分数的影响 %

2.2 仔猪猪瘟抗体水平的变化

由表2可知，在仔猪35日龄和50日龄时，试验组的猪瘟抗体效价均高于对照组，且差异极显著。其中在仔猪35日龄时，3组试验组的检测结果差异不显著；在50日龄时，4组的猪瘟抗体水平显著高于2组，与3组仔猪的差异不显著。

表2 黄芪多糖对仔猪猪瘟抗体水平的影响 log2

2.3 仔猪淋巴细胞转化率的变化

由表3可知，在20日龄时，仔猪外周血淋巴细胞的转化率各组之间没有显著差异；在仔猪35日龄时，4组仔猪的淋巴细胞转化率极显著高于对照组，3组的检测结果显著高于对照组，其余各组之间的差异均不显著；在仔猪50日龄时，3组和4组的检测结果显著高于对照组1组。

表3 黄芪多糖对仔猪淋巴细胞转化率的影响 %

2.4 仔猪日增重

由表4可知，添加了黄芪多糖的3组和4组仔猪相比较对照组，平均日增重增加了13.1%、10.6%，2组仔猪相比较对照组，平均日增重增加了2.8%。

表4 黄芪多糖对仔猪日增重的影响 kg

3 讨论

3.1 黄芪多糖对仔猪特异性与非特异性免疫功能的影响

嗜中性白细胞是一种免疫细胞，能够吞噬侵入机体的细菌、真菌等，参与机体的非特异性免疫，清除病原体，增强机体的免疫力。嗜中性白细胞能够还原硝基蓝四氮唑，且其还原能力随着吞噬能力的提升而提高。所以使用硝基蓝四氮唑还原试验能够检测嗜中性白细胞的百分数，阳性细胞百分数越高说明嗜中性白细胞的免疫活性越高[1]。在开始试验时，4组仔猪的外周血嗜中性白细胞百分数没有明显的差别，在仔猪35日龄时，添加了黄芪多糖的试验组仔猪外周血嗜中性白细胞百分数高于对照组；对于3组添加了黄芪多糖的试验组，仔猪外周血嗜中性白细胞百分数随黄芪多糖应用剂量的增加而增加。由此试验结果可知，黄芪多糖能够增加仔猪机体内嗜中性白细胞的百分数。此外，嗜中性白细胞能够在有IgG抗体参与的情况下发挥ADcc作用，激发机体的特异性免疫并清除抗原异物，这也说明了黄芪多糖不仅能够促进仔猪机体的非特异性免疫，还对特异性免疫有一定的促进作用。在仔猪35日龄时试验组（2组、3组、4组）的嗜中性白细胞数量均明显高于20日龄，但是50日龄时又呈下降的趋势，可能的原因是随着仔猪的生长，血液中的嗜中性白细胞通过血液循环进入到机体的各个组织中，导致外周血中的嗜中性白细胞数量有了一定程度的下降。

3.2 黄芪多糖对仔猪体液免疫功能的影响

通过间接血凝试剂盒对仔猪猪瘟抗体水平的检测能够分析黄芪多糖对仔猪体液免疫功能的影响。根据试验结果可知，在试验开始时，各组仔猪的猪瘟抗体水平差异不显著，在35日龄和50日龄时，添加了黄芪多糖的试验组仔猪猪瘟抗体水平显著高于对照组，并且猪瘟抗体水平随着黄芪多糖添加量的增加而上升，说明黄芪多糖能够促进仔猪的体液免疫功能。

3.3 黄芪多糖对细胞免疫功能的影响

通过淋巴细胞转化试验可以研究黄芪多糖对仔猪细胞免疫功能的影响，T淋巴细胞在机体细胞免疫中起着关键性作用。当其受到PHA（植物血凝素）等因素刺激，能够被激活，转化为淋巴母细胞，当机体被病原侵袭时，淋巴母细胞能够转化为致敏T淋巴细胞，参与到机体的细胞免疫中，因此，淋巴细胞转化率越高说明仔猪的免疫功能越强[2]。通过本试验可以发现，在试验开始时，各组仔猪的淋巴细胞转化率差异不显著，在仔猪35日龄和50日龄时，添加了黄芪多糖的试验组3组和4组的淋巴细胞转化率显著高于空白对照组，但是2组仔猪的淋巴细胞转化率与对照组之间差异不显著；说明黄芪多糖在一定的应用剂量范围内，能够提高仔猪淋巴细胞的转化率，进而增强仔猪的细胞免疫功能，提高免疫力。

3.4 黄芪多糖对仔猪生长性能的影响

黄芪多糖对促进仔猪营养物质的吸收有积极的作用，能够有效提高日增重，提高饲料利用率。主要是因为黄芪多糖能够提高仔猪回肠消化率，进而达到促进生长发育的目的。由本次试验可知，在试验开始时，各组仔猪的平均体重没有显著差异，在试验结束后，3组仔猪和4组仔猪的日增重相比较1组和2组仔猪显著提高。说明一定应用量的黄芪多糖能够提高仔猪的日增重[3]。