方磊涵,王 振,王 留,毕玉霞

（1.商丘职业技术学院,河南 商丘 476100;2.河南省中兽医药研究院 ,河南 郑州 450011）

近年来,由于养鸡业的集约化饲养和各种抗生素药物的滥用以及全球性动物疫病的大规模暴发,导致畜产品安全和质量问题越来越受到人们的关注。寻找安全、高效、无毒、无污染的绿色添加剂逐步替代抗生素和化学药物在养殖业中的应用,已成为畜牧业行业的发展趋势。中药,其中补益类中药具有健脾开胃,抗菌促生长,增强动物免疫机能等功能,与化药相比,具有资源丰富,副作用小,低毒低残留等优点,近年来已成为国内外学者的研究热点。

多糖是主要的生命物质成分之一,具有广泛的生物活性,特别是在免疫调节方面的表现更为突出。大多数中药都含有多糖活性成分,在免疫调节和免疫细胞激活及免疫功能改善等方面都发挥了很好的作用[1]。另有报道,植物多糖还具有提高动物生长性能、提高饲料的利用率和降低料重比的作用[2]。,因此,中药多糖的开发,在提高机体免疫力、提高动物生产性能、提高机体抗病力和抗感染及预防疾病等方面具有广阔的前景。本试验是在肉鸡的日粮中添加中药复方多糖,观察其对鸡生长性能和免疫指标的影响。深入探讨中药复方多糖来作为抗生素的替代品,以确定最佳剂量,为肉鸡的安全生产提供有效的防制措施。

1 材料与方法

1.1 试验材料 中药复方多糖:选用黄芪、党参、山楂、丹参、白术、茯苓、淫羊藿、补骨脂、生地、熟地、马齿苋、甘草等12味具有补气生津、活血化瘀、健脾和胃、温肾壮阳的中药（购于商丘市天伦大药房）,由商丘华康动物药业有限公司提取其中的多糖,多糖含量为69.80%。

绞股蓝多糖:实验室自制,其方法参见习南等[3]多糖的制备,制得多糖含量为47.86%。

免疫球蛋白（IgA、IgM、IgG）检测试剂盒,购自上海酶联生物科技有限公司。

1.2 试验方法

1.2.1 试验鸡的分组及处理 将1日龄健康AA肉雏鸡（由商丘科丰禽业公司提供）300只,随机分为5个处理组,每组5个重复,每个重复12只。各组雏鸡初始体重组间差异不显著。其中对照组饲喂基础日粮;试验Ⅰ组饲喂基础日粮+绞股蓝多糖400 mg/kg;试验Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组分别给予基础日粮+中药复方多糖200 mg/kg、400 mg/kg、600 mg/kg（见表1）。试验期42 d,分为1～21 d和22～42 d两个阶段。

1.2.2 饲养管理 饲料为单县六合饲料有限公司生产。饲养管理方法和饲养条件及鸡舍消毒均相同。试验鸡采用叠层式笼养,自由采食和饮水,7日龄时,鸡新城疫、传染性支气管炎二联活疫苗（La Sota株+H120株）滴鼻免疫;14日龄时,鸡传染性腔上囊中等毒力活疫苗点眼、滴鼻免疫。第一周鸡舍温度控制在32℃ ～35℃,第二周30℃ ～32℃,以后每周降2℃。4周后为室温下饲养,24 h光照。

表1 试验鸡的分组及处理

1.2.3 指标测定

1.2.3.1 生产性能指标的测定 试验前将所有雏鸡以重复为单位称重计算出初始平均体重。记录各阶段补料量,分别在21和42日龄晚断料,在禁食12 h后进行空腹称重。试验期间及时记录死鸡重和死鸡时剩料重,准确记录试验期内的给料量和撒料量。计算其平均日增重和日采食量及料肉比。

1.2.3.2 免疫器官指数（脾脏、胸腺、腔上囊）的测定于试验第21天和42天每重复组各随机选取2只肉鸡,颈部放血处死,取脾脏、胸腺、腔上囊,清理干净后称重,分别计算出脾脏、胸腺及腔上囊指数。

1.2.3.3 血清免疫球蛋白IgA、IgG、IgM含量的测定 分别于试验第21天、42天,每个重复组各随机选取2只肉鸡,禁食2 h后经翅静脉采血,静置10 min,3 000 r/min离心10 min,制备血清。操作时严格按照ELISA检测试剂盒说明书进行,,用试剂盒中的标准品建立标准曲线,通过计算分别得到免疫球蛋白IgA、IgG、IgM的含量。

