APP下载

多鳞对饲料中n-3高不饱和脂肪酸需要量的研究

2018-11-16何昊伦董晓慧谭北平杨奇慧迟淑艳刘泓宇杨原志张海涛

动物营养学报 2018年11期
关键词:脂肪酸肝脏饲料

何昊伦 董晓慧* 谭北平 杨奇慧 迟淑艳 刘泓宇 章 双 杨原志 张海涛

(1.广东海洋大学水产学院,水产动物营养与饲料实验室,湛江 524088;2.农业部华南水产与畜禽饲料重点实验室,湛江 524000)

高不饱和脂肪酸(highly unsaturated fatty acids,HUFAs)是指碳原子数目≥20且双键数目≥3的一类不饱和脂肪酸。根据甲基端第1个双键所连碳原子的位置,可将高不饱和脂肪酸分为n-3、n-6等系列,其中n-3HUFA主要包括二十碳五烯酸(EPA)、二十二碳六烯酸(DHA)。n-3HUFA的生理功能主要包括:1)抑制促炎症因子产生,抑制炎症反应,减轻疾病症状;2)视网膜的重要结构成分,对视力发育有促进作用;3)作为细胞膜的重要组成成分,可影响甚至决定细胞膜的功能,同时可影响细胞膜的流动性,对细胞之间的信号传递起到重大的作用等[2-4]。在海水鱼中,EPA、DHA是类花生酸等高活性旁分泌激素类的前体[5],参与生理功能的调控。已有的报道证明,多数淡水鱼具有合成EPA和DHA的能力,饲料中只需补充其合成原料亚麻酸即可满足其对n-3HUFA的需要[6]。对于缺乏脂肪酸延长和去饱和能力的海水鱼而言,n-3HUFA则是其必需脂肪酸[6]。饲料中添加n-3HUFA能提高海水鱼的生长性能,有利于脂类代谢平衡,加强机体免疫功能[7-10]。

1 材料与方法

1.1 试验设计与饲料配制

以鱼粉、小麦谷朊粉等为蛋白质源,鱼油和玉米油为脂肪源,调整饲料中玉米油和鱼油的含量,配制n-3HUFA水平分别为0.53%、0.80%、1.22%、1.62%、2.12%和2.56%的6组等氮等能饲料,试验饲料组成及营养水平见表1,试验饲料脂肪酸组成见表2。饲料原料粉碎后过60目筛,根据饲料配方称取各原料。饲料制作过程中,微量成分采用逐级扩大法混合均匀,再添加不同含量的鱼油和玉米油并搅拌均匀,然后添加30%~40%的水制成团状,用双螺杆挤条机制成粒径为1.5 mm的饲料,在阴凉干燥环境中风干后封口带密封,-20 ℃保存。

表1 试验饲料组成及营养水平(风干基础)

续表1项目Itemsn-3HUFA水平 n-3HUFA level/%0.530.801.221.622.122.56磷酸二氢钙 Ca(H2PO4)21.001.001.001.001.001.00诱食剂 Attractant0.100.100.100.100.100.10乙氧基喹啉 Ethoxy quinolone0.030.030.030.030.030.03微晶纤维素 Microcrystalline cellulose7.577.577.577.577.577.57合计 Total100.00100.00100.00100.00100.00100.00营养水平 Nutrient levels水分 Moisture8.458.148.258.868.118.44粗蛋白质 CP46.4146.0947.1946.4446.9347.22粗脂肪 EE9.449.679.329.229.779.71粗灰分 Ash7.977.607.617.617.567.52总磷 TP1.211.191.161.221.241.17

1)维生素预混料为每千克饲料提供 The vitamin premix provided the following per kg of diets:VA 22 500 IU,VD36 000 IU,VE 200 mg,VK340 mg,VB130 mg,VB245 mg,VB635 mg,VB120.25 mg,泛酸钙 calcium pantothenate 150 mg,烟酸 nicotinic acid 225 mg,叶酸 folic acid 12.5 g,生物素 biotin 0. 5 mg,肌醇 inositol 500 mg。2)矿物质预混料为每千克饲料提供 The mineral premix provided the following per kg of diets:Fe 60 mg,Zn 24 mg,Mn 16 mg,Cu 1.4 mg,Co 0.2 mg,Se 0.1 mg,I 0.2 mg。

