姜晓斐 罗心平 高秀芳 施海明

(复旦大学附属华山医院心内科 上海 200040)

红景天是景天科红景天属多年生草本或亚灌木植物,生长于高寒低氧地带,药理作用广泛[1],其耐缺氧、抗心肌缺血作用的机制[2-3]一直受到关注。肾上腺髓质素(adrenomedullin,ADM)属于降钙素基因相关肽家族成员,具有促进血管扩张、内皮细胞增殖、血管新生等多种生物学效应[4-5],降钙素受体样受体(calcitonin receptor-like receptor,CRLR)是ADM的特异性受体,与之结合产生系列生物学效应。我们之前的研究[6-8]证实红景天具有促缺血心肌血管新生作用,这一作用主要存在于低氧状态下,与红景天上调ADM及CRLR的表达有关,并且作用具有一定的靶向性。缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor 1 alpha,HIF-1α)[9-10]是体内氧稳态的主要调节因子,在维持体内氧平衡中起着举足轻重的地位,目前已知ADM基因有多处HIF-1结合位点,CRLR基因启动子中亦含有HIF-1结合位点,HIF-1α是否是红景天对ADM系统调节作用的上游机制尚不清楚。因此我们通过低氧状态下红景天处理人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)观察ADM、CRLR及HIF-1α基因的表达情况,并通过siRNA技术敲低HIF-1α基因探讨红景天作用中ADM及其受体CRLR与HIF-1α之间的关系。

材 料 和 方 法

细胞培养HUVECs由中科院细胞库提供。细胞复苏后贴壁培养于含10%胎牛血清的1640培养液中,置于5% CO2、饱和湿度的37 ℃恒温培养箱中培养传代,取对数生长期细胞进行实验。

药物与药物配置大花红景天块茎购于上海雷允上大药房。红景天块茎粉碎成粉状,入中药提取罐加水加热,提取药汁、筛网过滤、真空浓缩后入真空干燥箱干燥,干……