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太子参均一多糖HPLC—FLD检测方法的建立

2018-09-18栗园杨斌阚永军胡娟庞文生

中国民族民间医药·下半月 2018年1期

栗园 杨斌 阚永军 胡娟 庞文生

【摘 要】 目的:建立一种太子参均一多糖的高效液相色谱-荧光检测方法(HPLC-FLD)。方法:用异硫氰酸荧光素(FITC)标记太子参均一多糖,采用HPLC-FLD,考察不同溶剂、流动相、色谱柱对检测结果的影响,确定最佳检测条件,建立太子参荧光均一多糖的HPLC-FLD检测方法。结果:荧光检测激发波长为490nm,发射波长为518nm;大连依利特Hypersil BDS C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱;样品溶于30%乙腈,乙腈-0.01mol/L磷酸二氢钾(30∶[KG-*3/5]70)为流动相;确定HPLC-FLD检测荧光多糖最佳条件。结论:该方法准确、有效,可用于检测太子参荧光均一多糖,为太子参多糖在体内外吸收特征和活性研究奠定基础。

【关键词】 太子参均一多糖;HPLC-FLD;检测方法

【中图分类号】R284.1 【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517(2018)02-0021-05

太子参为石竹科植物孩儿参Pseudostellaria heterophylla (Miq.) Pax ex Pax et Hoffm.的干燥块根,具有益气健脾、生津润肺的功效[1],其多糖有显著的降血糖作用,且能降低血脂水平,改善脂质代谢紊乱[2]。课题组前期利用水提醇沉法得到太子参粗多糖,采用DEAE-纤维素、葡聚糖凝胶色谱柱对太子参粗多糖进行分离纯化得到均一多糖[3-6]。为了进一步考察均一多糖的活性,建立灵敏、特异性强的检测方法,是监测均一多糖细胞体外/动物体内吸收、代谢特征的关键。

目前检测多糖的方法有分光光度法、柱前衍生-高效液相色谱法、酶联免疫法、电化学法。传统苯酚硫酸分光光度检测法粗糙、灵敏度低;酶分析法或电化学法虽然检测灵敏度高,但受到特异性及样品中污染物干扰的限制;色谱法能够准确、灵敏地对多糖进行定性定量的分析,因此在多糖的分析中占有非常重要的地位;……

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