何卫东 刘明春 陈秋月 邱晓蔚 杨宝圩 蔡月真

摘   要：目的  使用化学发光免疫分析技术对孕前及孕早期育龄妇女进行风疹病毒定量检测，通过对检测结果进行分析，了解本地区孕前及孕早期妇女风疹病毒的感染状况，为制定孕前及孕早期保健措施提供依据。方法  对2015年5月～2018年4月来我院进行孕前检查和孕早期建卡的1052例育龄妇女进行风疹病毒特异性抗体IgM和IgG的定量检测，并对检测结果进行统计分析。结果  育龄妇女中RV-IgM总阳性率为0.86%，RV-IgG总阳性率为80.13%。曾经感染过风疹病毒或接种疫苗有保护性抗体（IgM-/IgG+）总体比例为79.46%（836/1052），对风疹病毒易感的妇女（IgM-/IgG-）总体比例为19.68%（207/1052）。孕前组及孕早期组（IgM-/IgG-）比例分别为9.20%、27.07%，总体比例为19.68%;（IgM-/IgG+）比例分别为89.43%、72.45%，总体比例为79.46%;（IgM+/IgG-）比例分别为0.46%、0，总体比例为0.19%;（IgM+/IgG+）比例分别为0.92%、0.49%，总体比例为0.67%。孕前组RV-IgM及RV-IgG阳性率高于孕早期组，差异有统计学意义（P<0.05）。结论  CLIA法对风疹病毒IgM 抗体和IgG抗体的准确检测，为诊断和随访风疹病毒急性感染，评估孕前及孕早期育龄妇女的免疫状态，以及为可疑育龄妇女选择适当的预防措施提供了基本的工具和依据。RV-IgG 阳性率较高，对育龄妇女具有一定的保护作用，防治重点可放于RV-IgG阴性的育龄妇女。

关键词：化学发光免疫分析法;风疹病毒;IgM;IgG;育龄妇女

中图分类号： R446.6                                 文献标识码： B                               DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2018.16.046

文章編号：1006-1959（2018）16-0145-04

Analysis of Detection Results of Rubella Virus by Chemiluminescence Method in Women of Childbearing Age

HE Wei-dong，LIU Ming-chun，CHEN Qiu-yue，QIU Xiao-wei，YANG Bao-wei，CAI Yue-zhen

（Department of Clinical Laboratory，Shishi Maternal and Child Health Care Hospital，Shishi 352700，Fujian，China）

Abstract：Objective  To quantitatively detect rubella virus in women of pre-pregnancy and early pregnancy age by chemiluminescence immunoassay，and to analyze the results of the detection.So that to understand the status of rubella virus infection in pre-pregnancy and early pregnant women in this area，and to provide evidence for the establishment of pre-pregnancy and early pregnancy health care measures.Methods  From May 2015 to April 2018，1052 women of childbearing age who underwent prenatal examination and early pregnancy card building were examined for rubella virus specific antibody IgM and IgG，and the results were analyzed statistically.Results  The total positive rate of RV-IgM in women of childbearing age was 0.86%，and the total positive rate of RV-IgG was 80.13%.79.46% of them（836/1052）had previously been infected with rubella virus or vaccinated with protective antibodies（IgM-/IgG+）.The overall proportion of women susceptible to rubella virus（IgM-/IgG-）was 19.68%（207/1052）.The proportion of pre-pregnancy group and early pregnancy group（IgM-/IgG-）was 9.20% and 27.07% respectively，and the overall proportion was 19.68%.（IgM-/IgG+）ratio was 89.43%，72.45%，the overall ratio was 79.46%;（IgM+/IgG-）ratio was 0.46%，0，the overall ratio was 0.19%;The ratio of（IgM+/IgG+）was 0.92% and 0.49%，respectively，and the overall ratio was 0.67%.The positive rate of RV-IgM and RV-IgG in the pre-pregnancy group was higher than that in the early pregnancy group，the difference was statistically significant（P<0.05）. Conclusion  The accurate detection of rubella virus IgM antibody and IgG antibody by CLIA method can be used to diagnose and follow up the acute rubella virus infection and to evaluate the immune status of women of pre-pregnancy and early pregnancy age，it also provides basic tools and basis for selecting appropriate preventive measures for women of pregnancy age.The positive rate of RV-IgG was higher，and it had a certain protective effect on women of childbearing age.The emphasis of prevention and treatment could be placed on women of childbearing age with negative RV-IgG.