表2 试验饲料脂肪酸组成(占总脂肪酸的百分比)

1.2 试验动物与饲养管理

1.3 样本采集及分析

1.3.1 样品采集

养殖试验结束禁食24 h后取样。每桶鱼用丁香酚麻醉后称重,计数,计算生长指标。每桶随机选5尾鱼量取体长、称体重、肝脏重,计算形态学指标。再取5尾鱼,吸干体表水分,编号于-20 ℃冰箱中保存,备测常规成分。另取10尾鱼心脏采血,血液置于1.5 mL离心管中于-20 ℃冰箱过夜后4 000 r/min离心10 min,取上清液置于-80 ℃备用,待测血清生化指标。剖取肝脏及肌肉,液氮冷存,然后转移至-80 ℃冰箱,备测肝脏酶活性及肝脏和肌肉脂肪酸含量。

1.3.2 常规成分分析

全鱼和饲料常规成分采用国际标准方法[12]进行分析。样品在105 ℃下烘干测定水分含量,凯氏定氮仪(KjeltecTM 8400,瑞典)测定样品中粗蛋白质含量,索氏抽提法(抽提剂为石油醚)测定样品中粗脂肪含量,550 ℃马弗炉灼烧法测定样品中粗灰分含量。

1.3.3 脂肪酸含量分析测定

根据GB/T 21514—2008进行脂肪酸含量的测定,原理为用氢氧化钠-甲醇溶液皂化,皂化物与三氟化硼-甲醇溶液反应生成脂肪酸甲酯。用毛细管气相色谱分离,色谱峰用已知组成的标准品进行鉴定,以内标法定量。

1.3.4 血清生化指标测定

使用全自动生化分析仪(日立7600-110型)测定血清中甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、总胆固醇(T-CHOL)含量及谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性,所需试剂盒均购自南京威特曼生物科技有限公司。

1.3.5 组织酶活性测定

肝脏中的过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)活性均使用南京建成生物工程研究所提供的试剂盒测定,测定步骤按试剂盒说明书进行。

1.4 生长指标和形态学指标计算公式

增重率(weight gain rate, WGR, %)=[(末均重-初均重)/初均重]×100;特定生长率(specific growth rate, SGR, %/d)=[(ln末均重-ln初均重)/饲养天数]×100;饲料系数(feed conversion rate, FCR)=摄食饲料干重/(末均重-初均重);成活率(survival rate, SR, %)=试验结束时鱼尾数/试验开始时鱼尾数;肝体比(hepatosomatic index, HSI, %)=(肝脏重量/鱼体重)×100;肥满度(condition factor, CF, g/cm3)=[末重(g)/体长3(cm)]×100。

1.5 数据统计

试验数据用平均值±标准差表示,采用SPSS 20.0对试验数据进行单因素方差分析(one-way ANOVA),若有显著性差异则进行Duncan氏法多重比较,P<0.05表示差异显著。

2 结 果

2.1 饲料n-3HUFA水平对多鳞生长性能和形态学指标的影响

由表3可见,WGR随着饲料n-3HUFA水平增加呈现先上升后下降趋势,2.12%组最高,显著高于0.53%组和0.80%组(P<0.05),与其他各组差异不显著(P>0.05)。SGR随着饲料n-3HUFA水平增加呈现先上升后下降的趋势,2.12%组最高,显著高于0.53%组和2.56%组(P<0.05),与其他各组差异不显著(P>0.05)。FCR随着n-3HUFA水平的增加呈现先下降后上升的趋势,2.12%组最低,显著低于0.53%组(P<0.05),与其他各组差异不显著(P>0.05)。各组之间SR没有显著差异(P>0.05)。随着饲料n-3HUFA水平的增加,HSI呈现出先下降后稳定的趋势,在2.12%组达到最低值,显著低于0.53%组和0.80%组(P<0.05),与其他各组无显著差异(P>0.05);而CF则呈现出先上升后下降的趋势,在2.12%组达到最大值,显著高于除1.62%组外的其他各组(P<0.05)。

表3 饲料n-3HUFA水平对多鳞生长性能和形态学指标的影响

同行数据肩标不同小写字母表示差异显著(P<0.05)。下表同。In the same row, values with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05). The same as below.

