邵明辰，王友令

（1.山东鲁南牧工商有限公司，山东 滕州 277500；2.山东省农业科学院家禽研究所，山东 济南 250100）

鸡滑液囊支原体（MS）引起鸡滑液囊炎，该病是鸡的一种急性或慢性传染病，以侵害关节的滑液囊膜及腱鞘为主，引起关节渗出性滑膜炎、腱鞘炎及跗关节和脚垫肿胀等[1]，此外还会造成生长发育迟缓、胴体降级、产蛋下降等，并且与呼吸道疾病有关，给养鸡业造成巨大的经济损失。

蛋鸡滑液囊支原体主要表现病鸡进行性消瘦、瘸腿，死淘率增加,种鸡和蛋鸡感染导致产蛋下降，孵化率降低，并垂直传染给仔鸡，使仔鸡发病。本次通过对某商品蛋鸡养殖场的现场调查、临床剖检及实验室PCR诊断，确诊了一例商品蛋鸡患有滑液囊支原体感染的病例，并制定了药物治疗、饲养管理、消毒隔离等措施，该鸡群病情得到有效控制。2018年6月，山东德州平原某蛋鸡场约10000只18周龄鸡陆续出现消瘦、瘸腿、关节肿胀、脚垫肿胀和龙骨下化脓积液等症状，临床死淘率增加，发病鸡占总鸡群的15%左右。通过鸡群的临床症状，剖检变化并结合实验室诊断进行了详细的分析研究，最终确诊为蛋鸡滑液囊支原体感染，现将诊断结果汇报如下。

1 临床症状及剖检变化

发病鸡表现采食下降、消瘦、精神沉郁、食欲降低，以及跗关节和趾关节肿胀（见图1）、站立不稳等。剖检可见跗关节中有干酪样炎性物质 （图2），龙骨下有化脓性积液（图3），爪垫有粘液性物质（图 4）。

图1 跗关节和趾关节肿胀

图2 跗关节中有干酪样炎性物质

图3 龙骨下化脓性积液

图4 爪垫有粘液性物质

2 实验室诊断

2.1 病原分离 参考文献方法[2]将气管棉拭子放装有4.5ml改良的Frey液体培养基试管中，置于37℃温箱培养。待培养基颜色变橘黄后用0.2μm的滤膜过滤，取0.5ml滤出的菌液按1：9的比例重新接种于新的液体培养基中，37℃温箱培养2～3d；待液体培养基变橘黄后，划线接种于固体培养基37℃温箱培养3～7d；低倍显微镜下挑取单个克隆再次接种Frey液体培养基中，重复3次；将纯化的第3代培养物用甘油保菌后冻存于-20℃冰箱备用。

2.2 分子鉴定 DNA提取试剂盒购自天根生化科技有限公司。Taq酶、pMD18-T Vector、限制性内切酶及胶回收试剂盒均购自大连宝生物有限公司。引物根据文献提供[3]：

P1：5＇-CCTACGGGAGGcAGCAGT-3＇；P2：5＇-AGGCAGTCGTGTCCCAAGGTC-3＇，预期扩增目的片段大小为l077bp。

3 结果

3.1 病原的观察 低倍显微镜下挑取单个克隆接种Frey液体培养基中，重复3次纯化后可在低倍显微镜下观察到圆形且呈典型 “荷包蛋”样菌落，见图1。

图1 低倍镜下观察禽滑液囊支原体菌落（10x）

3.2 分子鉴定 分离株分子鉴定结果显示，扩增片段的大小约为 1000bp（见图 2），与预期片段大小相符，表明片段扩增正确。对该扩增基因测序结果进行BLAST基因对比分析，结果表明与GenBank上公布的MS参考株WVU1853有99%的同源性，证实该分离株为禽滑液囊支原体。

图2 PCR扩增产物的电泳结果

3 小结

本试验通过对山东平原某蛋鸡场疑似禽滑液囊支原体感染的病鸡进行支原体的分离鉴定及PCR诊断，证实该鸡群感染禽滑液囊支原体。根据检测结果制定以下防控措施。

3.1 加强饲养管理，严格卫生消毒 滑液囊支原体广泛存在于鸡群中，前期不表现症状，不易被发现。该场发病后加强了消毒工作和饲养管理。选用有效消毒药搞好环境卫生的消毒，使鸡群在良好的饲养条件下生长发育，降低了损失。

3.2 重视生物安全，控制种源选择 滑液囊支原体可垂直传播，因此鸡场在引种过程中要控制种苗来源，避免从疫区引进种蛋和雏鸡，并加强检疫和防疫。建议实行自繁自养和全进全出制。确保病鸡全部淘汰，要做到及时扑杀并无害化处理，防止疫病传播。

3.3 治疗 目前对于滑液囊支原体的控制，一直选用药物治疗与疫苗预防相结合的手段[4，5]。药物治疗虽能减少经济损失，但不能从根本上消除整个禽群内的滑液囊支原体感染，临床上一旦确诊该病，多采用多次用药的方法以达到抑制滑液囊支原体生长。对该场发病鸡推荐泰乐菌素和恩诺沙星交替使用[6]，连续两个疗程，每个疗程5d，并在饮水中适当添加优质电解多维和葡萄糖，经两个疗程治疗后基本控制病情，未再造成严重损失。