Key words：Chemiluminescent immunoassay;Rubella virus;IgM;IgG;Women of childbearing age

风疹病毒（rubella virus，RV）是单链的RNA病毒，属于披膜病毒科[1]。风疹引起的临床症状较轻，多数情况下极少引起并发症或症状不明显[2]。人群对风疹病毒普遍敏感，人是风疹病毒的唯一宿主，感染后可以终身免疫[3]。妊娠期发生RV感染后可引起流产、死胎、胎儿宫内发育迟缓、先天性畸形、新生儿中枢神经的损害等不良后果[4]。为了提高圍生儿质量，减少出生缺陷的发生，在十多年前，我国将TORCH检查（包括风疹病毒）列为孕期检查的常规项目[5]。本研究采用化学发光免疫分析法（CLIA）定量测定1052例育龄妇女风疹病毒特异性IgM及IgG抗体，现报道如下。

1资料与方法

1.1一般资料  选取2015年5月1日～2018年4月30日来福建省石狮市妇幼保健院进行孕前检查和孕早期建卡的1052例育龄妇女作为研究对象，其中孕前435例，孕早期617例，年龄19～41岁，平均年龄（23.50±2.80）岁。

1.2仪器与试剂  检测仪器为意大利DiaSorin公司LIAISON全自动化学发光免疫分析仪。风疹病毒IgM与IgG抗体检测试剂盒（化学发光免疫分析法）及其质控品和校准品由意大利DiaSorin公司原装提供。其精密度、线性范围、准确度、携带污染率及参考范围等到测定参数均符合该仪器技术要求，能为临床提供准确、可靠的依据[6]。我院参加了卫生部室间质评，并有严格的室内质控流程和措施。

1.3方法

1.3.1所有研究对象采集静脉血3～5 ml，3000 r/min离心10 min，分离后血清样本保存至2～8 ℃环境下贮存，在48 h内检测。

1.3.2风疹病毒抗体测定  实验操作完全按试剂说明书和仪器操作规程进行，使用意大利DiaSorin公司LIAISON全自动化学发光免疫仪定量检测风疹病毒特异性IgM和IgG抗体。

1.3.3方法原理  采用CLIA法检测风疹病毒特异性IgM或IgG抗体。将风疹病毒抗原包被于顺磁性微粒（固相载体）上，异鲁米诺衍生物结合小鼠单克隆抗体形成异鲁米诺-抗体示踪物。在第1次温育期间，校准品、样本或质控品中存在的风疹病毒抗体与固相载体结合。随后第2次温育期间，异鲁米诺-抗体示踪物与已结合在固相载体上的风疹病毒IgM或IgG发生反应。在每次温育后，未结合的物质均被清洗掉。随后，加入启动试剂，引发闪光化学发光反应，产生光信号[7]。光信号和异鲁米诺-抗体示踪物的数量由光电倍增管测定为相对光单位（RLU）值，从而显示存在于校准品、样本或质控品中风疹病毒IgM或IgG的浓度。

1.3.4诊断标准  当RV-IgM>25 AU/ml、RV-IgG>10 IU/ml时判断为阳性。

1.4统计学处理  采用SPSSl9.0统计软件进行数据分析，计数资料以（%）表示，采用？字2 检验，P<0.05表示差异具有统计学意义。

2结果

2.1风疹病毒抗体检测结果  研究对象1052例育龄妇女RV-IgM总阳性率为0.86%（9/1052），RV-IgG总阳性率为80.13%（843/1052）。

2.2孕前和孕早期妇女风疹病毒感染状况  根据是否怀孕及孕周分为孕前组及孕早期组，分别计算两组RV的IgM及IgG阳性情况。在我院检查的育龄妇女曾经感染过风疹病毒或接种疫苗有保护性抗体（IgM-/IgG+）总体比例为79.46%（836/1052）;对风疹病毒易感的妇女（IgM-/IgG-）总体比例为19.68%（207/1052）。有2例（IgM+/IgG-）可能在检测近期初次感染了风疹病毒，另有7例（IgM+/IgG+）可能为近期感染或再发感染。孕前组及孕早期组（IgM-/IgG-）比例分别为9.20%、27.07%;（IgM-/IgG+）比例分别为89.43%、72.45%;（IgM+/IgG-）比例分别为0.46%、0;（IgM+/IgG+）比例分别为0.92%、0.49%，见表1。

2.3孕前及孕早期妇女风疹病毒抗体IgM和IgG阳性率的情况  比较孕前和孕早期两组妇女风疹病毒的IgM及IgG阳性率，孕前组RV-IgM及RV-IgG阳性率均高于孕早期组，差异有统计学意义（P<0.05），见表2。