图1 饲料n-3HUFA水平与多鳞WGR的折线模型

2.2 饲料n-3HUFA水平对多鳞体成分的影响

由表4可见,各组之间全鱼水分、粗蛋白质、粗灰分含量无显著差异(P>0.05)。随着饲料n-3HUFA水平的增加,全鱼粗脂肪含量呈现先上升后下降的趋势,1.62%组和2.12%组之间全鱼粗脂肪含量无显著差异(P>0.05),但显著高于其他各组(P<0.05),其他各组之间无显著差异(P>0.05)。

2.3 饲料n-3HUFA水平对多鳞血清生化指标的影响

由表5可见,饲料HUFA水平在0.53%~1.62%之间时,血清HDL-C含量显著上升(P<0.05),2.56%组血清HDL-C含量显著高于除2.12%组外的其他各组(P<0.05)。血清LDL-C含量则是先上升后逐渐下降,在0.80%组达到最大值并显著高于其他各组(P<0.05)。血清ALT、AST活性呈现出先下降后上升再下降的趋势,血清ALT活性在1.22%组达到最低值并显著低于其他各组(P<0.05),血清AST活性则在0.80%组达到最低值并显著低于其他各组(P<0.05)。随着饲料n-3HUFA水平的增加,血清T-CHOL含量呈先上升后下降并稳定的趋势,血清TG含量呈先上升后下降的趋势;0.53%组的血清T-CHOL、TG含量显著低于其他各组(P<0.05),0.80%组的血清T-CHOL、TG含量显著高于其他各组(P<0.05)。

2.4 饲料n-3HUFA水平对多鳞肝脏酶活性的影响

由表6可见,各组之间的血清SOD和ACP活性没有显著差异(P>0.05)。2.12%组和2.56%组之间的血清AKP活性无显著差异(P>0.05),但显著低于除1.62%组外的其他各组(P<0.05)。1.62%组的血清CAT活性最低,与1.22%组和2.12%组无显著差异(P>0.05),但显著低于其他各组(P<0.05)。

2.5 饲料n-3HUFA水平对多鳞肝脏、肌肉脂肪酸组成的影响

由表8可见,随着饲料n-3HUFA水平的提高,肌肉C18∶2n-6、C20∶4n-6含量呈降低趋势,2.12%组和2.56组显著低于其他各组(P<0.05);肌肉C20∶5n-3、C22∶6n-3含量呈升高趋势,2.56%组显著高于其他各组(P<0.05);肌肉C16∶0含量呈先升高后稳定趋势,在1.22%组达到最高。肌肉C16∶1n-9含量在1.62%组达到最高。

表4 饲料n-3HUFA水平对多鳞体成分的影响

Table 4 Effects of dietary n-3HUFA level on body composition of Sillago sihama %

表4 饲料n-3HUFA水平对多鳞体成分的影响

项目 Itemsn-3HUFA水平 n-3HUFA level/%0.530.801.221.622.122.56水分 Moisture53.50±2.1257.50±4.9553.33±2.3158.50±0.7158.50±0.7154.00±1.11粗蛋白质 CP69.41±1.2168.40±2.9569.96±1.4267.56±1.2467.41±0.8370.57±2.36粗脂肪 EE17.16±1.82b16.73±0.71b17.52±1.40b21.34±0.83a20.50±0.39a16.27±0.69b粗灰分 Ash20.93±1.0619.01±2.1619.75±0.7320.76±0.5620.22±1.2021.61±0.95

