靳晓东，张聪慧，钟江

复旦大学生命科学学院微生物学与微生物工程系, 上海 200438

奶牛乳腺炎是奶牛中常见的乳腺炎症反应，严重影响牛奶的质量和产量。其主要致病菌是金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)、无乳链球菌(Streptococcusagalactiae)等[1]。金黄色葡萄球菌是隐性奶牛乳腺炎的主要致病菌[2]。目前，抗生素是治疗奶牛乳腺炎的主要手段[3]，但抗生素长期使用往往引起细菌耐药性，导致治疗效果不佳[4]，且牛奶因抗生素残留而被废弃，严重影响牛奶产业[5]。

噬菌体用于抗菌治疗具有特异性强、成本低等优点，且不会产生耐药性等不良反应，逐渐引起国内外研究者的重视[6]。已有一些研究成功利用金黄色葡萄球菌噬菌体进行了奶牛乳腺炎治疗[7-8]，为奶牛乳腺炎的噬菌体疗法提供了理论基础。

噬菌体具有宿主特异性，获得更多种类的噬菌体，建立噬菌体库，对更好地应用噬菌体疗法具有重要意义。本研究从奶牛场废水中分离到两株金黄色葡萄球菌烈性噬菌体，对其生物学和基因组学特征进行了分析。

1 材料与方法

1.1 材料

金黄色葡萄球菌标准株ATCC 25923、1株牛源金黄色葡萄球菌cowSA_1、1株人源金黄色葡萄球菌humanSA_1及1株人源表皮葡萄球菌(S.epidermidis)humanSE_1为本实验室保藏。细菌培养采用高盐LB培养基(酵母提取物5 g/L、蛋白胨10 g/L、氯化钠70 g/L，pH 7.0，分别添加 0.7% 琼脂糖和 1.8% 琼脂获得半固体和固体高盐LB培养基)。

1.2 方法

1.2.1噬菌体的分离和纯化取自上海市宝山区某奶牛场，样品为患病奶牛乳房清洗液，4 ℃ 2 000g离心10 min后取上清液，以ATCC 25923作为指示菌，用双层琼脂平板法检测是否含有裂解性噬菌体。……