3讨论

在妊娠前4个月期间感染风疹病毒则将引起非常严重的后果，如果没有保护性免疫球蛋白，在怀孕期间感染的孕妇将会引起高风险性胚胎损害[8]。先天性风疹会引发胎儿广泛范围的严重缺陷，其中多数是永久性的，并且影响后期的发育（比如白内障，耳聋，肝脾肿大，精神运动性抑制，骨变质，心脏病，神经病等）[9]。胎儿和新生儿的病理性后果与病毒的致畸性以及感染发生时所处的妊娠时间相关。母体感染时的孕龄则被认为是导致宫内传播和胎儿损伤最为重要的决定因素。一般认为孕龄越大，风险则会越低：在怀孕前2个月感染是最高的，达到40%～60%，在随后的第4和第5个月则会逐渐降低至10%～20%。对新生儿的临床表现和病毒分离研究都证实超过妊娠中期后胎儿很少感染。

胎儿风疹病毒感染是由母体初次感染（无论是显性感染或是隐性感染）过程中病毒在宫内进行传播，即血液中的病毒首先感染胎盘，随后感染胚胎。母体继发感染病毒在宫内传播非常少见，这表明母体的免疫力（无论是先天获得还是疫苗诱导获得）会保护胎儿免受宫内感染。母体感染会引起下列几种情况：①胚胎未感染;②胚胎吸收，仅见于在妊娠早期阶段发生的感染;③流产;④死产;⑤胎盘受感染而胎儿未受感染;⑥胎盘和胎儿均受感染。被感染的胎儿可能会表现出明显的多器官受累，或者胎儿初期无明显疾病，然而经过长期的随访后，可发现胎儿听力缺失、中枢神经系统损害或者有其它缺陷。

妊娠期初次感染风疹病毒特别是在妊娠早期对胎儿的危害很大。先天性风疹综合征（congenital rubella syndrome，CRS）是指母体感染风疹病毒引起新生儿先天性畸形的统称。CRS与母体感染时间有密切联系，在孕早期初次感染风疹病毒，发生CRS的几率为80%左右。其中90%表现为听力障碍，其次最常见的为先天性心脏病和青光眼、白内障，少部分患者可能出现死胎或流产[10]。孕12周后感染风疹病毒，对胎儿不良影响明显减小。

由于20世纪90年代以后，我国风疹疫苗的广泛应用，育龄妇女RV-IgG阳性率进一步升高[11]。根据目前的资料预测，随着时间的推移，风疹在人群的易感性可能呈下降趋势。但由于我国疫苗覆盖率不高，人工免疫效果不稳定，生育期妇女未常规补种疫苗等因素，CRS仍将在我国持续存在。我们的资料也显示，有2例（IgM+/IgG-）妇女可能在检测近期初次感染了风疹病毒，另有7例（IgM+/IgG+）可能为近期感染或再发感染。需要通过对IgG抗体进行亲和力的检测，如在孕早期检测为高亲和力，则感染应在孕前发生，对胎儿影响较小。如为低亲和力，则可能为近期感染，需进一步采脐血了解有无胎儿感染。

本研究采用CLIA法对1052例育龄妇女进行RV感染检测，结果显示RV-IgM阳性率为0.86%，与肖兵等[12]报道的0.96%较为一致，与赵卫卫等[13]报道的1.25%较为接近;RV-IgG阳性率为80.13%，与林立鹏等[14]报道的84.50%以及何天文等[5]报道的79.18%、吴敏芳[15]报道的81.36%相近。对孕前及孕早期妇女RV检测结果进行分析，孕前组RV-IgM及IgG阳性率高于孕早期组，差异有统计学意义（P<0.05），与何天文等[5]报道的结果一致。

应用CLIA方法直接对风疹病毒特异性IgM抗体和IgG抗体进行动态定量检测，具有特异性强、敏感性高、可信度高、简单易行等优点[16]，可以避免胎儿流产、早产、死胎、畸形和发育不良等问题。我们建议在孕前对风疹病毒IgM和IgG进行检测，以便及时发现易感人群，对风疹病毒IgM-/IgG-的妇女，可在孕前接种疫苗，人工主动免疫。孕早期常规检测风疹病毒抗体，如果发生了血清转化，要警惕CRS的发生。

综上所述，CLIA法对风疹病毒IgM 抗体和IgG抗体的准确检测，为诊断和随访风疹病毒急性感染，评估孕前及孕早期育龄妇女的免疫状态，以及为可疑育龄妇女选择适当的预防措施提供了基本的工具和依据。RV-IgG阳性率较高，对育龄妇女具有一定的保护作用，防治重点可放于RV-IgG阴性的育龄妇女。此外，随着我国接种风疹病毒疫苗的普及，风疹病毒IgG测试则可更广泛的用于确定在疫苗接种后受者的血清转换状态。

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收稿日期：2018-6-9;修回日期：2018-6-19

编辑/张建婷