表5 饲料n-3HUFA水平对多鳞血清生化指标的影响

Table 5 Effects of dietary n-3HUFA level on serum biological parameters of Sillago sihama

表5 饲料n-3HUFA水平对多鳞血清生化指标的影响

项目 Itemsn-3HUFA水平 n-3HUFA level/%0.530.801.221.622.122.56高密度脂蛋白胆固醇HDL-C/(mmol/L)2.10±0.05e2.33±0.08d 2.59±0.05c2.76±0.06b2.80±0.02ab2.91±0.05a低密度脂蛋白胆固醇LDL-C/(mmol/L)1.76±0.08d4.25±0.13a3.35±0.18b3.30±0.06b3.24±0.08b2.87±0.06c谷丙转氨酶ALT/(U/L)61.54±0.85a47.04±1.12c34.93±0.91e41.98±0.86d49.94±0.21b47.08±1.15c谷草转氨酶AST/(U/L)228.05±3.61a148.60±3.08d187.06±0.40c191.26±0.51c204.20±1.14b188.67±2.89c总胆固醇T-CHOL/(mmol/L)4.83±0.21c7.96±0.09a6.58±0.36b6.67±0.11b6.98±0.05b6.92±0.06b甘油三酯 TG/(mmol/L)3.75±0.13e8.55±0.26a6.90±0.02c7.06±0.08bc7.30±0.13b6.28±0.05d

表6 饲料n-3HUFA水平对多鳞肝脏酶活性的影响

Table 6 Effects of dietary n-3HUFA level on liver enzyme activities of Sillago sihama

表6 饲料n-3HUFA水平对多鳞肝脏酶活性的影响

项目 Itemsn-3HUFA水平 n-3HUFA level/%0.530.801.221.622.122.56超氧化物歧化酶 SOD/(U/mg prot)2.70±0.513.08±0.382.83±0.493.13±0.052.56±0.112.40±0.18酸性磷酸酶 ACP/(金氏单位/g prot)18.82±2.3220.39±1.5222.01±4.9018.90±2.4917.81±2.8318.68±2.26碱性磷酸酶 AKP/(金氏单位/g prot)38.72±6.99ab39.87±4.62ab43.51±4.14a30.01±0.10bc21.43±3.13c23.70±4.13c过氧化氢酶 CAT/(U/mg prot)22.06±1.87b37.06±1.99a16.15±5.80bc7.01±0.84c14.76±1.45bc23.72±9.19b

3 讨 论

3.1 饲料n-3HUFA水平对多鳞生长性能和形态学指标的影响

表7 饲料n-3HUFA水平对多鳞肝脏脂肪酸组成的影响(占总脂肪酸的百分比)

Table 7 Effects of dietary n-3HUFA level on liver fatty acid composition ofSillago sihama (percentage of total fatty acids) %

表7 饲料n-3HUFA水平对多鳞肝脏脂肪酸组成的影响(占总脂肪酸的百分比)

脂肪酸Fatty acidsn-3HUFA水平 n-3HUFA level/%0.530.801.221.622.122.56C14∶02.90±0.042.90±0.012.89±0.012.90±0.032.90±0.002.92±0.01C16∶023.88±0.1923.72±0.0723.78±0.1323.86±0.0923.88±0.0923.85±0.06C16∶1n-98.86±0.128.52±0.048.75±0.088.83±0.078.83±0.168.67±0.30C18∶07.32±0.13b7.31±0.04b7.44±0.08ab7.40±0.06ab7.55±0.11a7.46±0.07abC18∶1n-930.92±0.06a27.49±0.54b25.84±0.71c24.93±0.34c22.63±1.01d22.13±0.36dC18∶2n-611.65±0.07a10.71±0.06b9.93±0.06c9.18±0.09d8.20±0.06e7.49±0.11fC18∶3n-31.25±0.06f1.43±0.03e1.54±0.03d1.66±0.03c1.77±0.02b1.86±0.03aC20∶00.45±0.060.43±0.030.46±0.020.44±0.030.47±0.010.45±0.03C20∶1n-60.70±0.020.73±0.010.71±0.010.69±0.020.73±0.030.74±0.03C20∶2n-60.68±0.04a0.65±0.04ab0.61±0.01bc0.58±0.01bc0.58±0.01c0.61±0.02bcC20∶3n-60.42±0.040.44±0.030.39±0.010.43±0.020.44±0.010.42±0.02C20∶4n-60.88±0.04e1.13±0.06d1.82±0.04c2.32±0.04b2.79±0.13a2.41±0.04bC22∶00.14±0.010.14±0.010.15±0.010.13±0.010.15±0.010.14±0.01C22∶1n-90.13±0.010.14±0.010.12±0.010.12±0.010.13±0.020.13±0.01C20∶5n-31.25±0.06f1.43±0.03e1.54±0.03d1.66±0.03c1.77±0.02b1.86±0.03aC22∶6n-33.92±0.09f5.91±0.04e6.80±0.06d8.52±0.06c9.92±0.06b10.94±0.25a

