Rb、p16和cyclinD1基因在早期胃癌组织中的表达及临床意义分析

2019-01-07彭微袁桂刘洁黄旭

健康必读·下旬刊 2019年1期

彭微　袁桂　刘洁　黄旭

【摘要】目的：探究Rb、p16和cyclinD1基因在早期胃癌组织中的表达及临床意义。方法：选取2017年8月-2018年4月我院收治的50例胃部疾病患者，将他们分为两组，对照组为32例良性胃部疾病患者，其中有15例患者胃粘膜细胞异型增生，17例患者的胃粘膜细胞正常；研究组为18例早期胃癌患者。观察比较两组患者体内Rb、p16和cyclinD1基因的表达水平差异以及不同种类细胞内阳性表达率。结果：研究组患者中cyclin D1基因的表达水平明显高于对照组（P<0.05），Rb与p16的基因表达水平明显低于对照组（P<0.05）；研究组患肿瘤细胞中cyclin D1基因表达的阳性率高于异型增生细胞，差异有统计学意义（P<0.05），Rb与p16的基因表达阳性率低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。结论：广大医学工作者应该加大对cyclinD1、p16和Rb基因表达机制及其调控癌症发生机制的研究，不断创新早期胃癌的治疗方法，为临床上通过调控基因表达途径来治疗早期胃癌提供一种有效的依据。

【关键词】Rb；p16；cyclinD1；早期胃癌；

【中图分类号】R735.2 【文献标识码】A 【文章编号】1672-3783（2019）01-03--01

胃癌是我国临床上比较常见的一种恶性肿瘤疾病，严重威胁着人类的身体健康，尤其是近几年随着人们生活环境的变化，胃癌的发病率呈现逐年上升的趋势。本文探究分析了cyclinD1、p16和Rb基因在早期胃癌组织中的表达及其临床意义，旨在为临床上提供一种有效的早期胃癌的治疗依据，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2017年8月-2018年4月我院收治的50例胃部疾病患者，依据他们的病情将他们随机分为两组，对照组为32例良性胃部疾病患者，其中17例胃粘膜细胞正常的患者中男10例，女7例，患者的年龄为22—85岁，平均年龄为（60.1±4.5）岁， 15例胃粘膜细胞异型增生患者中男7例，女8例，患者的年龄为20—80，平均年龄为（57.1±2.5）歲。研究组为18例早期胃癌患者男10例，女8例，患者的年龄为21—78岁，平均年龄为（53.6±6.5）岁。两组患者在年龄、性别、身体状况等方面比较差异均不具有可比性（P>0.05），患者及其家属均知情同意本研究，同时经过医院伦理委员会批准。

1.2 方法

首先，采用聚合酶链式反应（PCR）法扩增cyclinD1、p16和Rb基因，具体的步骤为：①变性：cyclinD1、p16和Rb基因模板DNA在90～95℃下加热一定时间后，使之变性成为单链；②退火（复性）：降低温度到50～60℃，使引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；③延伸：调整温度到70～75℃，使DNA模板与引物在DNA聚合酶的作用下相结合，并以dNTP为反应原料重新合成DNA双链，重复循环此过程。之后采用免疫组化S-P法，即链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法检测所有患者体内cyclinD1、p16和Rb基因的表达。具体方法：将事先准备的患者的切片标本依次进行常规脱蜡至水、消除标本中内源性的过氧化物酶的活性，放置室温下在3%的H2O2中孵育 5-10 分钟，接下来用缓冲液水洗，再经一抗标记、水洗以及辣根酶酶标记二抗、冲洗后染色。cyclinD1、p16和Rbcyclin 抗体的稀释倍数分别度为75倍、50倍、100倍，阳性对照采取事先已经明确测定为阳性的组织切片，用磷酸盐缓冲液代替一抗做阴性对照。

1.3 观察指标

阳性：患者的胃组织标本上细胞核或细胞质内出现均一的棕黄色颗粒；阴性：患者的细胞核或细胞质内没有出现棕黄色颗粒；

阳性标准为弱阳性：患者组织切片内的阳性细胞数小于25% ；阳性：患者组织切片内的阳性细胞数在25%～55%；强阳性：患者组织切片内的阳性细胞数细胞数大于55%。

1.4 统计学方法

数据应用SPSS18.0进行分析，其中计数进行X2（%）检验，计量进行t检测（）检验， P<0.05提示有显著差异。

2 结果

研究组患者中cyclin D1基因的表达水平明显高于对照组（P<0.05），Rb与p16的基因表达水平明显低于对照组（P<0.05），具体见表一。

研究组患者早期胃癌组织细胞中cyclin D1基因表达的阳性率高于异型增生组织细胞，差异有统计学意义（P<0.05），Rb与p16的基因表达阳性率低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05），具体见表2。

3 讨论

胃癌是我国临床上比较常见的一种恶性肿瘤疾病，具有较高的发病率，在胃癌的发生的早期对患者进行治疗具有相对较高的治愈率。

综上所述，广大医学工作者应该加大对cyclinD1、p16和Rb基因表达机制及其调控癌症发生机制的研究，不断创新早期胃癌的治疗方法，为临床上通过调控基因表达途径来治疗早期胃癌提供一种有效的依据。

参考文献