侯晓杰，梁魁景，欧阳汝欣，芦站根

(衡水学院生命科学系，河北 衡水 053000)

近年来苹果轮纹病的危害日趋严重，发生频率大幅增加，严重影响了我国苹果品质和产量，使果农遭受巨大经济损失。我国华北、华东、东北等地苹果轮纹病发生严重，国光、富士、金冠、红月等都是易感品种[1]。目前，植物内生菌在病虫害生物防治方面已经应用，植物内生真菌、细菌、放线菌防治植物病害效果显著。例如，利用大豆根瘤内生细菌防治棉花枯萎病[2]，桃树根部内生细菌防治桃褐腐病[3]，剑麻内生细菌JM-3防治苹果腐烂病[4]，姜、蒜内生菌防治苹果轮纹病[5]等。

衡水湖的外来入侵植物黄顶菊Flaveriabidentis，根茎发达，适应性强，具较强的化感作用。黄顶菊入侵性如此强大，在其体内的内生菌与它互利共生，所以肯定具有协同作用[6]。菌株本身或分泌物具有抑制其他植物生长的化学物质。本研究以衡水湖外来入侵植物黄顶菊为材料，研究其组织内可培养内生菌对于苹果轮纹病病菌Botryosphaeriadothidea是否有拮抗作用[7]，期望找出能够抑制苹果轮纹病病菌生长的菌株。

1 材料与方法

1.1 材料 黄顶菊，2015年10月6日采于衡水湖国家湿地公园，1 a生完整植株。苹果轮纹病病菌，来源于衡水学院生命科学系园林植物学实验室。

1.2 方法

1.2.1 内生细菌的分离、纯化 用自来水冲洗黄顶菊3 min，去除植株表面附着的泥沙，室内晾干。分别取根、茎、叶、花各5 g，无菌水清洗干净，置于75%酒精溶液中浸泡30 s，转至3.125%次氯酸钠溶液中浸泡6 min，无菌水清洗5次。将各部分组织分别剪碎放入研钵中，加入10 mL无菌水，充分研磨，静置备用。……