尹丽阳，罗世锋，陈 宇，漆轲婧，彭 云，万永奇，吴秀山，李永青

(湖南师范大学省部共建淡水鱼类发育生物学国家重点实验室，教育部重点实验室，生命科学学院心脏发育研究中心，湖南 长沙410081)

生物信息学分析显示ASB11蛋白在N-末端有6个串联重复的锚蛋白结构域和1个在C-末端的SOCS箱形结构域[1]。ASB11蛋白是调控Delta-Notch信号的元件，以一种细胞非自主性机制调节DeltaA与Notch之间的侧抑制，是Delta-Notch信号至关重要的调节因子[2]。近年来有研究表明，Asb11在斑马鱼胚胎发育的终端分化过程中表达下调，且对于外胚层谱系分布范围具有潜在的调节作用，并表明Asb11的表达是肌肉祖细胞扩增所必须的，而其表达下调标志着终端分化的开始[3,4]。随后也有证据表明，Asb11是胚胎发育和成体肌肉再生的主要调节者[5]。

本实验室前期研究发现，Asb11基因包含的两个2.9 kb和5.0 kb转录本在心肌和骨骼肌中特异性表达[6]；前人研究表明斑马鱼Asb11基因与Notch信号通路的激活有关，而Notch信号通路与斑马鱼心脏的瓣膜及流出道的发育有关。因此，本文作者推测Asb11基因也是一种与心脏发育相关的候选基因，其对于心脏的发育可能有重要的调节作用，且其可能通过Notch信号途径调控心脏的发育。

作为近年来兴起的基因编辑技术，CRISPR/Cas9是细菌演化过程中形成的一种适应性免疫防御机制，可用来对抗外来入侵的病毒及DNA[7-9]。前人研究中将CRISPR/Cas9分为3种类型，其中Ⅱ型中的Cas9能够识别一种非编码RNA(sgRNA)，从而对靶向dsDNA序列进行定点切割[10]。因此，本文利用CRISPR/Cas9打靶技术对斑马鱼Asb11基因进行基因敲除。……