吉远珍，韩俊岭

(江苏省泰州市人民医院医学检验中心 225300)

在丙型肝炎病毒的检测中，通常对VITROS全自动免疫分析仪对发光样品吸光度比临界值(S/CO)≥8.0的标本做核酸试验(NAT)以确诊[1-2]。有研究表明VITROS发光S/CO≥8.0时，NAT的阳性率为96.1%[3]。有研究显示，50%的患者丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)S/CO值<4.5时证明为阴性，足以排除HCV感染[4-5]。为了促进补充测试发展，故有学者提出当VITROS抗-HCV试剂测得S/CO值<8时，需要进一步测试样品以排除假阳性，推荐用第3代重组蛋白免疫印迹分析(RIBA)实验作为确证实验[6]。因此，本研究运用该方法重新确定本实验室VITROS抗-HCV检测试剂有效的截断值(CUT-OFF值)，用于区分真阳性和假阳性结果。在日常检测发现，S/CO<8.0，尤其是极低水平抗-HCV(S/CO<3.0)所占的比例高达80.3%，因此本研究拟用RIBA实验来确认S/CO<8.0的样本作确证实验，找出抗-HCV的S/CO与RIBA结果的相关关系，确定合适的CUT-OFF值，从而减少假阳性报告，降低由此产生的各种不良后果，避免医患纠纷及给患者带来的不良心理压力及不必要的检查。

1 资料与方法

1.1一般资料 选择2016年7月至2017年11月本实验室检出217例抗-HCV阳性标本，并收集S/CO<8.0标本101例，-70 ℃保存待用。

1.2方法

1.2.1化学发光免疫测定(CLIA) 使用全自动免疫分析仪(Ortho VITROS 5600 Immunodiagnostic System)对抗-HCV进行检测，产品标准标号：YZB/ENG 1979-2010，操作严格按照仪器说明书进行。

1.2.2RIBA RIBA补充确认实验使用MP生物医学亚太私人有限公司试剂盒；产品标准编号：YZB/SIN 5848-2011；产品型号：11139-036。严格按照试剂说明书的要求进行操作。

2 结 果

2.1丙型肝炎病毒阳性标本S/CO分布情况 217例血清阳性样本中，S/CO<8.0共101例，占46.5%；S/CO<3.0的极低阳性标本共69例，占31.8%。S/CO值为1～<2共42例，为2～<3共27例，为3～<4的共14例，为4～<5共6例，为5～<6共9例，为6～<7共2例，为7～<8共1例，>8共116例。

2.2样本研究特征 选择S/CO<8.0的101例标本，对其中的61例进行了第3代RIBA确认实验，其中31例(51.7%)为阴性，9例(14.8%)不确定，21例(34.5%)为阳性。RIBA确认阳性、不确定及阴性样本的S/CO的水平分别为阳性组4.41±2.72，阴性组1.67±0.41，不确定组2.64±0.38。RIBA阳性和不确定组样本的S/CO值与阴性组比较，差异有统计学意义(P<0.05)。S/CO值分布与RIBA确证结果的关系见表1。

表1 S/CO值与RIBA确证结果的关系(n)

2.3条带分布情况 确认结果为阳性及不确定标本的条带分布具体见表2，阳性组检出条带最多的是核心抗原，其次为NS3-1和NS3-2，不确定组样本检出条带多集中分布于NS3-1和NS3-2。

2.4ROC曲线分析 以RIBA阴性组的S/CO值与阳性及不确定组进行ROC曲线分析，计算CUT-OFF值。当截断值为2.1时，ROC曲线下面积(AUC)=0.94，特异度为92.4%，灵敏度为85.2%。

表2 RIBA确证结果为阳性及不确定标本的条带分布(n)

3 讨 论

VITROS抗-HCV化学发光法是第3代增强化学发光分析方法，比酶联免疫吸附试验(ELISA)法更灵敏更特异，它可以检测到非常低的抗体水平，但对丙型肝炎感染低发人群如献血员、普通人群等，仍存在较高频率的假阳性结果(15%～62%)[7-9]。

HCV RNA检测是诊断活动性HCV感染的金标准，但它除了成本高，需要专业技术人员和仪器等缺点外，若仅以NAT结果作为抗体筛查的确认实验，会存在较多的漏诊及错误的诊断[10]。……