MED19基因对体内胃癌细胞增殖抑制作用机制的探讨△
2018-10-24丁相福王婷婷许崴崴袁伟杰徐广甍魏士雄
丁相福,王婷婷,许崴崴,袁伟杰,徐广甍,魏士雄
吉林大学第二医院1甲状腺外科,2肿瘤血液科,3结直肠外科,长春130041
4长春市南关区医院综合外科,长春130000
5复旦大学上海医学院临床医学系,上海200433
中介体(mediator)最早发现于酵母菌中,是由多个蛋白质亚基组成的生物大分子复合物,属于RNA聚合酶Ⅱ通用转录装置的基本组分,在真核生物mRNA合成的活化和抑制中发挥关键作用[1]。酵母的中介体由25个亚基组成[2],其中21个亚基组成核心结构,包括头部、中部和尾部组件[3];4个亚基组成特别组件,对RNA聚合酶Ⅱ的活力进行调节。哺乳动物中介体的亚基组成及其相关活性已经确定,目前已鉴定30余种亚基,其中多数亚基与酵母的中介体亚基存在广泛的同源性[4-5]。
MED19是中介体中的一个亚单位,又称肺癌转移相关蛋白1(lung cancer metastasis related protein 1,LCMR1),最初从高转移肺癌中克隆得到,已被证实参与细胞信号由胞外向胞内转导。抑制MED19基因表达,可引起某些调节细胞生长、分化和凋亡的基因的表达发生改变,提示MED19可能参与细胞的周期调控、信号转导或转录调控[6]。本研究利用慢病毒介导的RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术在离体胃癌SGC-7901组织细胞中沉默MED19基因,旨在观察其影响胃癌组织细胞增殖和细胞周期的能力,从而对MED19基因在胃癌中的功能进行验证。
1 材料与方法
1.1 动物模型的建立及瘤体获得
1.1.1 动物模型建立选择分化程度差且转移能力强的SGC7901胃癌细胞株(购自上海吉凯基因科技有限公司),经复苏及传代后置入培养瓶中备用。将SGC7901胃癌细胞分为3组:空白对照组,正常培养的SGC7901胃癌细胞,不用病毒颗粒转染;……
