郑晓瑞，钟桂云，韦权堃

(江门职业技术学院 材料技术系，广东 江门 529090)

随着社会的不断发展和进步，化妆品逐渐成为了现代人生活中不可缺少的一部分。人们对于化妆品品质的要求也越来越高，开发有益于人体健康且兼顾美容保健作用的绿色化妆品具有广阔的市场前景。植物类化妆品具有良好的应用基础，在中国古代，人们利用植物的汁液来美容和滋润皮肤，通过果实或者枝叶的简单处理，就直接使用，但其有效成分不明确，效率低。现有的植物提取工艺多从植物的有效成分入手，进行有效成分的单体分离，导致提取成本上升，原料浪费，难以普及。其实，一种植物里面，有活性的成分是多种多样的，如果能将其提取出来并直接使用，对于化妆品行业来说，既提高了效率，又降低了提取成本。

陈皮为芸香科植物橘及其栽培变种的干燥成熟果皮，含有丰富的黄酮物质，具有多种生物活性[1-2]，黄酮类物质作为一种护肤因子，具有抗氧化、防衰老、美白防晒、抗辐射、保湿以及抑菌等功效。目前国内对陈皮的研究主要集中其在药理方面的应用，比如抗肿瘤、抗过敏、抗炎和抗氧化等作用[3-5],而对陈皮美容功效的文献报道较少。

因此，本文研究了陈皮提取物的紫外吸收性能，并采DPPH自由基清除实验考察陈皮提取物的防晒、抗氧化等功效，以期为陈皮资源在化妆品的研发和应用上提供一定的参考。

1 实验部分

1.1 主要试剂与仪器

陈皮购买于江门市国大药房，粉碎后备用。乙醇、丙二醇，均为分析纯，国药试剂公司。DPPH(1、1-二苯基-2-苦基肼自由基，Sigma-Fluka公司产品)，YP202电子天平(上海精密科学仪器有限公司)，U-4100型紫外-可见分光光谱仪(UV-Vis)，日本HITACHI公司；KQ-100DB型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。

1.2 实验过程

1.2.1 防晒能力评价方法

利用紫外可见分光光度计，测定陈皮提取液的紫外吸收光谱，然后分别计算陈皮提取液在UV，UVB和UVA的平均吸光度值，评价其紫外线吸收能力即防晒能力[6-7]。

1.2.2 陈皮防晒成分的提取工艺

在实验中，以陈皮提取物对紫外光谱吸收度作为评定标准，依次考察各因素对超声波提取工艺的影响。

1.2.2.1 萃取剂与吸光度的关系

准确称取陈皮样品90、120、150、180mg各两组，在第一组和第二组中分别加入丙二醇和75%乙醇2种不同的溶剂各20mL，浸润后在30℃超声波提取20min过滤，滤液在4000r/min下离心15min，取2mL上清液，测其在200～400nm之间的紫外吸收光谱，并计算其UVC，UVB和UVA的平均吸光度值。

1.2.2.2 料液比对吸光度值的影响

精确称取样品8份，每份为90、110、150、220、280、320、380、390mg分别加入丙二醇各20mL，浸润后在30℃，超声波提取20min过滤，滤液在4000r/min下离心15min，取2mL上清液，紫外吸收光谱测定同上。

1.2.2.3 超声时间对吸光度值的影响

精确称取样品6份，每份为320mg，分别加入丙二醇20mL，浸润后在30℃超声波提取，提取时间分别为20min、40min、60min、80min、100min、120min过滤，滤液在4000r/min下离心15min，取2mL上清液，紫外吸收光谱测定同上。

1.2.3 陈皮提取液对DPPH自由基的清除实验

1.2.3.1 DPPH溶液的配置

准确称取DPPH试剂40mg，用75%乙醇溶解，转入250mL容量瓶中，用75%乙醇定容，摇匀，得质量浓度160mg/L的DPPH溶液，避光置于冰箱中冷藏备用[8]。

