洪颖 段勇 徐秋月

doi：10.3969/j .issn.1007 -614x.2018.5.1

摘要 本文介绍环介导等温扩增技术（LAMP）原理、特点及应用前景。因LAMP具有特异性高、灵敏度高、易操作、污染风险低的特点，因而目前在传染病、真菌、细菌，检测领域中作为诊断工具得到了认可。

关键词 环介导等温扩增技术；研究；应用

环介导等温扩增技术（LAMP）是在20世纪90年代核酸扩增技术研究及应用基础上，逐渐提出并广泛应用的一种新的技术方式，它在实际应用中能够根据靶基因6个不同区域进行4种特异引物设计，并通过恒温环境以链置换DNA聚合酶为反应条件，实现核酸扩增反应。在反应过程中，该技术不需要进行长时间温度循环以及紫外观察、模板热变性等较为繁琐的反应过程，具有简单、快捷以及特异性突出等技术特点，在生命科学研究以及相关领域中具有较广泛的应用价值[1]。

环介导等温扩增技术及其原理分析

LAMP在进行DNA扩增过程中，主要通过进行4种不同特异性引物设计，实现靶基因的6个特定区域识别，同时在恒温条件下完成扩增反应[2]。值得注意的是，环介导等温扩增技术在进行DNA扩增过程中能够将基因扩增与产物检测同步实现，并且扩增反应的效率较高，一般15～ 60 min左右就能够实现109～1 010倍基因扩增，并且该技术的特异性比较突出，对于靶基因序列的检测，能够只利用有无扩增产物进行判断与识别，具有较为突出的技术特征与优势。

引物的设计：环介导等温扩增技术在扩增反应应用中，其引物设计主要是结合靶基因3端Flc、F2c、F3c区以及5端Bl、B2、B3区共6个不同区域进行4种特异性引物设计，即FIP、F3、BIP、B3共4种特异性引物例。……