海风藤总黄酮抗氧化应激损伤作用研究
2018-10-26胡昱月
胡昱月
(河南省南阳市中心医院中药科,河南 南阳 473000)
心血管疾病发病率高,并发症多[1]。目前研究表明主要与血管内皮细胞功能紊乱有关[2]。血管内皮紊乱多与氧自由基引起的过氧化反应有关[3]。由于中药的多成分、多靶点的独特优势,研究热点多从植物中寻找天然的抗氧化活性物质。海风藤为胡椒科植物风藤Piper kadsura(Choisy)Ohwi的干燥藤茎,味辛、苦,性微温,具有祛风湿,通经络,止痹痛的功效[4]。现有研究表明海风藤具有抗氧化作用[5]。本研究采用过氧化氢诱导人脐静脉内皮细胞氧化应激损伤模型,探讨海风藤总黄酮的抗氧化作用及其作用机制,总结如下。
1 材 料
细胞。人脐静脉内皮细胞human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)购自中国典型培养物保藏中心(武汉)。
仪器。LT-CIX250FTCO2细胞培养箱[立德泰勀(上海)科学仪器有限公司],全自动酶标仪(上海拜格生物科技发展有限公司),MF53倒置荧光显微镜(广州市明美光电技术有限公司),高速离心机(湖南恒诺仪器设备有限公司)。
药物与试剂。海风藤购自张仲景大药房,干燥后,称取200.05g,95%乙醇80℃回流提取3次,每次2h,过滤,合并滤液,减压浓缩至干燥,所得粉末为海风藤总黄酮,得率为2.15%。MTT(武汉百浩天生物科技有限公司),超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)测试盒、丙二醛(malondialdehyde,MDA)测试盒、一氧化氮(nitric oxide,NO)测试盒(北京索莱宝科技有限公司)。内皮素1(Endothelin 1,ET-1)酶联免疫吸附试验(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)试剂盒、白细胞介素6(Interleukin6,IL-6)酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒、白细胞介素8(Interleukin8,IL-8)酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒(南京森贝伽生物科技有限公司)。
2 方 法
海风藤总黄酮对过氧化氢诱导的氧化应激损伤的保护作用。……
