孙晓伟

角膜碱烧伤引发的炎症是导致角膜新生血管化的重要原因, 角膜组织内的坏死物质能够趋化巨噬细胞等免疫细胞浸润, 浸润的炎症细胞释放多种细胞因子, 进一步加重组织的溶解坏死, 发生溃疡甚至穿孔, 并能引起角膜新生血管发育［1,2］。新生血管化的角膜混浊不但会严重影响视力, 而且会破坏角膜免疫赦免的属性。目前对于角膜碱烧伤治疗最简便有效的手段还是应用激素类抗炎药物, 然而激素的应用具有加速角膜溶解穿孔、诱发青光眼的风险, 因此寻找毒副作用低、疗效好、应用方便的药物是目前该领域研究的有益方向。

1 资料与方法

1.1 动物和实验试剂 C57BL/6小鼠, 6～8周, 平均体重为(20±2)g, 来源于济南朋悦实验动物中心。阿魏酸标准品(美国Sigma公司)；磷酸盐缓冲液；兔抗小鼠CD68单克隆一抗(美国Abcam公司)；山羊抗小鼠CD31单克隆一抗(美国Abcam公司)；驴抗兔488荧光二抗；驴抗山羊555荧光二抗；盐酸丙美卡因滴眼液(苏州工业园区天龙制药有限公司)；妥布霉素眼膏(西班牙ALCON CUSI, S.A)；三溴乙醇(日本TCI)；阿佛丁溶剂叔戊醇(美国Sigma公司)。

1.2 方法

1.2.1 实验分组 6～8周健康小鼠24只, 随机分为PBS对照组和FA治疗组, 每组12只。所有小鼠饲养和使用均遵从美国眼科与视觉科学协会的眼科实验研究动物管理条例［3］。

1.2.2 小鼠角膜碱烧伤模型制作 小鼠腹腔注射1.2%阿佛丁麻醉, 用量为200 μl/10 g, 盐酸丙美卡因滴眼液点眼行表面麻醉。将直径2 mm的滤纸片置于装有0.5 mol/L 氢氧化钠的小培养皿中充分浸泡, 用镊子夹取滤纸覆盖在角……