王 琴，邹自英，谭积善，刘 媛，连丽莎

肠杆菌科细菌是引起医院感染的重要病原菌之一，碳氢酶烯类药物是治疗肠杆菌科细菌感染的首选抗生素之一。近年来，耐碳氢酶烯类药物肠杆菌科细菌(carbapenem-resistant Enterobactericacea，CRE)不断出现，冲击着碳氢酶烯类药物在治疗肠杆菌科细菌感染中的地位。2017年2月WHO将CRE列为极为重要的迫切需要新型抗菌药物的细菌成为目前全球关注的热点[1]。为了解我院CRE的流行现状，本文收集我院2014-2016年分离3262株肠杆菌科细菌并对其耐药性进行分析，为临床合理用药提供依据。

1材料与方法

1.1菌株：我院2014-2016从临床各科标本中分离获得的137株CRE。CRE纳入标准为2015年美国疾病控制及预防中心颁布的标准(见《医疗机构CRE防控指南》)，即亚胺培南(IMI)最低抑菌浓度(MIC)≥4μg/ml和(或)厄他培南(ETP)最低抑菌浓度(MIC)≥2μg/ml

1.2仪器与试剂 VITEK2-compact全自动微生物分析鉴定仪、GNI鉴定卡、AST-GN13药敏卡均为法国梅里埃公司产品。美罗培南(MPN)纸片为北京天坛生物科技有限公司产品。MH琼州平板为郑州贝瑞特生物公司产品。胰酪胨大豆肉汤培养基(TSB)为Oxoid产品。质控菌株：大肠埃希菌ATCC25922、阴沟肠杆菌ATCC700323、肺炎克雷伯菌ATCCBAA1705和ATCCBAA1706购自中国工业菌种保藏所。

1.3试验方法

1.3.1菌株鉴定和药敏试验 严格按照《全国临床检验操作规程》第3版采集分离培养标本，获得纯培养后，采用GNI鉴定卡和AST-GN13药敏卡在VITEK2-compact鉴定仪上进行菌株鉴定和药物敏感试验，并用纸片扩散法(K-B)作为补充试验。

1.3.2mCIM试验 取1μl接种环的过夜培养纯菌落于2 ml TSB肉汤中，震荡混匀10 s；每管放入一张含10μg美罗培南的无菌纸片，确认纸片浸没于菌悬液中，37℃环境孵育4 h；……