邓飞艳，谢路远，詹世斌，刘志燕，薛 蕾，高妮娜，盛小伍*

(1.湖南省肿瘤医院/中南大学湘雅医学院附属肿瘤医院 中心实验室，湖南 长沙 410000； 2.南华大学， 湖南 衡阳 421001)

阿霉素(doxorubicin，Dox)是使用最广泛的蒽环类抗肿瘤药物，疗效显著，但因具有严重心脏毒性，临床应用受限[1-2]。阿霉素与心肌组织亲和力较高，引起心肌细胞内氧自由基产生增多、清除减少及肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor, TNF-α)等炎性因子的产生增多[1]，导致心肌细胞凋亡和坏死[2-4]，最终心肌细胞被纤维组织取代[5]，形成以肌成纤维细胞增多为特点的心肌纤维化[6]。最近研究表明内皮间质转化(endothelial mesenchymal transition，EMT)是肌成纤维细胞的重要来源[7-8]。转化生长因子β(transforming growth factor-β，TGF-β)是重要的促纤维化因子，在纤维化疾病中产生增加，可诱导EMT生成肌成纤维细胞[6-9]。目前阿霉素心肌纤维化机制仍未阐明。本实验旨在研究EMT在阿霉素心肌纤维化形成中的作用，为阿霉素心脏病的防治提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物：SPF级SD大鼠，雌雄各24只，质量(220±20)g(湖南斯莱克景达实验动物有限公司，质量合格证编号:43004700030496)。

1.1.2 主要试剂：注射用盐酸多柔比星(深圳万乐药业有限公司)；Masson试剂盒(BASO公司)；HE染色试剂盒(北京索莱宝生物科技公司)；α-SMA抗体和vWF抗体(Abcam公司)；Trizol、反转录试剂盒和real-time PCR试剂盒(北京全式金生物技术有限公司)。

1.2 方法

1.2.1 大鼠分组及处理：将大鼠随机分成对照组和阿霉素1、2、6周3组(DOX-1、2和6周)，每组12只，雌雄各半。实验前适应饲养1周，观察大鼠的活动、进食及大小便情况，确保大鼠健康状态良好。对照组(每周腹腔注射0.9%氯化钠溶液1 mL/kg，每周1次，连续6周)。……