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(1.信阳市羊山新区农业综合发展服务中心，河南 信阳 464000;2.信阳农林学院牧医工程学院，河南 信阳 464000)

0 引言

仔猪渗出性皮炎又称为“猪油皮病”或“仔猪油性皮脂溢”，多发生于5～6日龄哺乳仔猪及刚断奶的仔猪[1]。猪源葡萄球菌是引起该病的主要病原之一， 近年来，猪渗出性皮炎的危害虽然未达到严重暴发的程度，但由于各地区流行菌株对药物敏感性的差异，造成部分猪场防治效果不理想。本研究通过对河南南部地区某疑似发生仔猪渗出性皮炎猪场的病原菌进行分离鉴定、药物敏感性试验，为该场防治本病提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 病料采集

用10%甘油生理盐水浸润无菌棉签采集病猪皮肤流脓结痂处。

1.1.2 试剂

革兰氏染色液、Baird-parker 琼脂培养基、胰酪胨大豆肉汤、葡萄球菌属微量生化反应管TH-16S、革兰氏阳性菌药敏试纸盒(杭州滨和微生物试剂有限公司)、盐酸头孢噻呋注射液(湖南加农正和生物技术有限公司)、维尔康圣力斗包(阿莫西林可溶性粉)、 阿莫西林硫酸黏菌素注射液 (北京中农大动物保健品集团湘潭兽药厂)、注射用青霉素钠(上海公谊兽药厂)、注射用硫酸链霉素(华北制药集团动物保健品有限公司)、盐酸林可霉素注射液(江西双实药业有限公司)、盐酸卡那霉素注射液(浙江汇特动物药业有限公司)7种商品兽药。

1.2 方法

1.2.1 培养基的制备

按照商品培养基的说明进行制备。

1.2.2 细菌分离培养

将病料接种于已配制好的胰酪胨大豆肉汤，37℃恒温培养箱培养18～24 h，待试管肉汤变浑浊，将培养好的肉汤均匀接种于Baird-parker琼脂培养基，37℃恒温培养18～24 h。培养基表面菌落多为白色光滑隆起小菌落，约直径2 mm。用接种环挑取单菌落进行涂片观察。

1.2.3 形态学观察

挑取纯培养后的单菌落革兰氏染色，显微镜镜检，观察其形态学特征。

1.2.4 生理生化试验

分离纯化过的细菌进行尿素、蔗糖、精氨酸双水解酶、木糖、乳糖、甘糖、木醇、麦芽糖、蕈糖、甘醇、N-乙酰葡胺、硝酸盐、蜜二糖、果糖、葡磷胨水、山梨醇16项生化指标测定，并与TH-16S编码册对照记录结果。

1.2.5 药敏试验

药敏试验采用药敏纸片扩散法分别以标准药敏片苯唑西林、青霉素G、红霉素、大观霉素、克拉霉素、万古霉素、克林霉素、氯霉素、四环素、米诺环素、诺氟沙星、环丙沙星、左氟沙星、多粘菌素B、复方新诺明、呋喃妥因和自制商品兽药药敏片进行药敏试验，记录抑菌圈大小进行耐药性分析。

2 结果与分析

2.1 形态学结果

在1 000倍显微镜下观察分离菌形态呈圆形或卵圆形，葡萄串状排列，革兰氏染色为阳性菌， 初步诊断为表皮葡萄球菌，如图1。

图1 革兰氏染色后的葡萄球菌(1000x)

2.2 生理生化试验

将疑似菌株进行生化试验，具体如表1。

表1 葡萄球菌生理生化试验鉴定结果

鉴定值331320,检索葡萄球菌属细菌生化鉴定编码册确定鉴定结果为表皮葡萄球菌

2.3 药敏试验

2.3.1 标准药敏片药敏试验结果

表2 标准药敏片药敏试验结果

注：S表示敏感;I表示中敏;R表示耐药

16种抗生素药敏试验结果表明猪源葡萄球菌对苯唑西林、大观霉素、万古霉素、左氟沙星、呋喃妥因敏感，对诺氟沙星、环丙沙星中敏，对其他抗生素都产生了不同程度的耐药性。

2.3.2 自制商品兽药药敏片药敏试验结果

表3 自制商品兽药药敏片药敏试验结果

注：抑菌圈直径≧17mm为高敏S，在12～16mm内为中敏I，≦11mm为耐药R[2]

试验结果表明，分离菌对市场上常用兽药品种也部分产生了一定的耐药性。

3 讨论与结论

(1)从临床症状，剖检病理变化及实验室诊断结果，确定引起该场发生仔猪渗出性皮炎病的病原体为猪源表皮葡萄球菌。

(2)从药敏试验结果分析，分离菌对标准药敏片苯唑西林、大观霉素、万古霉素、左氟沙星、呋喃妥因敏感，对诺氟沙星、环丙沙星中敏，对其他抗生素都产生了不同程度的耐药性，同时对市场上在售的部分商品兽药品种也产生了一定的耐药性，这反应出临床上由于细菌的耐药性问题的存在，是造成猪场防治该病比较困难的原因之一。

(3)由于葡萄球菌是一种常在菌，广泛存在于自然界和猪体的表面，要彻底根除本病几乎不可能。为了控制本病的发生，首先要切断主要的传染源，对病猪不但要早发现、早隔离和及时治疗，而且对病猪污染的环境和用具进行彻底消毒，同时对与病猪有接触的猪要进行预防性治疗。当发现皮肤有损伤时，应及时用碘酊或酒精等消毒液进行处置，防止感染的发生。对圈舍及运动场地等也应经常清扫，保持清洁，定期消毒，尽量减少环境中残存的致病菌。为保证临床治疗效果，建议猪场按照药敏结果针对性用药，减少日常容易产生耐药性的不合理用药习惯，例如长期依赖某几种抗生素、不注意药物的配伍。