HPLC法测定奥拉西坦胶囊中的有关物质

2018-10-18吴福鸿

石油化工应用 2018年9期

吴福鸿，李娟

（宁夏康亚药业股份有限公司，宁夏银川 750002）

奥拉西坦胶囊为奥拉西坦的胶囊剂，奥拉西坦是一种新的GABA的衍生物，是近几年来研制开发的新型促智药。该药对脑血管病、脑损伤、脑瘤（术后）、颅内感染、痴呆、脑变性疾病等引起的意识障碍、记忆和智能障碍、神经功能缺损等均有良好疗效[1]。

奥拉西坦有关物质测定方法多为高效液相色谱法，奥拉西坦酸为奥拉西坦的水解杂质，目前只有2014年发布的奥拉西坦以及奥拉西坦胶囊的征求意见稿中有该杂质的检测方法，本研究通过对方法的优化，建立了采用高效液相色谱法测定奥拉西坦酸的方法，该方法操作简便、灵敏、准确。

1 仪器与材料

高效液相色谱仪（Chromaster 5110输液泵、Chro master 5210自动进样器、Chromaster 5310柱温箱、Chromaster 5410紫外检测器，日本Hitachi公司），ABS-135电子天平（梅特勒-托利多）。

奥拉西坦对照品（批号101032-200901）购自中国食品药品检定研究院；奥拉西坦酸杂质对照品（批号2010-12-8）购自深圳市雅索科技有限公司；奥拉西坦胶囊（规格：400 mg，石药集团欧意药业有限公司，批号：000101201；宁夏康亚药业股份有限公司，批号20121207、20121208、20121209）；磷酸（色谱纯），购自天津大茂化学试剂厂；水为实验室二次纯蒸水。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以水（用磷酸调pH至3.6）为流动相，检测波长为210 nm，流速为1.0 mL/min，柱温为25℃。

2.2 溶液的制备

杂质对照品溶液：取奥拉西坦酸杂质对照品，精密称定，用水溶解稀释制成每1 mL中约含1 μg的溶液，作为杂质对照品溶液。

对照溶液及供试溶液：精密称取奥拉西坦胶囊适量，加水稀释制成每1 mL中约含奥拉西坦1 mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取供试品溶液适量，用水稀释制成每1 mL中约含奥拉西坦1 μg的溶液作为对照溶液。

2.3 专属性实验

精密称取奥拉西坦胶囊，进行高温、酸、碱、氧化以及光照破坏实验，并配制成1 mg/mL的溶液，作为供试品溶液。过滤，进样，记录色谱图。在上述色谱条件下，奥拉西坦在高温、酸、碱、氧化和光照破坏条件下所产生的降解产物与主峰均能达到基线分离，与各有关物质峰的分离度符合要求，说明该方法专属性良好。

2.4 检测限与定量限的确定

分别以3倍信噪比及10倍信噪比作为检测限和定量限，测得奥拉西坦酸杂质的检测限为5 ng/mL；定量限为20 ng/mL。

2.5 线性关系考察

取奥拉西坦酸杂质对照品，精密称定，加水溶解并稀释制成含杂质分别为 0.02 μg/mL、0.6 μg/mL、0.9 μg/mL、1.2 μg/mL、1.5 μg/mL、1.8 μg/mL、2.1 μg/mL的系列线性溶液。按照上述色谱条件，分别精密量取上述溶液20 μL，注入液相色谱仪，记录色谱图。以峰面积（A）对浓度（C）进行线性回归，得回归方程为A=22 501.624C-370.740 9，r=0.999 9，由实验结果可知，杂质Ⅲ在浓度范围 0.02 μg/mL～2.10 μg/mL 内呈良好的线性相关性。

2.6 精密度实验

精密称取奥拉西坦酸杂质对照品，置量瓶中，加水溶解并稀释制成每1 mL约含1 μg的溶液，按“2.1”项下色谱条件连续进样6次，记录峰面积，RSD为1.05%，表明精密度良好。

2.7 溶液稳定性实验

按“2.2”项制备杂质对照溶液和供试品溶液，于室温、避光条件下放置，在 0 h、2 h、4 h、6 h、8 h、10 h 和12 h，按“2.1”项色谱条件进样分析，记录峰面积。奥拉西坦酸杂质平均峰面积为23 636，RSD为1.91%。表明奥拉西坦胶囊有关物质检查配制溶液室温、避光放置12 h稳定性良好。