张 换，王志鹏，窦 娜，吴 静，李 兰，门秀丽

(华北理工大学 基础医学院 唐山市慢性病临床基础研究重点实验室, 河北 唐山 063210)

2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus, T2DM)是一种严重威胁人类健康的代谢性疾病。近年来发病率呈明显上升趋势，而各种慢性并发症是造成T2DM患者死亡的主要原因。以往的研究多集中在糖尿病对心血管、视网膜、肾脏以及神经损伤的影响，而对于糖尿病肝损伤的研究较少。研究表明：高糖、高脂可引起肝细胞损伤，并且这种肝损伤与氧化应激反应和内质网应激反应增强有关。细胞持续性的内质网应激和氧化应激，通过激活JNK路径及诱导炎性反应，最后可导致细胞受损和凋亡[1]。

牛磺熊去氧胆酸(tauroursodeoxycholic acid, TUDCA)是一种结合型天然胆汁酸，广泛存在于人和动物的胆汁中，作为参与蛋白质折叠的分子伴侣，可减轻内质网应激反应[2]。但其对2型糖尿病肝损伤的影响及相关机制的研究尚未见报道。本研究通过自发2型糖尿病小鼠模型(db/db小鼠)，观察TUDCA对T2DM小鼠肝细胞凋亡的影响，并探讨其可能作用机制。

1 材料与方法

1.1 实验动物及试剂

SPF级13周龄雌性db/db小鼠和db/m小鼠各10只，即db/db糖尿病小鼠和表型正常的C57BL db/m小鼠(lepr-/m)，质量18～24 g(北京美森生物医药科技有限公司：SCXK京2011-0012)。Trizol试剂(Invitrogen公司)；溴酚蓝(Solarbio公司)；Tris-HCl(Fluka公司);小鼠胰岛素酶联免疫检测试剂盒(Linco公司);即用型免疫组织化学二步法试剂盒、山羊超敏二步法试剂盒和DAB显色试剂盒(北京中杉金桥生物技术有限公司)；C-JUN兔源多克隆抗体和XBP- 1羊源多克隆抗体(Santa Cruz公司)；RevertAidTMFirst Strand cDNA Synthesis Kit(Fermentas公司)；Trans2K Plus DNA Marker和2×Easy Taq PCR Super Mix(北京全式金生物技术有限公司)；……