马世蓉 陈杰 曾忠良

摘要：为了确定太子参须多糖的提取工艺，文章采用苯酚硫酸法测定多糖含量，通过考察料液比、提取时间、提取次数及酸碱度4个单因素，采用L。（34）正交实验优化提取工艺，实验结果显示，最佳提取工艺为料液比1：18，提取时间3h，提取2次，pH为8，多糖提取率为4.68%。由此，文章认为优选的提取工艺稳定，可为太子参须多糖的提取提供参考。

关键词：太子参须；多糖；提取工艺

太子参为石竹科植物孩儿参Pseudotellariaheterophylla（Miq.） Pax ex pax et hoffm.的干燥块根，具有补益脾肺、益气生津的功效，主要含糖类、氨基酸、皂苷、环肽、挥发油化学成分。研究表明，太子参具有增强机体免疫、抗疲劳、抗应激、抗肿瘤、镇咳及抗菌抗病毒、延缓衰老、保护心肌等作用。

太子参作为药食同源的滋补中药，因其确切的功效，国内外对太子参的需求也日益增加。為满足不断增加的市场需求，人工栽培太子参的地区与种植面积即使增加，也因在种植过程中存在的严重的运作障碍、不良气候等因素的影响，目前仍然出现太子参药材资源的短缺，导致其市场价格近年来一直居高不下。而太子参须为太子参在加工过程中被废弃的不定根和根尖部分，其占太子参质量的10%-15%，被当废物丢弃可能会造成资源的大量浪费，而须中含多糖和皂苷等成分。因此，为减少浪费、充分利用、合理开发资源，文章以多糖为研究目标，通过正交试验优化太子参须多糖的提取工艺，为太子参须多糖的进一步研究提供理论依据，也为进一步的临床试验奠定实验及理论基础。

1 材料与仪器

1.1 材料

太子参植物采自福建枳荣县，批号：20170128，经分拣、除杂及干燥。

1.2 试剂

浓硫酸、苯酚、95%乙醇、葡萄糖、无水乙醇、磷酸、氢氧化钙、三氯乙酸、正丁醇（分析纯），考马斯亮蓝G-250（成都市科龙化工试剂厂），牛血清白蛋白（如吉生物科技）。

1.3 仪器

紫外分光光度计UV1800（上海美谱达仪器有限公司），ABBS-S型十万分之一天平（北京赛多利斯仪器系统有限公司），电热恒温鼓风干燥箱（上海齐欣科学仪器有限公司），pHS-25pH计（仪电科学仪器有限公司），调温电热套（北京中兴伟业仪器有限公司），旋转蒸发仪（河南省予华仪器有限责任公司）。

2 实验方法

2.1 多糖含量的测定

标准曲线的制备，结果标准曲线为：A=7.174 3c-0.0142（R2=0.999 3），葡萄糖质量浓度在9.106-91.060ug/mL范围内与吸光度线性范围良好。按照标准曲线的方法检测样品含量，计算多糖提取率。

2.2太子参须多糖的提取

取30 9干燥至恒重的太子参须，加一定比例的水浸泡th，在一定的pH和提取时间下煎煮，过滤，滤液合并，减压浓缩至30 mL，加4倍95%乙醇，置冰箱中静置至上清液澄清，并用95%乙醇、无水乙醇洗涤，50℃烘箱中干燥，得粗多糖。多糖提取率=粗多糖质量（m）×粗多糖浓度/药材质量（m）×100%。

2.3 单因素试验

2.3.1 料液比的影响

取5份30g的太子参须，分别以料液比为1：18，1：20，1：22，1：24，1：26加入蒸馏水浸泡th后，进行煎煮两次，提取2h，过滤浓缩，醇沉干燥后，计算多糖提取率。

2.3.2 提取时间的影响

取5份30g的太子参须，以料液比1：20加入蒸馏水浸泡th后，煎煮1次，分别提取0.5，1，2，3，4h，过滤浓缩，醇沉干燥后，计算多糖提取率。

2.3.3 提取次数的影响

取5份30g的太子参须，以料液比1：20加入蒸馏水浸泡1h后当提取次数分别为1，2，3，4次，过滤浓缩，醇沉干燥后，计算多糖提取率。

2.3.4 溶液酸碱度的影响

取5份30g的太子参须，分别调节蒸馏水的pH为5，6，7，8，9以料液比为1：20加入，浸泡th后，煎煮1次，提取2h，过滤浓缩，醇沉干燥后，计算多糖提取率。

2.4 正交实验

由单因素实验结果，选料液比、提取时间、提取次数及酸碱度4个因素，采用L9（34）正交实验，对多糖的提取进行考察，优化粗多糖提取的最佳工艺。实验因素与水平如表1所示。

2.5最佳工艺验证

取太子参须3份，每份30g，按最佳工艺条件，提取次数改为2次进行提取，测定多糖含量。结果太子参须粗多糖含量均值为4.68%，RSD=2.4%。说明该工艺稳定可行。

3 结果与分析

3.1 单因素试验结果

3.1.1 料液比的影响

当料液比为1：18，1：20，1：22，1：24，1：26时，提取率分别为1.31%，1.51%，2.01%，2.12%，2.13%。提取率随料液比的增加逐渐升高，当料液比为1：24时，提取率随料液比的增大趋于平行。单因素试验得出的最佳料液比为1：24。

3.1.2 提取时间的影响

当提取时间为0.5，1，2，3，4h，提取率分别为1.7 8%，2.21%，2.56%，2.72%，2.76%。提取率随时间的延长提取率含量增加，当达到3h后，趋于平稳，提取率最高的时间选择为3h。

3.1.3 提取次数的影响

当提取次数分别为1，2，3，4次时，多糖的提取率分别为1.5 g%，2.07%，3.16%，3.31%。提取次数越多，多糖提取率越高。当提取次数超过3次后，多糖提取率趋于平行，因此，最佳提取次数为3次。

3.1.4 酸碱度的影响

当溶液的pH分别为5，6，7，8，9时，多糖的提取率分别为1.45%，1.91%，2.23%，2.lg%，2.02%。在煮沸条件下，pH对多糖的提取率有影响。当pH为7时，含量最高。

3.2 正交试验结果

由表2可知，影响太子参须多糖提取的各因素主次顺序为：D>B>C>A，即pH>提取时间>提取次数>料液比。最佳工艺为AIB3C3D3，即料液比为1：18，提取时间3h，提取次数3次，pH为8。由于因素A极差最小，因此将A作为误差项。由表3方差分析表明，因素A和C为不显著因素，可根据实际情况确定加水量，提取2次，因素B和D对太子参须多糖提取有显著影响。经验证试验，提取2次，煎煮法提取太子参须多糖提取率平均值为4.68%，RSD=2 .1%，与最佳提取率5.01%，差异不显著。说明该工艺稳定可行。

4 结语

通过正交实验，对太子参须多糖的提取进工艺优化，最佳提取工艺条件为：料液比1：18，提取时间3h，提取次数3次，pH为8。在此条件下，提取率为4.68%。通过对太子参须多糖提取条件的优化，苯酚硫酸法测定其多糖含量并计算多糖提取率，可为工业生产提供理论依据，为今后充分利用资源、节约资源、深入开发利用资源奠定基础。