李思哲 闫天萌 李丽 晋红中 左亚刚

100730北京，中国医学科学院 北京协和医学院 北京协和医院皮肤科 协和医学转化中心

大疱性类天疱疮（BP）是自身免疫性大疱性皮肤病，病理上表现为表皮下水疱形成，常有嗜酸性粒细胞（EOS）浸润。患者外周血EOS计数、抗BP180抗体滴度与病情相关［1⁃2］。白细胞介素（IL）21是一种重要免疫调节因子，由多种细胞分泌，在固有免疫及适应性免疫中均发挥重要作用，尤其在帮助初始B细胞分化为浆细胞并分泌抗体中作用更明显［1］。许多研究发现，其在系统性红斑狼疮、炎症性肠病等自身免疫性疾病患者外周血中明显升高，IL⁃21与BP相关性研究报道较少。我们用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测BP患者血清IL⁃21与抗BP180抗体、EOS的关系。

图1 大疱性类天疱疮患者血清IL-21与抗BP180抗体、嗜酸性粒细胞绝对值、大疱性类天疱疮疾病面积指数（BPDAI）的相关性

一、对象与方法

1.对象：2016年3月至2017年4月在北京协和医院皮肤科门诊收集初诊并且最终诊断为BP的50～80岁患者，排除患有肿瘤、其他自身免疫性疾病或急性感染的患者。共收集BP患者31例，年龄50～80（68.39±9.160）岁，男11例，女20例；健康对照组31例，年龄50～ 80（64.55± 7.536）岁，男14例，女17例。两组年龄、性别差异无统计学意义（均P＞0.05）。31例BP患者组织病理均表现为表皮下水疱形成，疱液中有EOS浸润，直接免疫荧光（基底膜带线状IgG、IgM或C3沉积）、间接免疫荧光（血清中出现抗基底膜带抗体）、抗BP180抗体指标中任意2项阳性。本研究经北京协和医院伦理委员会批准，受试者均签署知情同意书。

2.试剂、仪器及方法：IL⁃21 ELISA试剂盒（英国Abcam公司），抗BP180抗体检测试剂盒（日本MBL公司），Varioskan Flash多功能酶标仪（美国赛默飞世尔科技公司）。

收集BP患者及健康对照静脉血4Ml，分离血清置-80℃冰箱保存待测。用ELISA检测血清IL⁃21及抗BP180抗体水平，按照试剂盒说明书进行，酶标仪读取450 nm吸光度，根据标准曲线计算IL⁃21及抗BP180抗体含量。31例BP患者中，27例行全血细胞计数，其中男13例，女14例。根据皮肤、黏膜各区域皮损类型、数目及患者主观瘙痒程度，详细记录13例患者BP疾病面积指数（BPDAI）分值。

3.统计学分析：用SPSS20.0统计学软件分析。两组计数资料比较用卡方检验。计量资料以M（P25～P75）表示，组间比较采用Mann⁃whitney检验，相关性分析采用Spearman检验，相关系数＞0.7为较强相关，0.4～0.7为中度相关，0.1～0.3为弱相关，P＜0.05为差异有统计学意义。

二、结果

1.患者组与对照组IL⁃21水平：患者组31例血清IL⁃21水平为255.28（156.19～ 361.59）ng/L，对照组31例为150.47（72.4～268.73）ng/L，两组差异无统计学意义（P=0.14）。

2.BP患者外周血IL⁃21水平与抗BP180抗体相关性：31例BP患者血清IL⁃21水平与抗BP180抗体［82.98（26.82～132.92）U/ml］无显著相关性（rs＝0.18，P=0.332）。见图1。

3.BP患者外周血IL⁃21水平与EOS相关性：27例有EOS计数的BP患者中，血清IL⁃21水平［256.72（150.81～884.10）ng/L］与全血EOS绝对值［0.53（0.17～ 1.04）× 109/L］无统计学相关性（rs＝0.104，P=0.606），见图1。

4.BP患者外周血IL⁃21与BPDAI相关性：13例评估BPDAI的患者中，血清IL⁃21水平［223.30（200.68 ～ 981.63）ng/L］与BPDAI［96（69 ～ 141）］无统计学相关性（rs＝-0.233，P=0.464）。见图1。

三、讨论

Li等［3］研究发现，BP患者血清IL⁃21明显升高，且与抗BP180⁃NC16A抗体滴度正相关，并得出了Tfh与IL⁃21在BP患者抗体产生中发挥重要作用的结论。而本研究结果显示，BP患者组与健康对照组血清中IL⁃21含量差异无统计学意义，IL⁃21与抗BP180抗体和血EOS绝对值及BPDAI均无显著相关性。以上结果与Li等的研究结论不一致，推测原因可能有以下几个方面：①目前对于IL⁃21与BP关系研究较少，无其他研究佐证本研究与Li等研究之间的矛盾；②Tfh细胞可分为Tfh⁃Th1、Tfh⁃Th2、Tfh⁃Th17亚群，其中IL⁃21主要由Tfh⁃Th2和Tfh⁃Th17分泌，而不是Tfh⁃Th1细胞，而在BP患者中，可能主要为Tfh⁃Th1，因此较少产生IL⁃21；③体内免疫反应中IL⁃21的作用是多样的，既能促进多种免疫反应，也能抑制众多免疫过程，IL⁃21在BP中发挥的作用有待进一步研究；④本研究样本例数较少，大部分病例来自于既往就诊患者，收集样本时多已经过系统治疗，不同治疗方案间是否对IL⁃21的产生有影响尚不得而知，后续可进行更深入研究。