梁杰 李功义

摘要 根据大兴安岭马铃薯种薯生产实际，应用酶联免疫吸附检测法（ELISA）检测茎尖组织培养试管苗的带毒情况，鉴定危害马铃薯生产的6种主要病毒（PVX、PVY、PVS、PVM、PVA、PLRV），并结合指示植物如千日红进行最后鉴定，筛选健康、无毒的试管苗，为切段扩繁及试管薯生产作准备。该方法简单易操作，可作为国内生产脱毒种薯单位的标准检测方法进行推广。

关键词 马铃薯试管苗；病毒检测；酶联免疫吸附检测法；指示植物接种鉴定法

中图分类号 S532 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2018）19-0081-01

在生产上，马铃薯以无性繁殖为主，种植过程中容易感染病毒，并通过块茎世代传递，导致病害逐年加重、马铃薯产量和品质下降[1]。由于脱毒苗有再侵染的可能，对基本无毒核心苗进行连续跟踪检测[2-3]，以保证试管苗质量。对黑龙江省主栽马铃薯品种脱毒试管苗按株系进行检测筛选，采用双向聚丙烯酰胺凝胶电泳方法（R-PAGE），检测主栽品种脱毒试管苗带类病毒状况，筛选出无类病毒的试管苗株系。

1 材料与方法

1.1 试验材料

马铃薯试管苗材料来源于黑龙江省大兴安岭地区农林科学院组培室，以东农303、早大白、费乌瑞它、尤金、中薯一号、大西洋、郑薯6号、克新13号、诺兰、中薯3号、中大一号马铃薯试管苗作为检测样品；马铃薯病毒检测试剂盒购于瑞士，由苏庆祥（博士）代购。

1.2 仪器和设备

聚苯烯微量滴定板（96孔）、酶联检测仪、微量可调进样器（0.5～10.0 ？滋L、10.0～40.0 ？滋L、40.0～200.0 ？滋L 3个规格）及相应规格的塑料头、电光天平（精确到0.1 mg）、冰箱、培养箱（温度定为37 ℃）、瓷研钵。……