1.3 数据处理 试验结果数据采用SPSS 17.0软件进行处理分析,各组数据以“平均值±标准差”表示,采用方差分析进行差异显著性检验。

2 结果与分析

2.1 中药复方多糖对雏肉鸡生产性能的影响 由表2可见,与对照组相比,1～21 d阶段,试验各组的日增重均有明显的提高,试验Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ各组显著高于对照组（P＜0.05）;试验Ⅰ组与对照组比较无显著性差异（P＞0.05）;日采食量没有明显的变化;试验各组的料重比均有降低,但差异均不显著（P＞0.05）。22～42 d阶段,试验四个组日增重均显著高于对照组（P＜0.05）;试验四个组日采食量也均高于对照组,但无显著性差异（P＞0.05）;试验各组之间料重比与对照组比较有下降趋势,但无显著性差异。两个阶段的平均日增重,中药复方多糖三个组均好于绞股蓝组,料重比圴低于绞股蓝组。

表2 中药复方多糖对肉鸡生产性能的影响

2.2 中药复方多糖对肉仔鸡免疫器官指数的影响 由表3可见,21 d时,与对照组相比,4个试验组的胸腺指数和腔上囊指数均有提高,脾脏指数均有降低,但均无显著差异（P＞0.05）。42 d时,4个试验组的胸腺指数比对照组有显著或极显著提高（P＜0.05或P＜0.01）;腔上囊指数与21 d时相比呈上升趋势,试验Ⅲ组、Ⅳ组比对照组提高明显（P＜0.05）;脾脏指数较对照组也有了明显的提高（P＜0.05）。第二阶段与第一阶段相比,免疫器官指数均呈上升趋势。中药复方多糖3个组的免疫器官指数除22～42 d试验Ⅱ组的胸腺指数外,其余各组之间没有显著性差异。

2.3 中药复方多糖对血清免疫球蛋白（IgA、IgG、IgM）的影响 由表4可见,21 d时,各试验组IgA、IgG、IgM的含量均高于对照组,IgA的含量各组间无显性差异（P＞0.05）,与对照组相比,试验Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组的IgG含量显著提高（P＜0.05）;IgM含量,除试验Ⅰ组外,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组都有明显提高（P＜0.05）;中药复方多糖三个组间差异不显著（P＞0.05）。42 d时,与对照组相比,试验4个组IgA、IgG的水平有显著提高（P＜0.05）,试验各组间没有显著性差异（P＞0.05）,IgM的含量比对照组略有提高,但没有显著性差异（P＞0.05）。

表3 中药复方多糖对肉仔鸡免疫器官指数的影响 （g/kg）

表4 中药复方多糖对血清IgA、IgG、IgM的影响 （g/L）

3 讨论

3.1 中药复方多糖对肉鸡生产性能的影响 大量研究表明,中药多糖作为具有生物免疫活性的物质,在畜牧业生产中可促进动物生长,提高动物生产性能,提高机体的免疫功能,提高饲料利用率,降低饲养成本。谢红兵等[4]在日粮中添加150 mg/kg、300 mg/kg、450 mg/kg 的香菇多糖 28 d,结果鸡在14、21、28、35日龄时的体重明显高于对照组（P＜0.05）。谭本杰等[5]研究表明,酵母多糖添加能显著提高肉鸡生产性能,增强机体免疫力。岳永波等[6]试验证明,黄芪多糖对肉鸡具有促生长作用,添加1g/kg、2g/kg黄芪多糖时,对母鸡的促生长作用最明显（P＜0.05）。伍松陵等[7]在肉鸡饲料中添加200 mg/kg的朴菇多糖粉可使鸡的日增重提高10.75%,节约饲料消耗7.18%,单位增重饲料原料成本下降6.45%。王学斌等[8]、金光明等[9]研究表明,通过给雏鸡添加黄芪多糖后,可明显提高雏鸡日增重,降低采食量和料肉比,说明在一定程度上黄芪多糖能提高动物的生产性能。本试验选用黄芪、党参、山楂、丹参、白术、茯苓、淫羊藿、补骨脂、生地、熟地、马齿苋、甘草等12味具有补气生津、活血化瘀、健脾和胃、温肾壮阳的中药组方而制得的多糖可以显著提高肉鸡的平均日增重,日采食量,降低料重比,以400 mg/kg的量添加效果最好。另外,两个阶段（1～21 d和22～42 d）在提高鸡的生产性能上,中药复方多糖作用优于绞股蓝多糖。

