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蜂蜜中有机活性组分检测的色谱方法研究

2019-01-05贾红亮北京农业职业学院

食品安全导刊 2019年21期
关键词:安捷伦有机酸柠檬酸

□ 贾红亮 潘 妍 北京农业职业学院

我国作为世界范围内的养蜂大国,也是蜂蜜的主要生产国家,此外还是蜂蜜最大的出口国之一。蜂蜜具有很高的保健效果,蜂蜜当中含有多种营养物质,深受我国广大人民群众的喜爱。蜂蜜是蜜蜂制造出来的一种以植物为基础的次生代谢产物,蜂蜜的成分非常复杂,当前研究表明,蜂蜜当中营养物质的成分超过100多种,具有较高的营养价值和药物价值,能够有效的提高人体的免疫力,加快伤口的愈合速度。蜂蜜在古希腊和古埃及被当中一种药物,主要用来治疗肠胃溃烂以及伤口。蜂蜜不但是当前自然界当中最复杂的食物,而且也是古代人类唯一可以使用的一种纯天然甜味剂,在食材的制作上也有很广泛的应用范围。本文就通过色谱分析的方法探讨了蜂蜜当中有机活性物质的组成成分。

1 实验部分

1.1 实验的主要仪器与试剂

高效液相色谱仪器(安捷伦科技(中国)有限公司),PROSTAR 303二极管检测仪器。SAX SPR小柱(安捷伦科技(中国)有限公司),十二管SPE检测装置(安捷伦科技(中国)有限公司),离子水发射器(安捷伦科技(中国)有限公司)。

葡萄糖酸液,甲酸溶液,苹果酸,乙酸,柠檬酸,丙酸都来自于美国SIGMA公司。

1.2 实验方法

1.2.1 标准溶液的配比

本次实验开始之前称量好葡萄糖酸、甲酸以及苹果酸、柠檬酸等有机物质放置在10 mL的容量瓶当中,使用去离子水溶化之后定容,配置得到浓度为50 g/L的储备溶液。取恰当的标准储备溶液混合之后,加水稀释到100 mL,放入容量瓶当中,其中葡萄糖算以及甲酸的浓度为5 g/L,其中苹果酸柠檬酸的浓度为2 g/L,马来酸的浓度为0.05 g/L,放在4 ℃的温度下储存。

1.2.2 样品处理方法

本次实验开始之前选取事前准备好的蜂蜜样品,如果蜂蜜样品当中存在结晶现象,那么必须将蜂蜜放置在60 ℃的水中进行水浴加热,使其充分溶解完成之后取出7.5 mL放置在溶剂为100 mL的容量瓶当中,加入恰当的等离子水溶解之后。确保蜂蜜样品完全溶解之后,加入0.1 mol/L的氢氧化钠溶液调整其pH值为10,然后搅拌15 min之后,再加入浓度为0.1 mol/L的硫酸溶液当中调整pH浓度,让pH值达到中性(pH=7),最后加入离子水定容之后混合均匀。最后取处蜂蜜样品溶液10 mL经过水相过滤之后,等到蜂蜜样品完全吸附成之后使用10 mL的去离子水进行冲洗,使用真空泵保障水流的速度为3 mL/min,最后在使用4 mL,浓度为1 mol/L的盐酸以0.5 mL/min的速度进行冲洗,最后存放在5 mL容量瓶当中,通过水相膜之后使用HPLC反相色谱柱分析,使用液相色谱检测仪检测之后,使用标准工作曲线外标法定量。高效液色谱法具有较高的分离度,而且对于蜂蜜成分检验的准确性也较高,可以使用不同类型的检验器材,对蜂蜜进行成分的检验分析,利用色谱图进行分析和判定,特别是随着我国计算机技术的不断发展,三维立体的高效液色谱法可以有效帮助蜜蜂成分的鉴定[1]。

2 结果

蜂蜜当中含有大量的有机活性物质,具有较为广泛的生物学效应,可以充当一种天然的抗氧化剂,蜂蜜当中含有的类黄酮可以有效的帮助人类预防心血管疾病,对于预防癌症具有非常良好的效果,此外蜂蜜当中的类黄酮是可以捕获活性氧,还原过氧化自由基团,防止其生产自由基。

本次实验当中通过测量发现,蜂蜜当中主要含有水和高度浓缩的糖,其中水的含量为17%,糖分占到蜂蜜干重比例的95%~99%,其中主要包括果糖,占比达到38.2%,葡萄糖占比达到31.3%,蔗糖占比为1%。其余的部分主要是有机酸,占比为0.57%。蜂蜜当中的抗氧化物质主要是酚类、肽、有机酸等,其中有机酸的含量虽然只有0.57%,但是通过对蜂蜜的检测发现蜂蜜当中的有机酸种类较多,有天冬氨酸、丁酸、柠檬酸等多种酸类。

3 讨论

蜂蜜作为以花蜜和植物为原料的纯天然甜味物质,古埃及人民将蜂蜜当作药物使用,直到青霉素被大量普及之后才开始慢慢放弃使用蜂蜜进行药物治疗,但是目前,抗生素的大量使用导致很多细菌已经进化出了相关的抗体,蜂蜜在伤口愈合中的作用又得到了恢复。蜂蜜是蜜蜂生产的一种次生代谢产物,蜂蜜当中拥有超过一百多种营养物质和营养成分,其中主要包括糖类、酶、氨基酸、有机酸等等多种物质,对于人体具有良好的保健贡献。在绿色生态重视程度越来越高的今天,蜂蜜已经成为人民群众最喜爱的食物之一,本文就通过色谱法分析了蜂蜜当中的主要成分,探究了蜂蜜营养成分的组成,以及各种营养物质的功效。

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