真菌毒素胶体金检测试剂条质量研究
2018-11-02,,,,,,*
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(1.郑州中道生物技术有限公司,河南 郑州 450000; 2.河南省动物疫病预防控制中心,河南 郑州 450000)
0 引言
真菌毒素是真菌在生产繁殖过程中产生的次生有毒代谢产物,人或牲畜使用了被产毒真菌及其毒素污染的食品或饲料可引起中毒及某些慢性疾病,具有强烈的致畸性、致癌性、致突变性[1]。在GB 2761-2011《食品安全国家标准 食品中真菌毒素限量》中规定,黄曲霉毒素B1(AFB1)在玉米糁中限量值为20 μg/kg、大米中限量值为10 μg/kg,饲料原料中的最低限量值为10~50 μg/kg,饲料制品的最低限量值为10~30 μg/kg[2-3]。免疫胶体金法较实验室高效液相色谱法(HPLC),具有操作简单,快速,费用低廉的特点,且作为真菌毒素现场快速检测得到了国家食品药品监督管理局(现国家市场监督管理总局)的认可[4]。而对其性能指标的验证对该试剂条的临床实践的应用至关重要。
1 材料与方法
1.1 试验材料
黄曲霉素B1(AFB1)单克隆抗体、AFB1-牛血清白蛋白(BSA)、山羊抗小鼠IgG购自洛阳佰奥通生物技术有限公司,AFB1[GBW(E)100302]标准品购自国家标准物质中心,阴性盲样:实验室高效液相色谱法(HPLC)确定的不含AFB1的玉米糁空白样本50份,及0.5倍检出水平的阴性样本50份;阳性盲样:实验室HPLC法确证玉米糁加标至1倍检出水平和2倍检出水平的阳性样本各50份。
1.2 方法
1.2.1 真菌毒素免疫胶体金层析法试剂条的制备
通过将胶体金标记的单克隆抗体(以下简称金标抗体)喷在玻璃纤维上制成结合垫,将完全抗原和山羊抗小鼠IgG包被于NC膜上,分别作为T线和C线。按照图1,组成胶体金试剂条。

1样品垫;2结合垫;3NC膜;4吸水垫;5PVC底板图1 试纸条侧面结构示意图……p>
