复方地黄颗粒对阴虚动风证帕金森病模型大鼠神经营养因子及其受体的影响
2018-09-12梁建庆何建成
梁建庆,何建成
帕金森病(Parkinson's disease,PD)是一种常见的神经系统退行性疾病,目前尚无理想的防治措施,传统治疗以左旋多巴(3,4-dihydroxyphenyl-lalanine,L-DOPA)为主,但常出现诸多不良反应如“开关”现象、异动症等,且随着服用药物时间的延长,不良反应明显加重。本课题组前期研究表明,无论是在PD治疗,还是降低L-DOPA的不良反应方面,复方地黄颗粒均有较好疗效[1]。基于此,本研究制备阴虚动风证PD大鼠模型,采用复方地黄颗粒进行干预治疗,检测大鼠脑内神经营养因子(neurotrophic factors,NTFs)及其受体表达,以探索复方地黄颗粒治疗PD的作用及机制。
1 材料与方法
1.1 实验动物及条件 雄性SPF级SD大鼠,体重180~200g,由上海中医药大学实验动物中心提供(许可证号:SYXK(沪)2008-0016)。动物饲养环境:恒温(23±2)℃,相对湿度60%~65%,自动光-暗控制(7:00~19:00光照,19:00~7:00暗置),动物摄食、饮水及活动自由。
1.2 主要试剂和仪器 6-羟基多巴胺(6-OHDA,批号:MKBP0832V)、阿扑吗啡(apomorphine,APO,批号:SLBF6369V)、抗坏血酸(批号063K1082)为美国Sigma公司产品;美多芭(Madopar,0.25g/片,批号:SH1737)购自上海罗氏制药有限公司;庆大霉素(0.3g/支)购自上海第一制药厂。抗神经生长因子(nerve growth factor,NGF)抗体、抗脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)抗体、抗胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)抗体、抗原肌球蛋白受体激酶A(tropomyosin receptor kinase A,TrkA)抗体、抗TrkB抗体、抗Ret抗体、抗酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)抗体、抗β-肌动蛋白(β-actin)抗体购自英国Abcam公司;抗GDNF家族受体α1(GDNF family receptor α1,GFRα1)抗体购自美国Santa Cruz Biotechnology公司。大鼠脑立体定位仪(RWD-68003型)购自深圳瑞沃德生命科技有限公司;化学发光成像系统(FC-M型)购自美国ProteinSimple公司。
1.3 药物制备 复方地黄颗粒委托国家中药制药工程技术研究中心制备。处方:熟地黄、白芍、钩藤、珍珠母、丹参、石菖蒲、全蝎,上海中医药大学提供。……
