李万祯 殷 俊 李 萍 林晓辉 张国前 张书旭

据最新的癌症统计数据显示，肺癌的发病率在中国排在首位，在美国排在第二位，而死亡率在两国均排在首位[1-2]。放疗作为晚期肺癌的主要治疗方式，然而只有10%患者能达到完全缓解，5年生存率不到15%[3]，其中放射抗拒则是限制放疗疗效的关键因素[4]。因此，建立耐放射肿瘤细胞株，是研究放射抗拒机制的第一步。在X线下连续照射建立肿瘤放射抗拒细胞系，在乳腺癌[5]、喉癌[6]和鼻咽癌[7]等癌种已取得成功。目前肺癌放射抗拒的机制尚未明确，有几种分子机制被认为与其放射抗拒的形成有关，如DNA修复蛋白的改变、存活蛋白的失调、表皮生长因子受体(EGFR)的激活等[8]。microRNA(miRNA)是一类长度约为18～24个核苷酸的内源性非编码小分子单链RNA，参与调控细胞分化、生长、凋亡等功能[9]。miR-17-92基因簇位于人染色体13q31.3处，包括miR-17等6个成熟的miRNA，近年来被指通过调控几十种靶基因参与肿瘤的形成、转移和复发[10]。Jiang等[11]发现过表达miR-17-92水平明显提高了套细胞淋巴瘤Z138c细胞的放射抗拒性。但miR-17在肺癌放射抗拒机制的研究中鲜有报道。因此，本研究探索miR-17在肺癌放射抗拒中的作用，以期能成为非小细胞肺癌放射抗拒诊治的突破口。

1 材料与方法

1.1 主要仪器与试剂

直线加速器购自瑞典医科达公司Synergy；胎牛血清和培养基购自Gibco公司；CCK-8试剂盒购于日本同仁化学研究所；细胞周期试剂盒购于联科生物公司；RT-PCR试剂盒和细胞凋亡检测试剂盒购于美国Genecopoeia公司；miR-17引物和内参U6购自上海吉玛公司；……