张 靖

(南京医科大学附属江苏盛泽医院, 江苏 苏州, 215228)

研究[1]发现，维生素D缺乏与非骨骼慢性疾病具有相关性。作为调节血压的关键因子，活性维生素D可以直接抑制细胞的启动子活性肾素基因，从而下调肾素-血管紧张素系统功能[2]。缺乏维生素D的人群中，血清肾素和血管紧张素II浓度显著升高，肾血管灌注对血管紧张素II的反应减弱[3]。研究[4-6]表明，血清人25-羟基维生素D3[25(OH)D3]浓度与人体血压水平或高血压状态存在显著关联。维生素D与维生素D受体(VDR)结合而发挥作用，Wang等[7]在美国人群中发现VDR基因BsmI和FokI位点多态性与高血压发病存在关联。本研究探讨高血压与维生素D受体基因遗传变异的关系，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2015年1月—2018年1月本院门诊收治且诊断为高血压患者289例为高血压组，所有病例均符合高血压诊断标准，排除其他非高血压患者。健康对照组为本院同时期参加体检的健康人群650例。本研究获得本院伦理委员会的批准，严格遵守伦理学的各项规定。

1.2 调查方法

参照相关文献自行设计的高血压调查表进行现场询问调查，调查内容包括基本情况(年龄、性别、吸烟、饮酒等)，既往疾病史(慢性疾病史、传染病史、其他疾病史等)。

1.3 实验方法

抽取研究对象外周静脉血5 mL，分离血清、白细胞和红细胞，分装于1.5 mL冻存管。采用ELISA法检测血清25(OH)D3水平，所有实验的具体操作均严格按照说明书进行。从美国国立生物技术信息中心(NCBI)数据库中搜索VDR基因的多态性位点，筛选在中国人群具有较高频率[最小等位基因频率(MAF)≥5%], 再结合相关文献报道[5-7], 最终选择FokI和ApaI两个位点。采用ABI公司设计的TaqMan-MGB荧光探针实施定量PCR法检测FokI和ApaI位点基因型。反应在ABI 7900 PCR仪中进行，采用SDS2.3软件读取检测数据。

1.4 统计学分析

应用EpiData 3.10、SPSS 17.0和PHASE 2.0软件分析实验数据，采用卡方检验分析高血压组和健康对照组的性别、吸烟、饮酒分布情况，年龄分布差异采用t检验，血清25(OH)D3水平分布不符合正态分布，故采用秩和检验方法。采用多因素Logistic回归分析VDR基因位点在人群中分布。

2 结 果

高血压组和健康对照组在性别、年龄分布上无显著差异(P=0.71、0.27) ,2组血清25(OH)D3水平有显著差异(P<0.01)。见表1。多因素Logistic回归分析显示，在调整年龄、性别等因素后，与FF基因型相比, FokI位点的Ff可以显著增加个体高血压的发病风险(调整OR=1.63, 95% CI=1.17～2.31); 本研究未发现ApaI位点多态性与高血压的发病风险存在显著关联。见表2。FokI和ApaI两个位点组成的单倍型共有4种形式，即FA、Fa、Af、af。与fa单倍型相比, Fa单倍型在高血压组的分布显著低于健康对照组(调整OR=0.65, 95%CI=0.51～0.84), 见表3。采用协方差分析法，分析机体血清25(OH)D3水平与FokI位点基因型分布的关系。结果显示FokI位点3种基因型中血清25(OH)D3水平分布差异有统计学意义(F=3.47,P=0.04)。见表4。

表1 2组受试者一般资料比较

25(OH)D3采用中位数(最小值，最大值)表示;与健康对照组比较，**P<0.01。

表2 VDR基因多态性与高血压遗传易感性的关系

调整因素分别为年龄、性别、吸烟和饮酒。

表3 VDR基因SNP位点单倍型与高血压发病的关联

调整因素分别为年龄、性别、吸烟和饮酒。

表4 2组人群中FokI不同基因型血清25(OH)D3水平分布差异

3 讨 论

目前，关于高血压的发病机制还处于研究阶段，但遗传因素已被证实在高血压的发病过程中起到重要作用。亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因已被证实与高血压的发病存在关联[8]。目前，仅有少数国外研究[7]发现VDR基因多态性可能与高血压发病存在关联。本研究探讨汉族人群中VDR的2个多态性位点(FokI和ApaI)与高血压发病的关联，发现FokI位点多态性可能与高血压的发病发展存在关联。

维生素D不仅可调节血清钙水平，还参与机体抗氧化水平、减轻抗氧化水平、清除自由基以及保护神经元等反应[9-11]。因此，机体血清维生素D水平可能参与了高血压的发生、发展等过程。血清维生素D浓度与肾素-血管紧张素系统功能也有关，这提示维生素D可能对人体血压有一定的应用价值。多项研究[12-15]发现，高血压患者血清维生素D水平普遍低于健康人群。本研究亦发现高血压患者血清维生素D水平低于健康对照者，表明机体血清维生素D水平与高血压的发病风险存在关联，且高血压患者普遍存在缺乏维生素D的现象，这对高血压临床诊断具有一定的指导意义。

VDR作为一种配体激活转录因子，在机体多种组织中广泛表达，主要与维生素D形成复合物，后者与存在于靶基因序列上的反应元件(VDRE)结合形成反应物，从而改变靶基因mRNA的水平[16-18]。VDR可能通过调节维生素D生物学功能而间接影响高血压的发病，而VDR的表达受控于VDR基因多态性。VDR基因可表达在多种细胞中，其基因多态性直接影响维生素D与其受体结合的亲和性[16], 从而可能影响着高血压的发病、进展以及预后。Wang等[19]检测高血压患者VDR基因其他位点基因型的分布情况，发现VDR基因rs2544037位点与高血压的发病存在关联。本研究中，作者发现FokI位点的Ff可以显著增加个体高血压的发病风险，其变异基因型Ff、ff亦可显著增加高血压的发病风险，但未发现ApaI位点多态性与高血压的发病风险存在关联。在单倍型研究中，与fa单倍型相比, Fa单倍型在高血压患者中的分布显著低于健康对照组，可见FokI位点多态性在VDR基因变异中发挥着重要功能，且这种生物学功能在某种情况下发挥主导作用。