1.2.3.2 样品溶液的配置

陈皮提取液旋转蒸发浓缩至干，准确称取陈皮提取物40mg，用75%乙醇溶解，转入100mL的容量瓶中，用75%乙醇定容，摇匀，得质量浓度为400mg/L的样品溶液，置于冰箱中冷藏备用。

1.2.3.3 清除DPPH自由基能力的测定

准确量取1.6mL DPPH溶液，加入2.4mL75%乙醇，混匀，在λ=517nm测吸光度作为Ac值。分别准确量取各样品溶液0.6、1.0、1.2、1.4，加入1.6mLDPPH液及1.8%、1.4%、1.2%、1.075%乙醇混合均匀，并将试管避光置于冰水浴中，避光反应30min后，在λ=517nm测吸光度作为Ai。另外准确称量各样品溶液0.6、1.0、1.2、1.4mL，加入75%乙醇，使每只试管体积4mL, 在λ=517nm测吸光度作为Aj。

按下式计算自由基清除率K值。

K=1-(Ai-Aj)/Ac

2 结果与讨论

2.1 陈皮防晒成分最佳提取工艺

在实验中，以陈皮提取物对紫外光谱吸收度作为评定标准，依次考察各因素对超声波提取工艺的影响，结果如下。

2.1.1 溶剂种类

以陈皮黄酮提取液对紫外光谱吸收度作为评定标准，溶剂种类对超声波提取工艺的影响见图1。由图1可知，乙醇依然是比较好的提取溶剂，但是在高浓度，以丙二醇作为提取液，提取效果要优于乙醇。

图1 溶剂对提取液防晒活性的影响Fig.1 The UV absorption valuespectra ofleaves of dried orange samples

2.1.2 料液比

料液比对超声波提取工艺的影响见图2。

由图2可知，随着料液比的增加，陈皮提取物的防晒活性也在增加，在0.0900∶20～0.3200∶20(g/mL)时，达到最大值。但是随着料液比的继续增加，陈皮提取物的防晒活性反而减少。原因可能是，原料一定的情况下防晒成分溶出率一定，料液比过大时，陈皮没有得到充分浸提，另外过分增加提取溶剂丙二醇的体积，也为后续的回收工作带来负担。因此，最佳的料液比为0.3200∶20(g/mL)。

图2 料液比对提取液防晒活性影响Fig.2 The effect on the sunscreen activity of different solid-liquid ratio

2.1.3 提取时间

提取时间对超声波提取工艺的影响见表1。

表1 超声提取时间对陈皮黄酮提取液的防晒活性的影响Table 1 The effect on the sunscreen activity of different time

由表1可知，当提取时间在20～80min时，陈皮提取物的防晒活性，随着提取时间的延长而增加，80min后，提取率不再增加。这是因为超声条件下提取时间过长，有可能会导致陈皮中防晒成分受到一定的损失，因此，确定最佳的提取时间是80min。

2.2 陈皮提取液对DPPH自由基的清除实验

不同浓度陈皮提取物对DPPH自由基清除能力见图3。

图3 陈皮提取物对DPPH自由基的清除率Fig.3 Scavenging effect of dried orange extract on DPPH radical

结果显示，陈皮提取物具有清除DPPH自由基的能力，随着陈皮提取物浓度的增加，对DPPH自由基的清除率能力有逐步增强的趋势，说明陈皮提取物对DPPH自由基的清除能力与其浓度存在明显的剂量效应关系。

3 结论

通过紫外吸收光度的测定、清除DPPH自由基实验，证实了陈皮提取液具有广谱的紫外吸收能力、对DPPH自由基有很好的清除作用。同时找出陈皮用丙二醇提取时间最短且效果最好的提取方法：在室温，料液比0.3200∶20(g/mL)，超声波提取80min的条件下效率最高。综上所述，陈皮提取液具有多种美容功效，有望作为一种全新的中草药活性添加剂应用到化妆品中。