朱玲玲，林涛发，谢丽平，王少扬

(1.皖南医学院弋矶山医院感染科，安徽 芜湖 241001；2. 厦门大学附属东方医院感染科，福建 福州 350001；3. 福州总医院传染病教研室，福建 福州 350001)

我国肝癌发病率居全球首位，每年超38万人死于肝癌，约占全球肝癌死亡人数一半[1]。肝癌起病隐匿，发现时多为中晚期，且恶性程度高、侵袭性强，易复发和转移，因此，开发出有效的治疗药物具有重要意义。逆转素(reversine)是一种人工合成的小分子嘌呤类似物，在包括人前列腺癌、宫颈癌、乳腺癌、肺癌等多种肿瘤中均表现出较强的抑制肿瘤细胞生长的作用[2-4]。Reversine的抗癌作用可能与其抑制Aurora激酶的活性有关。D′Alise等[5]发现，reversine可抑制白血病细胞的克隆形成，且对正常细胞的毒性作用较另一种已处于II期临床试验阶段的Aurora激酶抑制剂VX-680更小。此外，Hua等[6]在裸鼠成瘤模型上也证实reversine可抑制肿瘤的生长。目前，reversine在肝细胞癌中的影响作用研究较少，本文就reversine对人肝癌HepG2细胞增殖、克隆形成及凋亡的影响进行探究。

1 材料与方法

1.1试剂与仪器Reversine购于美国MedChemexpress生物科技公司，用二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide，DMSO)溶解，储存浓度为10 mmol·L-1，置于-20℃冰箱保存。胎牛血清、DMEM高糖培养基、胰酶购于美国Gibco公司；MTS细胞增殖试剂盒购于美国Promega公司；Annexin V-FITC/PI凋亡检测试剂盒购于南京凯基生物科技公司；蛋白酶抑制剂、磷酸酶抑制剂、BCA蛋白检测试剂盒、ECL化学发光试剂盒，均购自于美国Millipore公司；兔抗活化多聚(ADP-核糖)聚合酶[poly(ADP-ribose) polymerases, PARP](D64E10)、Bax(E63)、Bcl-2(E17)、Bcl-xl(E18)抗体，购自美国Cell Signaling Technology公司；细胞裂解液、鼠抗人β-actin(AC-74)、β-tubulin(b-5-1-2)及辣根过氧化物酶标记的二抗，均购自碧云天公司。……