表8 饲料n-3HUFA水平对多鳞肌肉脂肪酸组成的影响(%总脂肪酸)

Table 8 Effects of dietary n-3HUFA level on muscle fatty acid composition of Sillago sihama (%TFA)

表8 饲料n-3HUFA水平对多鳞肌肉脂肪酸组成的影响(%总脂肪酸)

脂肪酸Fatty acidsn-3HUFA水平 n-3HUFA level/%0.530.81.221.622.122.56C14∶03.41±0.023.25±0.133.32±0.103.44±0.083.48±0.093.30±0.11C16∶024.92±0.05ab24.39±0.40b25.25±0.17a24.60±0.38ab25.00±0.16ab24.75±0.23abC16∶1n-94.30±0.14ab4.01±0.18b4.22±0.11ab4.43±0.08a4.28±0.13ab4.15±0.11abC18∶011.10±0.0810.81±0.3310.98±0.1910.88±0.1311.03±0.0810.99±0.21C18∶1n-914.69±0.0414.50±0.2514.65±0.1314.39±0.1914.56±0.1614.60±0.12C18∶2n-68.85±0.07a9.00±0.14a8.20±0.14b7.25±0.21c6.60±0.14d5.10±0.28eC18∶3n-30.85±0.070.95±0.211.05±0.211.20±0.141.10±0.141.15±0.07C20∶00.54±0.020.53±0.020.54±0.010.53±0.010.56±0.020.55±0.03C20∶1n-60.57±0.010.56±0.010.56±0.010.57±0.010.57±0.010.56±0.01C20∶2n-60.36±0.010.37±0.010.35±0.010.36±0.020.37±0.020.37±0.01C20∶3n-60.46±0.020.45±0.020.45±0.010.46±0.010.47±0.010.47±0.02C20∶4n-64.42±0.07a3.76±0.16b3.13±0.06c2.43±0.06cd1.83±0.08f2.10±0.06eC22∶00.26±0.010.27±0.010.27±0.020.25±0.010.26±0.020.26±0.01C20∶5n-37.81±0.09d8.51±0.09c8.75±0.19c9.28±0.05b9.52±0.10b9.95±0.09aC22∶6n-312.52±0.04d14.14±0.94c14.35±1.08c15.86±0.26b16.93±0.08b18.42±0.07a

3.2 饲料n-3HUFA水平对多鳞体成分的影响

3.3 饲料n-3HUFA水平对多鳞血清生化指标的影响

3.4 饲料n-3HUFA水平对多鳞肝脏酶活性的影响

3.5 饲料n-3HUFA水平对多鳞肝脏、肌肉脂肪酸含量的影响

4 结 论

猜你喜欢

脂肪酸肝脏饲料
七种行为伤肝脏
四种青贮法 饲料新鲜又适口
肝脏里的胆管癌
粤海饲料
羊饲料的营养成分及配制
揭开反式脂肪酸的真面目
加州鲈肝脏养护
揭开反式脂肪酸的真面目
IL-17A促进肝部分切除后IL-6表达和肝脏再生
饲料Ⅱ个股表现