回医烙灸疗法对脊髓损伤大鼠Notch信号通路中Presenilin1、Hes1蛋白表达的影响
2018-11-02夏铂,范灵
夏 铂,范 灵
(宁夏医科大学,银川 750004)
脊髓损伤是一种临床上比较严重的损伤性疾病,目前并没有特别有效的治疗手段,仅停留在对症治疗。回医烙灸疗法是一种治疗脊髓损伤的新方法,在临床上已经取得一定疗效。本实验取损伤脊髓组织,应用免疫组化法检测大鼠脊髓组织中Notch信号通路中Presenilin1、Hes1蛋白表达,旨在从分子生物学角度探讨回医烙灸疗法对不同介入时间大鼠脊髓损伤后神经修复功能的影响。
1 材料和方法
1.1 材料 实验在宁夏医科大学实验动物中心完成,选取清洁级SD大鼠75只(宁夏医科大学实验动物中心提供,12周龄,体质量230~305 g,雄性)。
1.2 方法
1.2.1 分组 选取清洁级SD大鼠75只,随机数字表法分为5组:A 组(假手术组)、 B 组(模型组)、C 组(西药组)、D组(2 h烙灸组)、E组(6 h烙灸组),于第1、7、14、28 d每组各取3只损伤脊髓组织,共取60只,15只备用,免疫组化法检测大鼠脊髓组织中Presenilin1、Hes1蛋白表达。A 组(假手术组),只做椎板切除,不做脊髓损伤;B 组(模型组),脊髓Allen’s打击损伤后灌胃给予一定量生理盐水,持续28 d;C 组(西药组),脊髓Allen’s打击损伤后0.5 h内首次按20 mg/kg醋酸泼尼松,随后按 4.6 mg/(kg·h)给药,3 h连续给药,之后按7.2 mg/(kg·d),连续给药7 d;D组(2 h烙灸组),脊髓Allen’s打击损伤后2 h采用烙灸治疗,烙灸隔日1次,1次5 min,持续28 d;E组(6 h烙灸组),脊髓Allen’s打击损伤后6 h采用烙灸治疗,烙灸隔日1次,持续28 d。各组于术后1 h经皮下注射4万u/kg庆大霉素,1次/d,连续7 d。各组均给予一定量生理盐水,持续28 d。
1.2.2 模型制备 改良的脊髓损伤Allen’s[1]造模。操作:大鼠麻醉、消毒,以T10为中心,沿脊柱方向切约3 cm的切口,切开皮肤、肌肉,分离并暴露棘突,将T10椎板全部切除,保留硬脊膜。……