3.2 中药复方多糖对免疫机能的影响

3.2.1 中药复方多糖对肉仔鸡免疫器官指数的影响 大量研究证实,中药多糖可以通过促进免疫器官发育,提高细胞免疫和体液免疫水平,增强红细胞免疫功能,促进吞噬细胞吞噬等功能而起到免疫增强作用。禽类的主要免疫器官包括胸腺、脾脏、腔上囊,它们参与机体的体液免疫和细胞免疫,免疫器官和免疫球蛋白是衡量动物免疫机能的重要指标。雷莉辉等[10]研究表明,在肉仔鸡的日粮中添加不同剂量的香菇多糖,肉仔鸡的免疫器官指数均显著高于对照组（P＜0.05）。于红梅[11]研究证实,低、中、高剂量的淫羊藿多糖对肉鸡的免疫器官指数、免疫球蛋白、细胞因子均有增强作用,一些免疫指标超过了对照组和免疫抑制组。石念进等[2]探讨了中药复方多糖（黄芪、党参、茯苓、麦冬等组成）对鸡的生长及免疫作用,结果显示,在28、35d时,0.04%复方多糖组和0.08%复方多糖组的胸腺指数、脾脏指数和腔上囊指数与对照组之间差异极显著（P＜0.01）,在一定程度上,中药复方多糖可以促进雏鸡的免疫器官的发育,增强雏鸡的免疫力。张红英等[12]研究表明,肌肉注射怀山药多糖溶液高、低剂量各0.3 ml/羽,连用3 d,用药后第 7、14、21、28、35、42 天鸡的免疫器官指数均高于对照组,具有增强鸡的免疫功能。本试验表明,中药复方多糖的添加能够使肉雏鸡各免疫器官的相对重量提高,其42 d时效果好于21 d,这说明中药复方多糖的添加效果与饲喂剂量、饲喂时间有关。以试验Ⅲ组（400 mg/kg中药复方多糖）和Ⅳ组（600 mg/kg中药复方多糖）的效果最好,但两组间无显著性差异,从节约成本方面考虑饲料中添加400 mg/kg中药复方多糖量最为经济适用。

3.2.2 中药复方多糖对肉仔鸡血清免疫球蛋白含量的影响 免疫球蛋白是具有抗体活性的动物蛋白,经抗原刺激后转化为抗体。其中IgG是血清中免疫球蛋白含量最高的,占75%,它是动物在自然感染和人工主动免疫后产生的主要抗体;IgM是一种高效能抗体,其含量仅次于IgG,占血清总Ig的10%～12%具有较强的杀菌溶菌、溶血及凝集作用;IgA是机体黏膜中主要抗感染免疫的抗体,是抵御病原体入侵的第一道防线,对免疫球蛋白水平的检测通常是衡量机体免疫状况的常用指标[13]。王佳丽等[14]研究表明,饲料中添加中药复方制剂使肉仔鸡血清免疫球蛋白水平均有不同程度提高,可增强肉仔鸡的体液免疫机能。王莹等[15]试验结果证明了黄芪多糖饲料添加剂可提高AA肉鸡血清免疫球蛋白水平,21日龄时高剂量组IgM含量显著提高;42日龄中、高剂量组免疫球蛋白 IgG和 IgA极显著升高（P＜0.01）。王建东等[16]用枸杞多糖拌料,连用7 d,结果表明,IgA、IgG、IgM含量在跟踪饲喂7 d和跟踪14 d都有增长趋势。本试验在饲料中添加中药复方多糖后,21 d时,高、中、低中药复方多糖组IgA、IgG、IgM的含量有了不同程度的提高,IgG含量比对照组分别提高了7.60%、13.78%和10.22%（P＜0.05）,IgM的含量分别提高了18.00%、23.33%和 24.67%（P＜0.05）;42 d时,高、中、低中药复方多糖组IgA、IgG的水平与第一阶段（1～21 d）相比效果更为明显,并以高、中剂量添加效果最好。

4 小结

本研究结果表明,日粮中添加不同剂量的中药复方多糖能显著提高肉鸡的日均采食量和平均日增重,提高免疫器官指数和血清免疫球蛋白含量,从而提高肉鸡的生长性能和免疫功能,尤其以400 mg/kg和600 mg/kg的量添加效果最好,且日粮中添加以400 mg/kg中药复方多糖为最佳。因此,中药复方多糖在养鸡生产上作为免疫增强剂具有很好的应用前景。