基于高效液相色谱法优化测定7种混合单糖的研究*
2018-10-19常青
福建轻纺 2018年10期
常青
(福建农林大学食品科学学院,福建 福州,350002)
目前测定单糖的方法主要有高效液相色谱法[1]、气相色谱法[2]、离子色谱法[3]和毛细管电泳法[4]等,其中高效液相色谱法为单糖分析的重要方法之一,因其操作简单,分离效果好,灵敏度高受到广大研究者的青睐。高效液相色谱法测定单糖的方法主要分为衍生法和非衍生法,衍生法又分为PMP柱前衍生法和柱后衍生法。无论是柱前衍生法还是柱后衍生法操作都比较复杂,柱前衍生容易带入杂质,产生误差,柱后衍生法的成本较高。郝桂堂等[5]采用荧光检测法和紫外检测法分析了9种单糖,发现几种单糖的分离度不好。段月等[6]采用柱前衍生法检测枸杞多糖中的单糖组成,虽能有效地分离出几种单糖,但其分离时间长。而非衍生法一般采用示差折光检测器结合糖分析柱进行分析,此法的优点在于无需衍生处理、操作简单和效率高,应用更广泛[7]。欧阳华学等[8]采用示差折光检测法同时检测了枸杞中3种单糖和2种低聚木糖,且加标回收率较高。
因此,本文采用非衍生法,通过示差折光检测器结合糖分析柱将7种不同的混合单糖进行分离,以期为分析多糖中单糖组分提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 试剂与仪器
1.1.1 试剂
葡萄糖、木糖、甘露糖、阿拉伯糖、核糖、果糖和半乳糖均为色谱纯购自sigma公司,超纯水(实验室超纯水机制备),乙腈(色谱纯)。
1.1.2 仪器
Waters e2695高效液相色谱仪:美国Waters公司;
Waters 2414示差折光检测器:美国Waters公司;
Q-Gard A2超纯水机:法国Mingche公司;……
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